前言

細(xì)胞培養(yǎng)市場上有不同品牌,，不同種類的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，但是其配方都是大同小異,，都含有幾種相同的重要組分,，那么我們逐一說明。

葡萄糖

·葡萄糖濃度代表什么,？

·培養(yǎng)基中的葡萄糖濃度范圍從1g/L（5.5mM）到10g/L（55mM）

·5.5mM的葡萄糖濃度與體內(nèi)正常血糖的濃度類似

·高糖培養(yǎng)基可以滿足腫瘤細(xì)胞等非生理狀態(tài)細(xì)胞的體外培養(yǎng)需求

·選擇高糖還是低糖培養(yǎng)基,？

·根據(jù)不同細(xì)胞類型選擇

    通常原代細(xì)胞、干細(xì)胞使用低糖培養(yǎng)基

    永生細(xì)胞系等病理狀態(tài)的細(xì)胞使用高糖培養(yǎng)基

丙酮酸鈉

·作用

·葡萄糖不足時為細(xì)胞提供碳源

·直接進(jìn)入三羧酸循環(huán)，可以被快速利用

·什么情況下添加丙酮酸鈉,？

·之前培養(yǎng)條件已含有丙酮酸鈉

·代謝旺盛的細(xì)胞

丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM,，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.

酚紅

·pH值指示劑

·培養(yǎng)基顏色的變化幫助細(xì)胞培養(yǎng)者判斷是否需要換液等操作

·什么情況下建議選擇無酚紅培養(yǎng)基,？

酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素）,，干預(yù)某些細(xì)胞在克隆級密度時生長。為避免固醇類反應(yīng),，在干細(xì)胞培養(yǎng)或者進(jìn)行低密度細(xì)胞生長時,，應(yīng)使用無酚紅的培養(yǎng)基。

HEPES

·作用

·穩(wěn)定pH值

·本身沒有營養(yǎng)價值,，會提高滲透壓,，并降低酚紅對pH值的指示作用

·什么情況下需要加HEPES？

·培養(yǎng)條件pH波動劇烈

·細(xì)胞對pH敏感

Hepes的貯存液濃度一般為1M,，常溫保存,。培養(yǎng)基中的終濃度為25mM

谷氨酰胺

幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺都有較高的要求。谷氨酰胺脫掉氨基后,，可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,，參與蛋白質(zhì)的合成和能量代謝。在缺少谷氨酰胺時,，細(xì)胞生長不良而死亡,。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺,。
谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,，應(yīng)置-20℃冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中,。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4度冰箱儲存兩周以上時,，應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。
試驗(yàn)操作中常配制高濃度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）,，分裝使用,，-20℃保存。使用時,，每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培養(yǎng)基中,，使其終濃度為2mM培養(yǎng)基。

誤區(qū)：

·培養(yǎng)基中的谷氨酰胺容易降解,，需要不斷補(bǔ)充

正確方案：

如果正確使用,，一般不需要補(bǔ)加，如：4℃避光保存,；分裝,，不要反復(fù)預(yù)熱,。

NaHCO3

·作用

與CO2一起形成緩沖系統(tǒng)，保持培養(yǎng)基PH值穩(wěn)定,。

GlutaMAXTM

·GlutaMAXTM 完美替代L-谷氨酰胺

·極為穩(wěn)定,，可常溫、2~8℃以及-5~-20℃保存

·毒性氨積累最小化

·使細(xì)胞的性能達(dá)到最佳

·提高細(xì)胞成活和生長

·建議不要將其用于昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)

·由于釋放谷氨酰胺有一定的延遲,，不建議用于剛復(fù)蘇的細(xì)胞