酚紅在細(xì)胞培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑。一般情況下,,可以通過酚紅的指示作用判斷培養(yǎng)基的pH值,,但低血清或是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通細(xì)胞培養(yǎng)基中的酚紅含量不同,,不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗(yàn)來判定pH值,建議使用pH計(jì)進(jìn)行測定,。酚紅通常對含血清的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生明顯影響,,也可通過純化技術(shù)去除,但酚紅在無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡,,影響細(xì)胞生長,。 碳酸氫鈉在細(xì)胞培養(yǎng)基中主要是作為緩沖系統(tǒng),此外還具有調(diào)節(jié)滲透壓的作用,。通常產(chǎn)品使用說明中的碳酸氫鈉推薦量是一個標(biāo)準(zhǔn),、安全量,是在科學(xué)的基礎(chǔ)上根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)所得,。但是由于不同的細(xì)胞系(株)不同,,同一株細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境也可能不同(細(xì)胞耐受性不同等),且存在的地域性水質(zhì)差異等,,在實(shí)際生產(chǎn)過程中也可稍作改動,,但使用者需做相應(yīng)的檢測(理化及細(xì)胞生產(chǎn)試驗(yàn)等)。 HEPES是一種非離子緩沖液,,在pH 7.2 ~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,,在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉(0.34g /L)共用,,以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加,。其安全濃度范圍是10~25mmol/L。 丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,,但是在沒有葡萄糖的條件下,細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉,。 谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,,4 ℃下放置1周可分解50 %,使用中最好單獨(dú)配制,,置-20 ℃冰箱中保存,,使用前加入細(xì)胞培養(yǎng)液中。 |
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