如果你的實驗室更換了新的試劑盒,，你做性能驗證了嗎？一提起性能驗證就會想到一大堆的EP文件，好復(fù)雜,！檢驗科崗位多,，人員少，每天忙得團團轉(zhuǎn),，更換個試劑盒還要做性能驗證,？交給廠家可以嗎？當然不可以,，國標GB/T22576-2008《醫(yī)學(xué)實驗室 質(zhì)量和能力的專用要求》 明確規(guī)定臨床實驗室要驗證廠家聲稱的分析性能指標,，從而保證檢驗結(jié)果的準確。

其實也沒那么復(fù)雜了,，因為我們有標準《WS/T 492-2016 臨床檢驗定量測定項目精密度與正確度性能驗證》。如果新的試劑盒性能是已經(jīng)被確認的,，那么只需按CLIA’88 要求驗證三項主要性能指標：正確度,、精密度和線性（測量區(qū)間）。

首先操作人員要熟悉儀器,、試劑、環(huán)境等方方面面,，在開始試驗前確認儀器處于良好的狀態(tài),，也就是說儀器進行了校準、環(huán)境溫濕度,，包括空氣污染等都在可控的狀態(tài),，試劑種類、數(shù)量充足,，一切能想到的都要想到,，準備就緒，ready-go,！

可以選用兩個水平的質(zhì)控品,，最好在醫(yī)學(xué)決定水平處，兩個水平是分別進行驗證的,。每個質(zhì)控品測定5天,，每天一批，重復(fù)3次,，這樣,，每個濃度水平可以得到15個測定結(jié)果。每批次檢測時質(zhì)控在控,，即可認為數(shù)據(jù)有效,。超出總均值4SD的數(shù)據(jù)視為離群值，可剔除，但注意剔除量要小于總測量數(shù)據(jù)量的5%,。

1. 批內(nèi)精密度

分別計算每一批的均值,，批內(nèi)方差Sdruni2(Sdrun12,Sdrun22…… Sdrun52)，再計算重復(fù)精密度Sr,，也就是批內(nèi)精密度,，與廠家的聲稱值進行比較，小于聲稱值即通過驗證,，大于聲稱值應(yīng)與廠家聯(lián)系并取得幫助,。

2. 批間精密度

需要計算總均值，批間方差Sb2,，以及批間標準差SI,，注意期間標準差是包括批內(nèi)與批間標準差的。得到的計算值與廠家聲稱的標準差相比較,，如果廠家給的是變異系數(shù)（CV）,，要與廠家測量結(jié)果的總均值相乘換算為標準差。通過標準差來比較,，如果小于廠家聲稱標準差,，驗證通過。如果大于聲稱值應(yīng)與廠家聯(lián)系并取得幫助,。

正確度驗證其實就是比對，推薦使用患者樣本與其他檢驗方法（其實就是其他試劑盒）進行比對,。如果只是更換試劑盒,，實驗室應(yīng)與現(xiàn)在使用的試劑盒進行比較。同樣,，首先做好準備工作,，與前面精密度驗證時的要求相同。

準備20份患者樣本,，濃度均勻分布測量區(qū)間在內(nèi),，注意標本狀態(tài)，沒有溶血,、黃疸,、乳糜哦?？梢圆捎?天,，每天5份樣本的方案，或更短的時間內(nèi)分別用試驗方法與比較方法測定完成,。每批測量室內(nèi)質(zhì)控在控,，即視為數(shù)據(jù)有效。有明顯異常的結(jié)果要分析原因，如果為樣本問題應(yīng)替換新樣本,。

記錄20對結(jié)果,，計算每個樣本兩方法見的絕對偏移（差值），可以畫個偏移圖（差值圖）簡單直觀,，以偏移（差值）為縱坐標,，比較方法的結(jié)果為橫坐標，觀察圖中不同濃度偏移分布是否均勻,，如果分布基本均勻,，取偏移的均值與廠家聲稱的數(shù)值進行比較；如果正負號與廠家聲稱一致,，且絕對值小于聲稱值則驗證通過,。如果略大于聲稱值，應(yīng)將數(shù)據(jù)進行配對t-檢驗（使用一般統(tǒng)計軟件即可實現(xiàn)）計算,，判斷兩方法是否有差異,，如果有差異，應(yīng)與廠家聯(lián)系并取得幫助,。

要注意驗證的是線性范圍哦,，什么是線性范圍,？課本上的定義先復(fù)習(xí)一遍，指對沒有進行任何預(yù)處理（稀釋,，濃縮等）的標本,，分析方法能夠直接測定出的待測物范圍，也就是系統(tǒng)最終的輸出值（活性或濃度）與被分析物的活性或濃度成線性比例的范圍,。是直接可以測定出的濃度范圍,，不是臨床可報告范圍哦。

需要準備高（H）低（L）兩個濃度的樣本,，按照H:L為0：4,，3：1，2：2,，1：3,，4：0的比例，得到5份樣本,，在一個批次內(nèi)測定完畢,，每份樣本至少測定2次。

記錄所有測定結(jié)果,，室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)在控,，認為結(jié)果有效。以理論值為橫坐標，測量均值為縱坐標做直線回歸圖,。求出線性方程和相關(guān)系數(shù)的平方r2（Excel表格輕松解決）,。如果r2＞0.995，則在這個濃度范圍內(nèi)的驗證通過,。如驗證未通過可增加樣本量及重復(fù)測量次數(shù),，如仍未通過應(yīng)與廠家聯(lián)系并取得幫助。注意測量中如果有攜帶污染,，應(yīng)根據(jù)實際情況采取恰當措施（如應(yīng)用空白隔開樣本）盡量避免對測定結(jié)果的影響,。

臨床實驗室對所選購的商品定量試劑盒進行性能驗證是保證檢驗質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，其實過程并不復(fù)雜,，借助一些簡單工具（Excel表格,，基礎(chǔ)統(tǒng)計軟件）就可輕松完成，小伙伴們快行動起來吧,！