能水解:青霉素,頭孢菌素及單環(huán)酰胺類抗生素,, 不能水解:碳青霉烯類和頭霉素(頭孢西丁,,頭孢替坦) 酶活性:可被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑抑制,如克拉維酸,、舒巴坦,、他唑巴坦、阿維巴坦等 檢測方法:見之前的文章,。 2. AmpC酶 能水解:青霉素,、頭孢菌素(1-3代)、頭霉素,、氨曲南 不能水解:四代頭孢菌素,、碳青霉烯類抗生素 酶活性:不能被酶抑制劑所抑制:克拉維酸、舒巴坦、他唑巴坦 能被硼酸,、氯唑西林和阿維巴坦所抑制 分類: A, 誘導型:可以被β-內(nèi)酰胺類抗生素誘導,。強誘導劑:克拉維酸、亞胺培南,;弱誘導劑:三代頭孢,、頭孢吡肟。常見菌株:銅綠,、陰溝腸桿菌,、產(chǎn)氣克雷伯菌。 B, 穩(wěn)定表達型:由于ampD的突變,,導致ampC基因被激活,,大量表達。常見菌株:大腸埃希菌,、志賀菌,、鮑曼不動桿菌。 C,,質(zhì)粒介導型,,由于AmpR蛋白缺陷,導致ampC基因持續(xù)低表達,。常見菌株:大腸埃希菌,、肺炎克雷伯菌、沙門菌,。 注:AmpR,,ampD, ampE, ampG是AmpC酶的調(diào)節(jié)因子,參與其合成,。AmpR在非誘導狀態(tài)下作為AmpC轉(zhuǎn)錄的抑制因子,,而在誘導狀態(tài)下作為轉(zhuǎn)錄激活因子。ampD是AmpC表達的負調(diào)控基因,。 檢測方法: 頭孢西丁紙片法(初篩) 因為產(chǎn)AmpC酶的菌株可以水解頭孢西丁,,因此頭孢西丁耐藥可以作為產(chǎn)AmpC酶的初篩方法。另外,,AmpC酶可以被硼酸抑制,,也可以作為檢測方法。 頭孢西丁三維實驗也可作為檢測方法,。具體做法為:將0.5麥氏單位大腸埃希菌ATCC25922 菌液涂布于M-H平板,,在平板中心貼上30微克頭孢西丁紙片,使用手術(shù)刀片在離紙片邊緣3-5mm處由里向外切割一道狹縫,,取40微升經(jīng)凍融法或超聲粉碎法的受試菌酶粗酶粗提取物由里向外加入狹縫內(nèi),。將MH平板放入35℃孵箱過夜,。觀察酶粗提物對頭孢西丁的抑制情況。若觀察到狹縫與抑菌圈交接處出現(xiàn)擴大的長菌區(qū)域,,視為三維試驗陽性,,即AmpC酶試驗陽性。 |
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