分子生物學(xué)試驗(yàn)所用水都是去離子水ddH2O雙蒸水級(jí)別的,，所以器皿都要用去離子水沖洗兩三遍,；配制好試劑的貼標(biāo)簽標(biāo)注，包括試劑名稱(chēng),、配制日期,、配制人；加熱和攪拌可以促溶解,。

DNA電泳試劑

50×Tris-乙酸（TAE,，pH=8.5）緩沖液

1. 準(zhǔn)確稱(chēng)量各物質(zhì)，確保緩沖液處于最佳狀態(tài),。

2. 不要用Tris緩沖液來(lái)配制2mol/L Tris,，因?yàn)槌Ｒ?jiàn)的Tris緩沖液用了HCl調(diào)節(jié)pH，成了Tris-HCl緩沖液,，使用純Tris,，配制Tris-乙酸緩沖液。

蛋白SDS－PAGE電泳試劑

10×Tris-甘氨酸緩沖液

成分                 配制100mL溶液用量1 L

Tris                  30.2 g 

甘氨酸             188 g 

SDS                 10g 

使用時(shí)稀釋10倍使用

Western Blotting

10×轉(zhuǎn)膜緩沖液（10×running buffer） (定容至1L)

Tris            30.3g

甘氨酸       144g

不調(diào)pH

使用時(shí)稀釋10倍使用

1×轉(zhuǎn)膜工作液 (定容至1L,，4℃保存)（現(xiàn)配現(xiàn)用）

10×轉(zhuǎn)膜緩沖液                       100ml

無(wú)水甲醇                                 200ml

ddH2O                                   700ml

10×TBS 緩沖液（1L） 

Tris-HCl      24.3g

NaCl            88g

用濃鹽酸約14ml調(diào)節(jié)pH值至約7.4（pH試紙檢測(cè)即可）

1×TBST

TBS+Tween-20 0.1%（1ml for 1L）

LB培養(yǎng)基

將下列組分溶解在0.9L ddH2O中：

2×YT培養(yǎng)基

將下列組分溶解在0.9L ddH2O中：

如需用4M NaOH（約0.5mL）調(diào)整pH至7.0,，再補(bǔ)足水至1L。分裝于錐形瓶并用封口膜進(jìn)行封口,，121℃滅菌20min,，4℃保存。

細(xì)菌LB固體培養(yǎng)基

  在LB液體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,，加入1.5g/100ml瓊脂粉Agar,， 121℃滅菌20min，降溫到60℃,，稍微燙手,，加入抗生素迅速倒平板，每個(gè)10cm平板大約倒10ml,，4℃保存三個(gè)月,。

氨芐青霉素（Amp）（100mg/mL）

    溶解1g氨芐青霉素鈉鹽于足量的ddH2O中，定容至10mL,。分裝成小份于-20℃貯存,。常以常50ug/mL終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

卡那霉素（kan）（10mg/mL）

     溶解100mg卡那霉素于足量的ddH2O中,，定容至10mL,。分裝成小份于-20℃貯存。常以50ug/mL終濃度添加于生長(zhǎng)培養(yǎng)基,。

1.以乙醇為溶劑的抗生素溶液無(wú)須除菌處理,，用ddH2O配的用0.45或0.22um無(wú)菌過(guò)濾器過(guò)濾除菌,。

2.所有抗生素溶液均應(yīng)放于不透光的容器保存，也可用錫箔紙包裹,。

3.抗生素配制出以后4℃可保存3個(gè)月,，-20℃可保存一年。

RIPA裂解液

成分及終濃度                       配制500mL溶液用量

50mM Tris（PH7.5）           3.02g  

150mM NaCl                       4.38g 

1%TritonX-100                    5ml 

1%脫氧膽酸鈉                      5g 

0.1%SDS                              0.5g

      ddH2O至 500ml,，調(diào)pH值至7.5,。混勻后4℃保存,，長(zhǎng)期保存于-20℃,。使用時(shí)，加入蛋白酶抑制劑cooktail,。

5M NaCl

      稱(chēng)取29.22g氯化鈉于100mL燒杯中,，加入約80mL ddH2O加熱攪拌溶解，定容至100mL,，高溫高壓滅菌后使用,，4℃保存。

0.5M EDTA(pH8.0)溶液

      在80mL ddH2O中加入18.612g EDTA-Na2·2H2O,，在磁力攪拌器上劇烈攪拌,，用NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH值至8.0（約需2.2g NaOH顆粒）然后定容至100mL，分裝后高溫高壓滅菌備用,。室溫長(zhǎng)期保存,。

       EDTA二鈉鹽需加入NaOH將溶液的pH值調(diào)至接近8.0,才能完全溶解。而且配制時(shí)最好使用EDTA鈉鹽（其較易溶于水,，而EDTA較難溶于水,，易溶于有機(jī)溶劑）。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA)

加100mg BSA于9.5ml ddH2O中,，定容到10ml,，分裝貯存于-20℃。

1M二硫蘇糖醇（DTT）

在DTT 5g的原裝瓶中加32.4ml ddH2O,，分成貯存于-20℃。

1M HEPES

將23.8gHEPES溶于約90ml的ddH2O中,，用NaOH調(diào)pH（6.8-8.2）,，定容至100ml。

1M HCl

加8.6ml的濃鹽酸至91.4ml的ddH2O中,。

25mg/ml IPTG

溶解250mg的IPTG于10ml ddH2O中,，分裝貯存于-20℃。

1M MgCl2

溶解20.3g MgCl2·6H2O于ddH2O中,，定容到100ml,。

100mM PMSF

溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的異丙醇中，定容到10ml，分裝避光貯存于-20℃,。

1.PMSF劇毒,，嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,，吸入,、吞進(jìn)或通過(guò)皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。為了安全和健康,，穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。一旦眼睛或皮膚接觸立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄,。

2. PMSF在水溶液中不穩(wěn)定,。

1％溴酚藍(lán)（bromophenol blue）

加1g溴酚藍(lán)于100ml ddH2O中，攪拌或渦旋混合直到完全溶解,。

4X上樣緩沖液

成分及終濃度                        配制10mL溶液用量

1.0 mol/L Tris·HCl（pH6.8）       2ml

2%SDS                                         0.8g

0.1%溴酚藍(lán)                                  0.04g

10%甘油                                      4ml

      ddH2O定容至10ml,。混勻分裝4℃保存,。使用時(shí)稀釋成1X,，加入1M DTT（10X），例如：上樣量20μl--4X上樣緩沖液 5μl+ DTT 2μl + 樣本蛋白13μl,。SDS是保證樣品中的所有蛋白帶電荷一致,，減少電荷對(duì)電泳結(jié)果的影響。還原劑是讓二硫鍵處于斷開(kāi)狀態(tài),，保證蛋白分子的線(xiàn)性,。溴酚藍(lán)作用是指示上樣蛋白的跑膠時(shí)標(biāo)記的，甘油是增加上樣重量的,，以免漂浮,，煮沸是使蛋白變性的永久保存。