作者:馮杰雄(廣州市紅十字會醫(yī)院檢驗科) 來源:中華檢驗醫(yī)學網(wǎng),、檢驗醫(yī)學微信公眾平臺 凝血試驗檢測結(jié)果的準確性與分析前預處理密切相關(guān),在實驗室中常遇到可能干擾凝血檢測的因素,,其中最常見的是高血脂,。下面由我科遇到的一例標本展開討論。 案例一:ICU,, 5床,,某病人,凝血結(jié)果如下:PT:11.4秒,PTINR:0.98,APTT>180秒,,TT:70.4秒,,F(xiàn)IB:3.2 g/L, D-二聚體:14190ug/L,AT-III:48%.(如圖) 圖1 圖2 對于以上結(jié)果:檢驗人員提出疑問,為何APTT,TT日間差異這么大,? 檢驗科反饋分析如下: 1,、標本情況如下,標本嚴重脂濁,,咨詢臨床病人在輸注脂肪乳期間抽血,。對于此類標本你會如何處理? 圖3
2、儀器圖形如下: 圖4
APTT結(jié)果報警無凝固,,直接發(fā)>180秒,? 發(fā)現(xiàn)標本脂濁后,檢驗科咨詢并告知ICU護士,,病人在輸注脂肪乳期間禁止抽血,,應在輸注6小時候后再進行抽血。同時,,檢驗科人員將標本血漿用無抗凝劑EP管放置高速離心機 15000 r /min 離心 8min,,澄清脂血,用Sysmex CS5100 全自動血凝分析儀進行再次檢測,,結(jié)果如下: 圖5 結(jié)果檢測如上圖:APPT:***,,檢測不出,PT:16.8秒,,TT:16.0秒,,F(xiàn)IB:3.47g/L,D-二聚體:13800ug/L,,AT-III:52%,,查看儀器報警如下:前帶反應錯誤:反應太慢(見圖6),根據(jù)報警,,采用手工法檢測APPT,,最終測得:APTT 85.0秒。 圖6
該病人結(jié)果:APPT:85秒,,PT:16.8秒,,TT:16.0秒,F(xiàn)IB:3.47g/L,D-二聚體:13800ug/L,AT-III:52% 一,、對于脂濁標本,,討論如下: 根據(jù)CLIA 88規(guī)定的允許偏差范圍,PT,、aPTT 允許偏差為 ± 15% ,, FIB的允許偏差范圍為 ± 20%[1,2],。因未對 TT 進行規(guī)定,故將 TT 的允許偏差定與 FIB一致為± 20% ,。該案例檢測結(jié)果表明,,重度脂血的標本常規(guī)凝血離心后在應用 Sysmex CS-5100 比色法上檢測出結(jié)果受干擾,對在CS-5100 檢測APTT,、TT 影響均較大,,CS-5100 血凝分析儀不能抗高血脂,脂血在CS-5100 檢測的結(jié)果不能報告,, 經(jīng)高速離心后,, 消除脂血對凝血四項的影響,重新在CS-5100上檢測,,說明高速離心法能夠澄清血脂,, 消除高血脂的影響而得出準確可靠的結(jié)果。 日本 SYSMEX CS-5100 全自動凝血儀集凝固法,、發(fā)色底物法和免疫法于一體,, 采用先進的光電散射配合百分比凝固時間測定原理[3], 其免疫比濁法檢測原理是透射比濁,、散射比濁,, 也可以通過膠乳比濁法。透射比濁法是一定波長的單色光通過待測血漿時,, 由于待測血漿中抗原與其對應的抗體反應形成復合物使其濁度增加,,透過的光強度減弱。透過的光強度減弱的程度與抗原的量成一定的關(guān)系,, 通過這一關(guān)系可以從透過光強度的變化來檢測抗原的量,。散射比濁是一定波長的單色光通過待檢血漿時, 抗原與其對應的抗體形成復合物,, 使溶質(zhì)顆粒增大, 光散射增強,。散射光強度的變化與抗原的量成一定的數(shù)量關(guān)系,, 通過這一數(shù)量關(guān)系可以從散射光強度的變化來檢測抗原的量。隨著待檢物質(zhì)與其相應抗體結(jié)合,, 其復合顆粒增多,,光通過它時,透過光強度也就越來越弱,, 凝血儀自動算出單位時間的吸光度的變化,, 再根據(jù)標準曲線推算出待檢物質(zhì)的含量。 正因此原理,,應用 Sysmex CS-5100 比色法分析脂血的結(jié)果可能出現(xiàn)誤差,, 其原因有: (1)CS-5100 是以光學比濁法為檢測原理,,以透光度降低判斷終點,所以一般采用光學系統(tǒng)進行測定的儀器不能對高血脂,、黃疸或溶血的血漿得出準確的檢測結(jié)果[4],; (2)脂血會導致吸光強度改變, 進而透射光和散射光的強度也發(fā)生改變,; (3)脂血標本對血凝的影響主要是吸光度升高導致血凝結(jié)果升高,; (4)脂血對血漿內(nèi)血凝因子包裹使血凝試劑不能與血漿凝血因子充分反應,只能檢測大部脂肪的吸光度,。而STAGO 血凝儀分析是以雙磁路磁珠法為檢測原理,, 突破了標本外觀的干擾。臨床檢測中脂血標本對APTT,、TT測定結(jié)果有影響[4],。 案例證明:高血脂標本經(jīng)高速離心后CS-5100 血凝 分析儀所得結(jié)果為準確結(jié)果。因此,, 在實際工作中遇到高血脂標本時,,采用高速離心法澄清脂血,消除高血脂對儀器測定的影響是簡單可行的辦法,。并與臨床溝通,,盡量不要在輸注脂肪乳時送檢凝血檢驗。 二,、凝血測試一般注意事項 護士標本采集 1,、 靜脈抽血; 2,、穿刺要一針見血,,避免淤血,氣泡,,溶血和組織液污染,; 3、為避免血液當中有組織液的滲入,,采血時以第二或第三管樣品做凝血測試管為佳,;如果從導管取樣,則需用生理鹽水沖洗管道,,前面5ml血不能使用,; 4、采血后立即與抗凝劑充分混合,,盡快送往實驗室,; 5、采血量必須準確,,如果少于計劃量的90%,,則不能使用,;不能在靜脈穿刺部位或附近部位采樣; 6,、盡量不要在輸注脂肪乳時送檢凝血檢驗,。 影響測定結(jié)果的幾種因素 1、抗凝劑:草酸鈉,、EDTA,、肝素不適于作抗凝劑; 2,、嚴重黃疸,,脂血,重度溶血會影響測定結(jié)果,,如是因抽血不當或采血時機不當引起的,,應盡可能重抽血; 3,、使用纖溶藥物,,如雙香豆素,鏈激酶,,尿酶等可使凝固時間延長,; 4、超過治療劑量的肝素使凝固時間延長,; 5,、 FDP增加使凝固時間延長; 6,、 某些藥物,,如口服避孕藥,雌激素,,天門冬酰胺酶,,鈉絡酮等影響測試結(jié)果; 7,、樣本采集和處理不當,,都會使凝固時間縮短或延長,特別是抗凝比例不當?shù)臉颖緫嘶刂爻槿焉锖图毙匝装Y會影響某些測試結(jié)果,。 檢驗科對不合格凝血標本處理如下:
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