干擾物是臨床實驗室檢測誤差的一個很重要的來源，它們在某種程度上對病人來說表現(xiàn)為是一種危害,。常規(guī)工作中精密度通過室內(nèi)質(zhì)控監(jiān)控,，準確性通過與參考物質(zhì)作比較試驗進行驗證，但實驗室不能很容易的檢測干擾物質(zhì)引起地誤差,。
廣義上干擾物是導致分析物濃度或催化活力出現(xiàn)偏移的物質(zhì),，如免疫法干擾常由交叉反應所致，因此,，干擾物通過干擾作用來影響分析特異性,，從干擾物來源，干擾作用分為內(nèi)源性和外源性干擾,。
1,、類風濕因子（Rheumatoidfactors，RF）
類風濕因子（rheumatoid factor,，RF）是一種抗人或動物IgG分子Fc片段抗原決定簇的抗體,，是以變性IgG為靶抗原的自身抗體。RF最初由Rose等（1984年）在類風濕性關節(jié)炎（RA）患者血清中發(fā)現(xiàn),。RA患者體內(nèi)有產(chǎn)生RF的B細胞克隆,，在變性IgG或EB病毒的直接作用下可大量合成RF。RF主要為IgM類自身抗體,，但也有IgG類,、IgA類,、IgD類和IgE類。
人血清中IgM,、IgG型類風濕因子（RF）可以與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的Fc段直接結(jié)合,，從而導致假陽性。
類風濕因子干擾的排除
（1）用F（ab）替代完整的IgG,。
（2）標本用聯(lián)有熱變性（63°C，10min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有效）,。
（3）檢測抗原時,，可以用2-巰基乙醇等加入到標本稀釋液中，使RF降解,。嗜異性抗體（Id）是由低純度抗原引起的，又稱之為對非特異性抗原產(chǎn)生的抗體應答,。
天然的嗜異性抗體（IgG）可分為兩類：
一類（85%的假陽性或假增高由其引起）可結(jié)合于山羊,、小鼠、大鼠,、馬和牛IgG的Fab區(qū)域,，但不與兔IgG的Fab區(qū)結(jié)合。
另一類（15%的假陽性或假增高由其引起）可結(jié)合于小鼠,、馬,、牛和兔IgG的FC區(qū)表位，但不與山羊和大鼠IgG的FC區(qū)表位結(jié)合,。嗜異性抗體可通過交聯(lián)固相和酶標的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽性或假增高反應,。
其也可造成假陰性或假降低的結(jié)果。
嗜異性抗體干擾的排除
使用特異的兔F（ab’）2片段作為固相或酶標抗體,。
在標本或標本稀釋液中加入過量的動物Ig,，封閉可能存在的嗜異性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效,。
使用靶特異的非Ig親和蛋白（Affibody）替代固相或酶標抗體之一,。采用噬菌體展示技術展示來自單個金黃色葡萄球菌A蛋白（SPA）聯(lián)合文庫的人IgA結(jié)合親和蛋白，用于IgA的測定,，不受異嗜性抗體的影響,。
使用特異的雞抗體作為固相和測定抗體。
人抗小鼠抗體（human anti-mouse antibodies,，HAMA）：抗鼠抗體對使用鼠源性單克隆抗體的免疫測定,，可產(chǎn)生假陽性（定量檢測假增高）或假陰性（定量假降低）結(jié)果,。
干擾排除的方法
使用特異的抗體F（ab’）2片段作為固相或測定酶標抗體。
在標本或標本稀釋液中加入過量的鼠Ig,，封閉可能存在的抗鼠抗體,。
使用特異的雞抗體IgG作為固相和測定抗體。雞IgG不與人抗鼠抗體反應,。因而,，用其作為固相或酶標抗體不會出現(xiàn)假增高或假降低結(jié)果。
自身抗體如抗甲狀腺球蛋白,、抗胰島素、抗甲狀腺激素抗體等,，能與其相應靶抗原結(jié)合形成復合物,，在免疫測定方法中可干擾相應抗原抗體的測定。
自身抗體干擾排除的方法
測定前需用理化方法將其解離后再測定,。補體（complement，C）是存在于正常人和動物血清與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì),。早在19世紀末Bordet即證實,，新鮮血液中含有一種不耐熱的成分，可輔助和補充特異性抗體,，介導免疫溶菌,、溶血作用，故稱為補體,。補體是由30余種可溶性蛋白,、膜結(jié)合性蛋白和補體受體組成的多分子系統(tǒng)，故稱為補體系統(tǒng)（complement system）,。根據(jù)補體系統(tǒng)各成分的生物學功能,，可將其分為補體固有成分、補體調(diào)控成分和補體受體（CR）,。
ELISA系統(tǒng)中固相一抗和標記二抗過程中,，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其Fc段的C1q分子結(jié)合位點被暴露出來,，使C1q可以將二者連接起來,，從而造成假陽性。
補體干擾的排除
1,、用EDTA稀釋標本,。
2、用53°C,，10min加熱血清使C1q滅活,。溶菌酶（lysozyme）又稱胞壁質(zhì)酶（muramidase）或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶,。主要通過破壞細胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,，4糖苷鍵，使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,，導致細胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細菌溶解,。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結(jié)合，與DNA,、RNA,、脫輔基蛋白形成復鹽，使病毒失活,。因此，該酶具有抗菌,、消炎,、抗病毒等作用。
溶菌酶可與等電點較低的蛋白有強的結(jié)合能力,。免疫球蛋白等電點約為5,，因此，在雙抗體夾心法測定中,，溶菌酶可在包被的IgG和酶標的IgG間形成橋接,，從而導致假陽性或假增高結(jié)果。
排除方法
為保證免疫測定的可靠性,，有必要從標本中去除溶菌酶或?qū)⑵浞忾],，Cu2 離子和卵白蛋白可有效地封閉溶菌酶，防止其聯(lián)接IgG,。抗鏈霉親合素抗體（anti-streptavidin antibodies）：鏈霉親合素（streptavidin）是由Streptomyces avidinni產(chǎn)生的，機體為什么會出現(xiàn)抗鏈霉親合素抗體的原因目前尚不清楚,。
抗釕抗體（antiruthenium antibodies）,。靜脈輸注免疫球蛋白獲得抗病原體的抗體（如抗梅毒抗體,、抗-HCV,、抗-HBs等）；新生兒獲得的來自母體的特異IgG,；新生兒獲得的來自乙肝“大三陽”母親的HBeAg,。交叉反應是兩種來源不同的抗原,，彼此之間可以有相同的抗原決定簇,，由此決定簇刺激機體產(chǎn)生的抗體不僅可分別與其自身表面的相應抗原表位結(jié)合,，而且還能與另一種抗原的相同表位結(jié)合發(fā)生反應，稱為交叉反應,。
交叉反應現(xiàn)象的形成可能與下列因素有關：
1,、共同抗原，不同生物體的某些生物大分子具有相同的抗原結(jié)構(gòu),；
2,、共同表位，不同的生物大分子的某些片段（肽段）具有相同的表位,；
3,、相似表位，不同的生物大分子,，其表位的部分空間構(gòu)象十分類似,，可以和同一種抗體的互補決定區(qū)相契合。
激素,、小分子半抗原等易受到交叉反應影響,。生物素又被稱為維生素B7或維生素H,，是一種水溶性B族維生素,。生物素的缺乏主要會損害皮膚、粘膜和神經(jīng)系統(tǒng),，在普通人群中長期的生物素缺乏可能導致毛發(fā),、指甲、皮膚的損害,。
生物素-親合素系統(tǒng)是上世紀70年代末發(fā)展起來的一種新型生物反應放大系統(tǒng)?，F(xiàn)被廣泛應用于醫(yī)學各領域。在體外診斷的實際應用中更是具有巨大的優(yōu)越性,，生物素可與幾乎所有生物大分子結(jié)合,，親和力高，結(jié)合穩(wěn)定,，靈敏度高,，具有多級放大作用。
生物素干擾存在于使用生物素-親和素系統(tǒng)或生物素-抗生物素系統(tǒng)的檢測中,。與儀器廠家,、儀器型號、發(fā)光底物無關,，同一廠家不同項目包被方式也可能不同,。生物素對化學發(fā)光產(chǎn)生干擾需要一定的濃度，不同項目/試劑抗生物素干擾的能力不同,。生物素干擾可能產(chǎn)生假陽性,，也可能產(chǎn)生假陰性,。一般來說，夾心法產(chǎn)生假陰性,，競爭法產(chǎn)生假陽性,。
溶血（Hemolysis）紅細胞破裂,，血紅蛋白逸出稱紅細胞溶解,，簡稱溶血?？捎啥喾N理化因素和毒素引起,。在體外，如低滲溶液,、機械性強力振蕩,、突然低溫冷凍（-20℃～－25℃）或突然化凍、過酸或過堿,，以及酒精,、乙醚,、皂堿,、膽堿鹽等均可引起溶血,。
標本溶血時可釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA測定中,，會導致非特異性顯色，干擾測定結(jié)果,。
解決方法細菌菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,，在ELISA試驗中可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果,。
部分項目因穩(wěn)定性時間較短,，需嚴格注意標本保存時間,。
血液采集后,，如收集管中無促凝劑和抗凝劑,，則血液通常在半小時后開始凝固，18~24h完全凝固,。日常檢驗中,，常在血液還未開始凝固時即離心分離血清，此時因血液沒有完全凝固,，離出的“血清”并非為完全的血清,，其中仍殘留部分纖維蛋白原,，易形成干擾，造成假陽性,。
解決方法
血液標本采集后,，應使其充分凝固后再分離血清，或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當?shù)拇倌齽?/span>個別標本由于離心制備不徹底,，造成假陽性結(jié)果，如果忽略掉就會給臨床造成誤診,，引起不必要的醫(yī)療糾紛,。故建議檢驗人員若遇到疑似陽性標本，最好延長離心時間,，重復測定,，可以降低假陽性率，增加檢驗結(jié)果的準確性,。干擾物質(zhì)影響分析特異性,，檢驗工作者在日常工作中需格外注意，必須減少樣本中的干擾物質(zhì),，避免對測定結(jié)果產(chǎn)生影響,。
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