DLBCL占非霍奇金淋巴瘤的30%-40%，其多種亞型,，形態(tài)學(xué),、免疫表型、細(xì)胞遺傳學(xué)及分子特征各不相同,，DLBCL最常見的遺傳學(xué)異常有：

? t(3;14)(q27;q32) 即BCL6-IGH:發(fā)生頻率30~40%

? t(14;18)(q32;q21)即IGH-BCL2發(fā)生頻率 20~30%

? t(8;14)(q24;q32) 即c-MYC-IGH:發(fā)生頻率7~15%

若同時(shí)伴有18q21/BCL2和8q24/C-MYC基因重排患者,，臨床進(jìn)展非常快,，預(yù)后差,。

C-MYC基因

當(dāng)發(fā)生MYC-IGH或MYC-IGK或MYC-IGL重排（單打擊）后，MYC的細(xì)胞增殖加速器功能更是發(fā)揮的一覽無余,，這也是Burkitt淋巴瘤增殖如此迅速的原因,。

Burkitt淋巴瘤中MYC確實(shí)經(jīng)常與IGH、IGK,、IGL易位,，但高達(dá)50%的DLBCL患者M(jìn)YC涉及包括BCL6、PAX5等在內(nèi)的Non-IG易位,，當(dāng)MYC易位伙伴為IG時(shí),，患者的預(yù)后才會(huì)更差,。若易位沒有累及IG基因，單純MYC基因受累的DLBCL侵襲性比較低,。

BCL2基因

BCL-2基因異常情況下：BCL-2基因會(huì)和其它基因重排,，最常見的還是免疫球蛋白基因（重鏈和輕鏈均可重排）。

雙打擊淋巴瘤

同時(shí)具有MYC和BCL2或BCL6基因易位的B細(xì)胞淋巴瘤,；預(yù)后差的原因：MYC重排導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖,，BCL2（或6）重排則腫瘤細(xì)胞不凋亡，這就是雙打擊淋巴瘤DLBCL患者的增殖高,，進(jìn)展快,，治療難度大的原因。

FL占非霍奇金淋巴瘤的22%-35%,，僅次于DLBCL,；常見t(14;18)(q32;q21)即IGH/BCL2重排，發(fā)生頻率高達(dá)90%,，t(14;18)未見重排者通常存在BCL6基因重排,。

MALT淋巴瘤占非霍奇金淋巴瘤~8%，常發(fā)生的基因異常有：

① t(11;18)(q21;q21)       API2-MALT1,，~15-40%

② t(1;14)(p22;q32)         BCL10-IGH,，~4%

③ t(14;18)(q32;q21)       IGH-MALT1，~5-20%

其中①,、③常見于胃腸消化道,、呼吸系統(tǒng)等；②常見于涎腺,、皮膚、眼及附屬器,、肝臟病變等,。

BL占非霍奇金淋巴瘤的~2.5%，遺傳學(xué)改變以MYC基因重排為主：

? t(8;14) (q24;q32)     c-MYC/IGH: 75~85%

? t(2;8)(p12;q24)        IGK/MYC: ~10%

? t(8;22)(q24;q11)      IGL/MYC: ~5%

另：5~10%DLBCL患者亦可發(fā)生t(8;14),，提示增殖活性高,，進(jìn)展快。

ALK 間變大細(xì)胞淋巴瘤（ALK ALCL）多在三十歲之前發(fā)病,，占成人非霍奇金淋巴瘤的3%,，兒童淋巴瘤的10-20%，并以男性占多數(shù)（6.5:1）最常見的遺傳學(xué)異常：

? t(2;5)(p23;q35)          ALK-NPM  ~75%

? t(1;2)(q25;p23）        TPM3-ALK

? t(2;17)(p23;q23)         ALK - CLTCL

? t(X;2)(q11;p23)          MSN-ALK等

ALK-間變大細(xì)胞淋巴瘤（ALK-ALCL）多見于老年人,，＞61歲,，無性別差異（男：女=0.9:1），DUSP22重排約占30%ALK-的病例,，預(yù)后較佳,，5年生存率約90%,，由于DUSP22與IRF4兩個(gè)基因均位于6號(hào)染色體長臂，位置緊鄰,， IRF4可用來檢測(cè)DUSP22異常,。

原發(fā)性皮膚ALCL約占皮膚淋巴瘤的10%左右，目前已證實(shí)原發(fā)性皮膚ALCL和ALK-原發(fā)性系統(tǒng)性ALCL是兩個(gè)不同的實(shí)體,；IRF4位于6p25,， IRF4基因斷裂在原發(fā)皮膚ALCL中具有很高的特異性及陽性預(yù)測(cè)值（99%和90%）可用于輔助診斷。

僅占彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的0.05%,，它主要發(fā)生于兒童和年輕人,，主要累及Waldeyer環(huán)或頭頸淋巴結(jié)，分子生物學(xué)表現(xiàn)為IRF4基因重排（FISH檢測(cè)IRF4基因斷裂）,。

MCL占非霍奇金淋巴瘤~6%,，最常見的遺傳學(xué)異常：- t(11；14)（q13;q32）  CCND1/IGH: ~95%,，傳統(tǒng)細(xì)胞遺傳學(xué)方法只能檢出70~75% t(11,；14) （q13;q32），F(xiàn)ISH方法可檢出率為80% ~ 100%,。

以上淋巴瘤中的FISH應(yīng)用主要涉及斷裂探針以及融合探針,，判讀標(biāo)準(zhǔn)（山西省腫瘤病理科）分別為：

基因斷裂判讀標(biāo)準(zhǔn)

Ratio > 50%（25/50）判斷為陽性結(jié)果，提示該樣本基因發(fā)生斷裂

Ratio < 10%（5/50）判斷為陰性結(jié)果,，提示該樣本基因未發(fā)生斷裂

Ratio在10%-50%之間,，需增加計(jì)數(shù)50個(gè)細(xì)胞，重新計(jì)算Ratio

若Ratio ≥ 15%（15/100）,，則判斷為陽性

若Ratio < 15%（15/100）,，則判斷為陰性

（分離的距離應(yīng)至少大于2個(gè)信號(hào)直徑的距離才可認(rèn)為是異常信號(hào)）

基因融合判讀標(biāo)準(zhǔn)

Ratio > 50%（25/50）判斷為陽性結(jié)果，提示該樣本基因發(fā)生融合

 Ratio < 10%（5/50）判斷為陰性結(jié)果,，提示該樣本基因未發(fā)生融合

 Ratio在10%-50%之間,，需增加計(jì)數(shù)50個(gè)細(xì)胞，重新計(jì)算Ratio

若Ratio ≥ 15%（15/100）,，則判斷為陽性

若Ratio < 15%（15/100）,，則判斷為陰性

綜合以上郗主任的介紹,，接著也用科室生動(dòng)的案例來進(jìn)一步分享：

1

病例1

女，79歲,，右頸淋巴結(jié)穿刺,，鏡下表現(xiàn)為中等大小異型淋巴細(xì)胞。

IHC：CD20 ,，CD3-,,，CD5-，CD23-,，CD21-,，CyclinD1-，Ki67約80% ,，CD10-,，BCL-6約60% ，MUM1約20% ,，BCL2 ,，Cmyc約80% 。

FISH：C-MYC基因斷裂,、BCL-2基因斷裂,、BCL-6基因未見斷裂。

診斷：高級(jí)別B細(xì)胞淋巴瘤,，伴C-MYC,、BCL-2基因重排。

2

病例2

女,，52歲,，腹股溝淋巴結(jié)，鏡下表現(xiàn)為小淋巴細(xì)胞積極狀分布,。

IHC：CD3-,，CD20 ，CD5-,，CD23-,，CyclinD1-,，CD21顯示濾泡樹突網(wǎng),，BCL2 ，BCL6 ,，CD10生發(fā)中心局灶 ,，MUM1-，Ki67生發(fā)中心約20%,。

FISH：BCL-2基因斷裂,。

診斷：濾泡性淋巴瘤2級(jí),。

3

病例3

男, 57歲，左腋下淋巴結(jié)穿刺,。

IHC：CD3（-）,，CD20（彌漫 ），Ki67（約20% ）,，CD23（濾泡樹突細(xì)胞 ）,，CD5（弱 ），Cyclin D1（-）,，CD10（-）,，CD21（濾泡樹突細(xì)胞 ），MUM1（10%弱 ）,，Bcl-6（-）,，CD30（-），c-myc（-）,，BcL-2（約90% ）,，p53（約80% ），EBER(-),。

診斷：B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤,，細(xì)胞小，胞漿空淡,，增殖活性低,，符合結(jié)內(nèi)邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤。

FISH：MALT1基因未見斷裂,，部分腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)＞2對(duì)紅綠融合信號(hào),，提示MALT1基因多拷貝。

診斷：結(jié)內(nèi)邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤,。

4

病例4

女,，41歲，甲狀腺右葉及峽部,，鏡下表現(xiàn)為甲狀腺組織內(nèi)可見彌漫分布的淋巴樣細(xì)胞,，細(xì)胞較大，核分裂像易見,，可見星空現(xiàn)象,。

IHC：CD3（-），CD20（ ）,，Ki67（約90% ）,，CyclinD1（-），SOX-11（-）,，CD10（ ）,，MUM1（-）,，BcL-2（-），Bcl-6（約80% ）,，C-MYC（約70% ）,，AE1/AE3（-），CD30（-）,，EBER(-),。

FISH：C-MYC基因斷裂。

診斷：散發(fā)型Burkitt淋巴瘤,。

5

病例5

男,，37歲，胃竇活檢,，鏡下表現(xiàn)為粘膜固有層見片狀異型細(xì)胞,。

IHC：AE1/AE3（-），CEA（-）,，CDX2（-）,，Syn（-），CGA（-）,，Ki67（約70% ）,，HER-2（0），LCA（-）,，CD3（-）,，CD20（-），CD68（-）,，CD30（ ）,，CD15（ ），A1K-1（ ）,，MUM1（-）,，CD7（ ），GranzymeB（ ）,，TIA-1（ ）,，CD4（ ），CD8（-）,，EBER(-),。

FISH：ALK基因斷裂。

診斷：ALK 間變大細(xì)胞淋巴瘤,。

6

病例6

女,，23歲,，右扁桃體,，鏡下表現(xiàn)為鱗狀上皮下間質(zhì)內(nèi)可見中等偏大的淋巴樣細(xì)胞彌漫片狀生長,。

IHC：CD3（-），CD20（ ）,，CD10（-）,，MUM1（約80% ），Bcl-6（約80% ）,，Ki67（約70% ）,，CD5（-），CD30（ ）,，c-myc（約50% ）,，BcL-2（-），p53（突變型,， ）,，AE1/AE3（-），EBer（-）,，

FISH：IRF4基因斷裂,。

診斷：伴IRF4重排的大B細(xì)胞淋巴瘤。

7

病例7

會(huì)診病例：男,，61歲,，咽喉部，鏡下表現(xiàn)為小淋巴細(xì)胞結(jié)節(jié)狀增生,。

原單位IHC：CD3-,，CD20 ，CD5-,，CD10-,，CD23-，BCL2 ,，BCL-6-,，CyclinD1 ，CD21-,，KI67約20% ,。

我院IHC：CD5（-），CyclinD1（ ）,，CD10（-）,，BCL-6（-）。

FISH：CCND1/IGH基因融合,。

診斷：套細(xì)胞淋巴瘤,。

以上為本次講座紀(jì)實(shí)的全部?jī)?nèi)容，可見淋巴瘤FISH應(yīng)用普遍且廣泛，而不同講師的分享常聽常新,，可以溫故而知新,。

（直播回放）