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Tris：三羥甲基氨基甲烷 三羥甲基氨基甲烷（Tris(hydroxymethyl)aminomethane,，一般簡(jiǎn)稱為Tris）是一種有機(jī)化合物,，其分子式為(HOCH2)3CNH2,。Tris被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備。例如,，在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的TAE和TBE緩沖液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris,。由于它含有氨基因此可以與醛發(fā)生縮合反應(yīng) Tris為弱堿，在室溫（25℃下,，它的pKa為8.1,；根據(jù)緩沖理論，Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間,。 Tris堿的水溶液pH在10.5左右,，一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值至所需值，即可獲得該pH值的緩沖液,。但同時(shí)應(yīng)注意溫度對(duì)于Tris的pKa的影響,。 由于Tris緩沖液為弱堿性溶液，DNA在這樣的溶液中會(huì)被去質(zhì)子化,，從而提高其溶解性,。人們常常在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲(chǔ)存,。如果將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸,，則獲得“TAE緩沖液”（Tris/Acetate/EDTA），而換成硼酸則獲得“TBE緩沖液”（Tris/Borate/EDTA）,。這兩種緩沖液通常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中,。 【性能參數(shù)】
性質(zhì)：該品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末,。水溶液在空氣中不吸收二氧化碳（阿拉丁網(wǎng)站所述），0.1mol/L水溶液pH10.4,。對(duì)銅,、鋁有腐蝕作用,。溶解度(：550 g/L水 (25°C),，79.1MG/ML 乙二醇，26MG/ML 甲醇 (25°C),，22.0MG/ML 95% 乙醇- 14MG/ML DMF (25°C),，2.0MG/ML 丙酮，0.5MG/ML 乙酸乙酯(25°C),，0.05MG/ML 氯仿,，<0.05MG/ML CCL4 (25°C)。 熔點(diǎn)：170℃ 沸點(diǎn)：219-220℃(10 mmHg) 用途：有機(jī)合成中間體,。在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,，穩(wěn)定電泳過(guò)程中的PH值,。在凝膠中也起到穩(wěn)定PH的作用，只不過(guò)是Tris-HCl緩沖體系,。 Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑,，還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長(zhǎng),。Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲（C. elegans核纖層蛋白lamin）的中間纖維的形成,。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外,，Tris還是制備表面活性劑,、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物,。 常用Tris-HCl緩沖液配制： Tris-HCl（0.05mol/L,，25℃） 50ml 0.1mol/L三羥甲基氨基甲烷（Tris）溶液與x ml 0.1mol/L 鹽酸混勻后，加水稀釋至100ml pH x/ml pH x/ml 7.10 45.7 8.10 26.2 7.20 44.7 8.20 22.9 7.30 43.4 8.30 19.9 7.40 42.0 8.40 17.2 7.50 40.3 8.50 14.7 7.60 38.5 8.60 12.4 7.70 36.6 8.70 10.3 7.80 34.5 8.80 8.5 7.90 32.0 8.90 7.0 Tris分子量＝121.14 ,；0.1 mol/L溶液為12.114 g/L,。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳（百度及其他網(wǎng)站所述），使用時(shí)注意將瓶蓋嚴(yán),。配置不同濃度和不同PH值Tris-HCl緩沖液時(shí),，可以先配成一定PH值的0.05mol/L緩沖液，再稀釋到所需濃度,。 其他Tris-HCl配制 1 M Tris-HCl (pH7.4,，7.6，8.0) 組份濃度 1 M Tris-HCl 配制量 1L 配制方法 1.稱量121.1 g Tris置于l L燒杯中,。 2.加入約800 ml的去離子水,，充分?jǐn)嚢枞芙狻?BR> 3.按下表加入濃HCl量調(diào)節(jié)所需要的pH值。 pH值 濃HCl 7.4 約70 ml 7.6 約60 ml 8.0 約42ml 4.將溶液定容至1 L,。 5.高溫高壓滅菌后,，室溫保存。 注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值,，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位,。 1.5 M Tris-HCl (pH8.8) 組份濃度 1.5 MTris-HCl 配制量 1 L 配制方法 1.稱量181.7 g Tris置于1 L燒杯中,。 2.加入約800 ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?BR> 3.用濃HCl調(diào)節(jié)pH值至8.8,。 4.將溶液定容至1 L,。 5.高溫高壓滅菌后，室溫保存,。 注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值,，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大,，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位,。 |
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