患者劉某,，男，年齡60歲,。于2020年8月13日左右拔草時出現(xiàn)頭部脹痛入住我院,。

主要表現(xiàn)為頭痛伴惡心未嘔吐，自服布洛芬,，可使癥狀減輕,。

行頭顱CT及MRI后顯示：未見明顯異常。

2020年8月18日,，該患者行血凝常規(guī)時發(fā)現(xiàn),，APTT結(jié)果單獨延長至94.4s（2號機某A品牌），其余PT、Fib,、TT均在參考范圍內(nèi),。

處理過程：

什么原因?qū)е碌腁PTT如此的延長？

于是首先查看標(biāo)本狀態(tài),，再進一步查明APTT延長的原因,。

臨床溝通：

臨床否認患者服用任何抗凝藥,，且患者無出血表現(xiàn)。

于是重采血復(fù)查,，以排除干擾因素,。

將重新采集的標(biāo)本立即分別在4號機和3號機上重復(fù)運行兩遍，結(jié)果見表2：

以上結(jié)果提示可以被糾正，患者可能為內(nèi)源性凝血因子的缺乏,。

立即外送（大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院）進行內(nèi)源性因子活性檢測：

內(nèi)源性凝血因子并不缺乏,，難道是啟動內(nèi)源性凝血級聯(lián)反應(yīng)的接觸因子HMWK或PK缺乏？

Anna Rosa Corno[1]等研究表明,，PK缺乏患者的APTT時間隨著溫育時間（即加氯化鈣之前的時間）延長而逐漸減低,，而HMWK缺乏APTT 時間不隨溫育時間變化。這可能是由于延長復(fù)鈣前的溫育時間,，通過旁路機制,，F(xiàn)XII有充分的時間轉(zhuǎn)化成為FXIIa，進而接著激活FXI,，使APTT時間縮短,。[2]

所以我們將劉某血漿和另一個APTT延長至97.7s的患者分別溫育4分鐘，8分鐘,，15分鐘,，進行比對實驗,，他們的APTT結(jié)果見表4：

患者的APTT時間隨著孵育時間的延長而縮短，我們可以初步推斷該患者的APTT延長可能是由于PK缺乏導(dǎo)致的,。

得到了患者APTT延長的原因,，接下來我們分析APTT不穩(wěn)定的原因。

結(jié)果顯示某B品牌檢測結(jié)果穩(wěn)定性較好,，且反應(yīng)曲線未發(fā)現(xiàn)異常，而某B品牌和某A品牌檢測系統(tǒng)的差別見表6：

我們對比了檢測系統(tǒng),，發(fā)現(xiàn)有兩處大的不同：1,、激活劑；2,、檢測方法,。

結(jié)合之前導(dǎo)致APTT延長的原因，我們猜測：PK缺乏對于兩種激活劑的敏感性不同,。PK缺乏對于以硅土為激活劑的試劑敏感性不足,，導(dǎo)致結(jié)果穩(wěn)定性不佳；而對鞣花酸為激活劑的試劑敏感度更高,。（這里只強調(diào)激活劑對于不同患者敏感性不同,，不代表試劑質(zhì)量優(yōu)劣）。

1.我們沒有進行采血管和EP管APTT差異的實驗,，是否患者APTT忽高忽低與采血管質(zhì)量等因素相關(guān),？

2.因為采血量等限制，在驗證PK缺乏導(dǎo)致的APTT時間依賴性改變時,，選擇溫育的時間位點太少,，應(yīng)增加時間位點，且患者并未行全套凝血因子的檢測,；

3.未建議臨床進行血栓彈力圖檢測,；

4.APTT溫育實驗應(yīng)用某B品牌的儀器（鞣花酸為激活劑）再進行一遍。

激肽釋放酶原（PK）,，參與內(nèi)源性凝血途徑和纖溶系統(tǒng)激活,，激肽生成及驗證反應(yīng)等多個生理過程，由肝臟合成,。

PK基因定位于 9號染色體,，相對分子量85000和 88000兩種，血漿中的濃度約為35～45 mg /mL，75% 的 PK和HMWK 結(jié)合形成復(fù)合物在血液中循環(huán),，僅2% ～ 5% 是以游離形式存在,。

凝血因子Ⅻ、HMWK 和 PK 一起構(gòu)成接觸階段的內(nèi)源性凝血促發(fā)系統(tǒng),這些接觸性因子的活化可引起Ⅻa 因子,、Ⅺa 因子和激肽釋放酶(KK) 的形成,，PK主要是通過活化成 KK 發(fā)揮作用，而 KK在的主要作用是激活Ⅻ轉(zhuǎn)變?yōu)棰黙,，由此加快內(nèi)源性凝血途徑的接觸激活速度,，但患者一般無出血風(fēng)險，這是由于Ⅺa 因子優(yōu)先于 PK 等接觸因子介導(dǎo)血小板和凝血酶,，且Ⅺ因子的激活不需要接觸因子的參與,，所以 PK等接觸因子在凝血酶生成中并不是必須的。

另外KK還能激活FⅪa及纖溶酶原,，所以PK缺乏的患者會有血栓的風(fēng)險,。

PK缺乏的檢查與診斷：PK缺乏為常染色體隱形遺傳，其中純合子延長明顯（50～70s）,，雜合子則基本正常,。用發(fā)色底物法或乏PK血漿凝固法可以確定PK的缺乏，一般認為活性低于50%或0.5U/L存在PK缺乏,。

值得注意的是,，患者若狼瘡抗凝物陽性，則需要用發(fā)色底物法檢測,，不然會導(dǎo)致假陽性,，而目前PK缺乏癥的確診方法為基因檢測。[3-5]

參考文獻及書籍：

[1]Anna Rosa Corno, Jonica Campolo.Automated APTT cycle for the rapid identification of plasma prekallikrein deficiency.Thrombosis Research 126 (2010) e152–e153.

[2] Asmis LM, Sulzer I, Furlan M, L?mmle B. Prekallikrein deficiency: The characteristic normalization of the severely prolonged aPTT following increased preincubation time is due to autoactivation of factor XII. Thromb Res 2002;105:463–70.

[3]王振義,，李家增等《血栓與止血基礎(chǔ)理論與臨床》第三版P99-109

[4]Schmaier AH, McCrae KR. The plasma kallikrein-kinin system: its evolution from contact activation. J Thromb Haemost 2007;5:2323–9

[5]李家增,，王鴻利等《血栓與出血的診斷及治療》p148-149

審稿：宋鑒清

編輯：李素杰

全自動化APTT糾正試驗解決方案

浙江普施康生物科技有限公司，是一家立足于體外診斷（ IVD）的高新技術(shù)企業(yè),，擁有國際領(lǐng)先的離心微流控平臺技術(shù),，聚焦于危急癥、慢病管理檢測領(lǐng)域,，重點研發(fā)用于血栓與止血功能檢測的新型POCT診斷系統(tǒng),，并開發(fā)出解決儀器外手工孵育2h痛點的全自動化APTT糾正試驗，零人工孵育,，上樣后自動完成下圖全部7個試驗,。更多了解請點擊下面的糾正試驗圖片鏈接。