認(rèn)識(shí)孤獨(dú)癥孤獨(dú)癥(autism),，又稱(chēng)自閉癥或孤獨(dú)性障礙(autistic disorder)等,，是廣泛性發(fā)育障礙(pervasive developmentaldisorders，PDD)的代表性疾病,?！禗sM_Ⅳ一TR》將PDD分為5種：孤獨(dú)性障礙、Retts綜合征,、童年瓦解性障礙,、Asperger綜合征和未特定的PDD。其中,，孤獨(dú)性障礙與Asperger綜合征較為常見(jiàn),。孤獨(dú)癥的患病率報(bào)道不一，一般認(rèn)為約為兒童人口的2～5/萬(wàn)人,，男女比例約為3：1～4：1,，女孩癥狀一般較男孩嚴(yán)重。

　　孤獨(dú)癥的臨床表現(xiàn) 孤獨(dú)癥的癥狀極為廣泛,，包括情感,、認(rèn)知、社交及適應(yīng)行為等多方面異常,。癥狀的輕重程度差異很大,。輕癥者的社會(huì)交往、語(yǔ)言及行為等方面的異常都不明顯,，有時(shí)很難被認(rèn)為是疾病,，更像是性格問(wèn)題。重癥者出現(xiàn)多種心理功能損害,，但一般不出現(xiàn)妄想,、幻覺(jué)及思維散漫等精神分裂癥的癥狀。

　　孤獨(dú)癥患者與他人(包括父母)不夠親密,，對(duì)人情溫暖,，甚至是母愛(ài)，反應(yīng)冷漠,?；颊哐哉Z(yǔ)及非言語(yǔ)的理解能力低下 缺乏語(yǔ)言表達(dá)能力，常有模仿性言語(yǔ)且語(yǔ)意不清,，不能正確理解詞性,，錯(cuò)用代詞、名詞或動(dòng)詞,。嚴(yán)重者語(yǔ)言能力發(fā)育明顯遲滯,，甚至不發(fā)育，語(yǔ)義形成能力低下,，有的患者甚至?xí)圃熘挥衅浔救瞬哦玫脑~匯,。行為舉止方面,，常出現(xiàn)儀式樣動(dòng)作、刻板行為,、奇異行為及自傷,、自殘性行為等。有時(shí)會(huì)對(duì)某一特定物體表現(xiàn)出特殊依戀,，不許他人觸及,。患者通常情感淡漠,，但有時(shí)也會(huì)情緒反應(yīng)過(guò)度,，特別是在別人動(dòng)了他不許動(dòng)的東西時(shí)，情緒會(huì)異常沖動(dòng),?；颊?a target="_blank">認(rèn)知功能障礙，表現(xiàn)為抽象能力,、銜接概念及整合能力的損害,。患者還常出現(xiàn)神經(jīng)功能損害的癥狀,，如嗅覺(jué),、味覺(jué)和觸覺(jué)的異常，以及視覺(jué)或聽(tīng)覺(jué)加工能力的發(fā)育不全,。有15 ～50 的孤獨(dú)癥患兒伴有癲癇發(fā)作Ⅲ ,。大多數(shù)孤獨(dú)癥患兒的智商都很低，但有些患者卻在繪畫(huà),、音樂(lè)或計(jì)算等方面有著超常的表現(xiàn)能力,，此類(lèi)患者被稱(chēng)作“高功能孤獨(dú)癥患者”。

　　孤獨(dú)癥起病于3歲之前,，在嬰兒早期即有癥狀,，但癥狀不易被察覺(jué)，家長(zhǎng)往往不能及時(shí)發(fā)現(xiàn),。其癥狀隨年齡增長(zhǎng)可慢慢地自行改善,，但病程發(fā)展并無(wú)規(guī)律性。通過(guò)系統(tǒng)的行為訓(xùn)練和特殊教育,，有2 ～15 的患者認(rèn)知和適應(yīng)能力可接近常人,，生活能自理，但仍存在一些刻板行為和言語(yǔ)表達(dá)障礙等表現(xiàn);性格孤僻,、不愿與人接觸的特點(diǎn)則不易糾正,。

　　對(duì)孤獨(dú)癥的認(rèn)識(shí)過(guò)程 臨床上首次描述孤獨(dú)癥是在20世紀(jì)40年代。1943年，美國(guó)醫(yī)生Kanner報(bào)道了11例患者,，并命名為“早期嬰兒孤獨(dú)癥”(early infantile autism)。他當(dāng)時(shí)描述這個(gè)類(lèi)群的患者特征如下：嚴(yán)重缺乏與他人的情感接觸;怪異的,、重復(fù)性的儀式性行為;緘默或語(yǔ)言顯著異常;高水平的視覺(jué)— — 空間技巧或機(jī)械記憶能力與在其他方面學(xué)習(xí)困難形成對(duì)比;聰明,、機(jī)敏且具有吸引力的外貌表現(xiàn)。最初,，Kanner報(bào)道的這類(lèi)患者被認(rèn)為是兒童精神分裂癥的一個(gè)亞型而未受重視,。在20世紀(jì)40~60年代，又有數(shù)人描述了與Kanner報(bào)道相似的病例,，并冠以各種各樣的名稱(chēng),。當(dāng)時(shí)的國(guó)際及美國(guó)精神病分類(lèi)與診斷標(biāo)準(zhǔn)將這類(lèi)患者歸入“兒童分裂樣反應(yīng)”類(lèi)別中。對(duì)于孤獨(dú)癥的病因?qū)W,，當(dāng)時(shí)普遍認(rèn)為是父母養(yǎng)育方式不當(dāng)造成了孤獨(dú)癥的發(fā)生,。Kanner將孤獨(dú)癥患兒的父母描述成一群高學(xué)歷的、事業(yè)心很強(qiáng)但又冷漠無(wú)情的人,，這一觀點(diǎn)在當(dāng)時(shí)似乎很少有異議,。

　　20世紀(jì)60～70年代，Rutter的研究指出,，孤獨(dú)癥的行為如果被認(rèn)為是從出生到童年早期的發(fā)育障礙所致則更為合情合理,。由此，逐漸把孤獨(dú)癥看作為是一種軀體性的,、與父母撫育方式無(wú)任何關(guān)聯(lián)的發(fā)育障礙,。在此時(shí)期，Lotter發(fā)表了新的孤獨(dú)癥診斷標(biāo)準(zhǔn),，強(qiáng)調(diào)把社會(huì)交互作用,、言語(yǔ)與交流和重復(fù)性活動(dòng)三個(gè)方面作為基本標(biāo)準(zhǔn)，并舍棄了Kanner診斷標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于“特殊技能和吸引人的外貌”等兩項(xiàng),。以后,，在Lotter標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，開(kāi)展了廣泛的流行病學(xué)調(diào)查研究?，F(xiàn)在所普遍接受的“孤獨(dú)癥發(fā)病率4～5/萬(wàn)”是當(dāng)時(shí)最重要的研究成果,。

　　20世紀(jì)80年代，關(guān)于孤獨(dú)癥的研究進(jìn)入全新階段,。人們開(kāi)始拋棄所謂“父母撫養(yǎng)方式不當(dāng)”的病因假說(shuō),，從生物學(xué)領(lǐng)域探索孤獨(dú)癥的病因，并在臨床癥狀的識(shí)別和臨床診斷方面將孤獨(dú)癥與精神分裂癥徹底分開(kāi),。Kolvin的研究表明,，孤獨(dú)癥同成年精神病性障礙，尤其是成年精神分裂癥沒(méi)有關(guān)系。1980年出版的《DSM—m》首次將童年孤獨(dú)癥視為一種廣泛性發(fā)育障礙,。之后,，隨著對(duì)孤獨(dú)癥研究的深入，逐步認(rèn)識(shí)到孤獨(dú)癥是一種在一定遺傳因素作用下,，受多種環(huán)境因子刺激導(dǎo)致的彌漫性中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育障礙性疾病,。在此認(rèn)識(shí)的基礎(chǔ)上，開(kāi)展了從分子遺傳到神經(jīng)免疫,、功能影像,、神經(jīng)解剖和神經(jīng)化學(xué)等多方面的研究，人們?cè)噲D從這些研究中找到孤獨(dú)癥的致病原因,。但直至目前,，仍沒(méi)有任何一種假說(shuō)能從根本上完美地解釋孤獨(dú)癥的病因。

　　孤獨(dú)癥發(fā)生的危險(xiǎn)因素 雖然孤獨(dú)癥的病因還不完全清楚,，但目前的研究表明,，某些危險(xiǎn)因素可能同孤獨(dú)癥的發(fā)病相關(guān)。引起孤獨(dú)癥的危險(xiǎn)因素可以歸納為：遺傳,、感染與免疫和孕期理化因子刺激遺傳因素雙生子研究顯示,，孤獨(dú)癥在單卵雙生子中的共患病率高達(dá)61 ～90，而異卵雙生子則未見(jiàn)明顯的共患病情況,。在兄弟姊妹之間的再患病率,，估計(jì)在4.5 左右。這些現(xiàn)象提示孤獨(dú)癥存在遺傳傾向性,。

　　研究顯示,，某些染色體異常可能會(huì)導(dǎo)致孤獨(dú)癥的發(fā)生。目前已知的相關(guān)染色體有7q,、22q13,、2q37、18q,、Xp;某些性染色體異常也會(huì)出現(xiàn)孤獨(dú)癥的表現(xiàn),，如47、XYY 以及45,、x/46,、XY嵌合體等。較常見(jiàn)的表現(xiàn)出孤獨(dú)癥癥狀的染色體病有4種：脆性x染色體綜合征,、結(jié)節(jié)性硬化癥,、15q雙倍體和苯丙酮尿癥。

　　Cook根據(jù)臨床發(fā)現(xiàn)孤獨(dú)癥患兒存在高5羥色胺(5 HT)血癥的情況,，對(duì)5-HT系統(tǒng)的基因進(jìn)行了研究,，發(fā)現(xiàn)5-HT：,。受體和5-HT轉(zhuǎn)運(yùn)體(5-HTT)基因在孤獨(dú)癥患兒中存在連鎖不平衡 。

　　每年均有新的關(guān)于孤獨(dú)癥候選基因的報(bào)道,。近年來(lái)新報(bào)道的孤獨(dú)癥候選基因有clock,、PRKCB1、CNTN4,、CNTCAP2,、immune gene、STK39,、MA0A,、CSM D3,、DRD1,、neurexinl、SLC25A12,、JARID1C,、Pax6 c1” 。2007年,，北京大學(xué)精神衛(wèi)生研究所報(bào)道,，在漢族孤獨(dú)癥患者中，NRP2基因存在遺傳多態(tài)性 ,。

　　繁多的候選基因提示了孤獨(dú)癥是一種多基因遺傳病,，即孤獨(dú)癥可能是在一定的遺傳傾向性下，由環(huán)境致病因子誘發(fā)的疾病,。

　　感染與免疫因素 早在20世紀(jì)70年代末就有研究發(fā)現(xiàn),，孕婦患病毒感染后，其子代患孤獨(dú)癥的機(jī)率增大,。后來(lái)數(shù)個(gè)研究均提示,，孕期感染與孤獨(dú)癥發(fā)生可能有一定的關(guān)系。目前已知的相關(guān)病原體有：風(fēng)疹病毒,、巨細(xì)胞病毒,、水痘— — 帶狀皰疹病毒、單純皰疹病毒,、梅毒螺旋體和弓形蟲(chóng)等,。目前推測(cè)，這些病原體產(chǎn)生的抗體,，由胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi),，與胎兒正在發(fā)育的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生交叉免疫反應(yīng)，干擾了神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育,，從而導(dǎo)致了孤獨(dú)癥的發(fā)生,。

　　孕期理化因子刺激 受孕早期孕婦若有反應(yīng)停和丙戊酸鹽類(lèi)抗癲癇類(lèi)藥物的用藥史以及酗酒等,，可導(dǎo)致子代患孤獨(dú)癥的機(jī)率增加。根據(jù)這些研究,，對(duì)懷孕12.5 d的大鼠一次性高劑量腹腔注射丙戊酸鈉,，其子代鼠表現(xiàn)出類(lèi)似孤獨(dú)癥的行為學(xué)表現(xiàn)。還有研究發(fā)現(xiàn),，孕期大鼠暴露于反復(fù)冷凍刺激中,，也會(huì)增加子代患孤獨(dú)癥的機(jī)率;對(duì)孕鼠進(jìn)行反復(fù)冷凍刺激，其子代也表現(xiàn)出孤獨(dú)癥的行為學(xué)特征,。

　　我國(guó)孤獨(dú)癥患兒的現(xiàn)狀 我國(guó)對(duì)孤獨(dú)癥的研究起步較晚,。1982年，南京陶國(guó)泰教授首次報(bào)告了4例孤獨(dú)癥患兒,。在《中國(guó)精神疾病分類(lèi)診斷標(biāo)準(zhǔn)》第2版(CCMD-2)中開(kāi)始出現(xiàn)“兒童孤獨(dú)癥”的診斷,，但是歸在“兒童精神病”的名錄下。在1995年的《cCMD2-R》中,，開(kāi)始將其歸為廣泛發(fā)育障礙性疾病,。其后的《CCMD-3》沿用了這一分類(lèi)，并在診斷標(biāo)準(zhǔn)上與《DSM-Ⅳ 》和《ICI)_10》靠攏,。

　　目前,，我國(guó)尚無(wú)全國(guó)規(guī)模的關(guān)于孤獨(dú)癥的流行病學(xué)調(diào)查，各地局部調(diào)查的結(jié)果差別較大,。福建省1996年流行病學(xué)調(diào)查,，報(bào)告孤獨(dú)癥的患病率為2.8/萬(wàn)L3。 ;天津市2004年流行病學(xué)調(diào)查,，報(bào)告患病率為l0/萬(wàn)口 ,。保守推算，目前我國(guó)至少有100萬(wàn)孤獨(dú)癥患者,。目前國(guó)內(nèi)對(duì)孤獨(dú)癥的研究,，主要集中在遺傳和康復(fù)干預(yù)等方面。對(duì)孤獨(dú)癥患兒的治療,，主要是行為訓(xùn)練和特殊教育,。對(duì)于有明顯沖動(dòng)和自傷自殘的患兒，也采用抗精神病藥物治療,。有人采用針灸治療孤獨(dú)癥,，但其臨床療效有待證實(shí)。

　　目前,，我國(guó)雖有大量關(guān)于孤獨(dú)癥的臨床病例報(bào)道,，而且在全國(guó)各地也相繼建立了很多孤獨(dú)癥患兒康復(fù)訓(xùn)練學(xué)校，但總體上,，人們對(duì)孤獨(dú)癥的了解還很有限,，對(duì)孤獨(dú)癥的研究尤其是基礎(chǔ)研究還非常薄弱,。

　　孤獨(dú)癥患者腦的變化雖然孤獨(dú)癥是一種廣泛性發(fā)育障礙性疾病，然而起初人們并不認(rèn)為患者腦部有生物學(xué)改變,，因此對(duì)其研究多局限于心理學(xué)方面,。后來(lái)發(fā)現(xiàn)，孤獨(dú)癥患兒腦形態(tài)與同齡正常兒童存在明顯差異,。隨著神經(jīng)影像技術(shù)的發(fā)展,，特別是正電子發(fā)射斷層顯像(PET)、高場(chǎng)強(qiáng)核磁共振以及功能成像核磁共振(fMRI)等技術(shù)的應(yīng)用,，對(duì)腦的研究進(jìn)入結(jié)構(gòu)與功能相結(jié)合的新階段,，大大推動(dòng)了對(duì)孤獨(dú)癥患者腦的研究。

　　孤獨(dú)癥患者腦的影像學(xué)改變 Bailey等0 對(duì)孤獨(dú)癥患者進(jìn)行常規(guī)MRI檢查,，明確肯定了腦容積的增大,，而且確定主要是皮層、海馬,、杏仁體和小腦的增大,。隨著磁共振波譜分析(MRS)技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,，對(duì)活體組織代謝物成分和含量的檢測(cè)得以實(shí)現(xiàn),，Hardan等口5]應(yīng)用此技術(shù)觀察到18名男性孤獨(dú)癥患兒左側(cè)丘腦N一甲基天冬氨酸(NAA)代謝水平下降，而NAA代謝水平被認(rèn)為是神經(jīng)元數(shù)量和活性的標(biāo)志,。以同樣技術(shù),，Page等還觀察到孤獨(dú)癥患者海馬和杏仁體區(qū)域谷氨酸/谷氨酰胺以及肌醇/磷脂酰肌醇代謝水平的升高。fMRI是反映腦的結(jié)構(gòu)和功能狀態(tài)的重要手段,，Allen等l3 運(yùn)用該技術(shù)對(duì)孤獨(dú)癥患者小腦認(rèn)知和運(yùn)動(dòng)功能的研究發(fā)現(xiàn),，患兒腦運(yùn)動(dòng)區(qū)明顯活躍，而注意力功能區(qū)活躍度明顯降低,。Takeuchi等 在孤獨(dú)癥患兒接受語(yǔ)言任務(wù)的研究中發(fā)現(xiàn),，fMRI示患兒右側(cè)額葉較正常對(duì)照更為活躍，提示孤獨(dú)癥患兒右側(cè)大腦半球在語(yǔ)言功能上占優(yōu)勢(shì),。Ogai等對(duì)孤獨(dú)癥患兒面部表情識(shí)別的fMRI研究發(fā)現(xiàn),，其皮層一邊緣系統(tǒng)神經(jīng)通路異常，提示孤獨(dú)癥患兒對(duì)識(shí)別面部表情有困難,。

　　單光子發(fā)射斷層顯像(SPECT)利用同位素標(biāo)記的低分子量腦顯像劑可以自由通過(guò)血腦屏障的特性來(lái)檢測(cè)腦的變化,。因?yàn)槟X內(nèi)同位素的分布依賴(lài)于血流灌注和腦細(xì)胞功能，故所獲得的腦影像既能反映局部腦血流量,，又能反映局部神經(jīng)細(xì)胞的功能,。1995年，Zilbovicius等在對(duì)孤獨(dú)癥患兒額葉發(fā)育延遲的追蹤研究中,，觀察到3～4歲患兒存在暫時(shí)性額葉灌注降低,，而到6～7歲時(shí)其額葉灌注恢復(fù)正常,，提示孤獨(dú)癥患兒額葉發(fā)育延遲。Hashimoto等在對(duì)孤獨(dú)癥患兒功能缺陷進(jìn)行的研究中發(fā)現(xiàn),，患兒的顳葉與頂葉血流灌注量降低,，左側(cè)低于右側(cè);而額葉和枕葉血流灌注降低，則為右側(cè)低于左側(cè),。利用同位素標(biāo)記腦神經(jīng)受體配體進(jìn)行PET評(píng)價(jià)腦內(nèi)受體的變化,，發(fā)現(xiàn)孤獨(dú)癥腦存在5-HT 及多巴胺傳遞途徑受阻，提示兩者的受體水平下降,。

　　然而,，腦影像學(xué)檢查雖發(fā)現(xiàn)一些孤獨(dú)癥患者腦內(nèi)存在異常，但由于這類(lèi)研究的樣本量小,，結(jié)果有特異性的不高,，因此還不能作為臨床診斷的依據(jù)。

　　孤獨(dú)癥患者腦細(xì)胞水平的變化 20世紀(jì)90年代末,，一些學(xué)者觀察到孤獨(dú)癥思兒的頭圍及腦重量增加,，影像學(xué)的研究同樣顯示孤獨(dú)癥患兒的腦容積增大。對(duì)孤獨(dú)癥患者腦的解剖學(xué)研究證實(shí),，孤獨(dú)癥患者的整腦,，尤其是邊緣系統(tǒng)、小腦和腦干均有改變,。

　　Bauman等曾對(duì)6例孤獨(dú)癥患者尸體作連續(xù)腦組織切片,，結(jié)果觀察到海馬、海馬旁回和杏仁體的細(xì)胞密度增大,，而細(xì)胞的體積卻縮小;同時(shí)還觀察到,，這6例孤獨(dú)癥患者小腦的浦肯野細(xì)胞數(shù)目減少。Bailey等1998年報(bào)道的6例孤獨(dú)癥尸檢中,，有5例的小腦浦肯野細(xì)胞數(shù)目明顯減少,。Bauman等研究還發(fā)現(xiàn)，部分兒童患者(9～12歲)下橄欖核的神經(jīng)元體積增大,，而在成年患者(大于22歲)下橄欖處神經(jīng)元體積小而灰暗,，但數(shù)目無(wú)明顯變化;同時(shí)還觀察到，患者下橄欖區(qū)域的神經(jīng)元多聚集在核團(tuán)的邊界處,。

　　孤獨(dú)癥患者腦在分子及基因水平的變化 應(yīng)用連鎖分析,、相關(guān)性分析以及雙生子研究等分子遺傳學(xué)分析方法，能確定疾病的候選基因,，進(jìn)而找到致病基因位點(diǎn),。隨著人類(lèi)全基因組測(cè)序的完成，進(jìn)行全基因組掃描也能很好地找到疾病的致病基因位點(diǎn),。資料顯示,，孤獨(dú)癥的遺傳因素極為明顯,，全基因組掃描發(fā)現(xiàn)了數(shù)十個(gè)孤獨(dú)癥的候選基因位點(diǎn)、可能的易感基因和染色體異常涉及到信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,、神經(jīng)元增殖和分化以及神經(jīng)元突觸的形成與聯(lián)系等,。

　　5一HT及其受體是一種重要的神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)。5-HT通過(guò)其受體調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的情緒,、認(rèn)知,、學(xué)習(xí)和記憶等功能活動(dòng)。研究表明,，孤獨(dú)癥,、精神分裂癥及抑郁癥等一系列精神障礙，與5-HT神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的異常有關(guān),。約有1/3孤獨(dú)癥患者及其一級(jí)親屬中,，全血或血小板5-HT水平升高，提示高5-HT可能是孤獨(dú)癥的一個(gè)生化易感性標(biāo)記 ,。5一HTT存在于5-HT能神經(jīng)突觸前膜,，是一類(lèi)5一HT高親和力的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，具有調(diào)節(jié)和運(yùn)輸5-HT的功能,。5一HTT基因及5-HTR基因是5-HT遞質(zhì)系統(tǒng)的兩類(lèi)重要的基因,。5一HTT基因位于17ql1.1q12，含有15個(gè)外顯子,，長(zhǎng)34 kb,，它是孤獨(dú)癥的一個(gè)候選基因,，有4種多態(tài)性l5 ,。5一HTR基因有多個(gè)成員，其中5-HTR2A基因定位于染色體13ql4-21區(qū)域,，由3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子組成,，編碼一個(gè)471個(gè)氨基酸組成的G蛋白偶聯(lián)受體。研究推測(cè),，5-HTR2A有6種多態(tài)性,，孤獨(dú)癥易感性可能與腦中5-HTR2A的表達(dá)水平和功能異常有關(guān)。

　　谷氨酸(Glu)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)主要的興奮性神經(jīng)遞質(zhì),。Glu遞質(zhì)系統(tǒng)直接參與認(rèn)知活動(dòng)即學(xué)習(xí)記憶,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LPT)的誘導(dǎo)與Glu受體尤其是NMDA 型及APMP型受體的功能密切關(guān)，而海馬的LPT被認(rèn)為是學(xué)習(xí)和記憶的神經(jīng)基礎(chǔ),。Carlsson基于Glu激動(dòng)劑在健康人體中產(chǎn)生的效應(yīng)類(lèi)同于孤獨(dú)癥患者某些癥狀的特點(diǎn),，提出孤獨(dú)癥可能是一種高Glu疾病。高Glu動(dòng)物模型也顯示了與孤獨(dú)癥相似的缺陷,，如行為異常和重復(fù)刻板運(yùn)動(dòng)等L5 ,。在Glu遞質(zhì)系統(tǒng)的相關(guān)基因中,，Glu受體6(GluR6)基因被認(rèn)為是多種精神性疾病易感的候選基因，它在海馬和杏仁體區(qū)高度表達(dá),，其產(chǎn)物是一種離子通道型受體,，涉及情緒、認(rèn)知及記憶等多項(xiàng)功能,。G1uR6基因定位于6q21,，長(zhǎng)670 kb，含16個(gè)外顯子和14個(gè)內(nèi)含子,，其核酸水平的改變可導(dǎo)致蛋白表達(dá)水平的變化,，從而增加了孤獨(dú)癥的易感性。

　　r-氨基丁酸(GABA)作為一種氨基酸類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì),，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)?，F(xiàn)在很多學(xué)者認(rèn)為，孤獨(dú)癥是發(fā)育過(guò)程中興奮性與抑制性神經(jīng)遞質(zhì)表達(dá)失衡和興奮性與抑制性突觸失衡所致,。正常水平的抑制對(duì)于皮層的發(fā)育是必須的,，而抑制水平的不足，除了癲癇發(fā)作的風(fēng)險(xiǎn)增高外,，還會(huì)造成認(rèn)知過(guò)程和運(yùn)動(dòng)控制的缺陷?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，孤獨(dú)癥患者合成GABA 的谷氨酸脫羧酶(GAD)水平下降;相反,，其谷氨酸能神經(jīng)遞質(zhì)水平卻升高 ,。在GABA遞質(zhì)系統(tǒng)相關(guān)基因中，GAD基因及GABA 受體的B3亞單位(GABRB3)基因與孤獨(dú)癥易感有關(guān),。GABRB3基因定位于15ql卜13,。研究顯示，GABRB3基因的一個(gè)115CA-2標(biāo)記存在連鎖不平衡,，認(rèn)為1 15CA一2與孤獨(dú)癥相關(guān)聯(lián),。

　　此外，目前研究篩選到的孤獨(dú)癥可能候選基因還有W nt2(wingless—type MMTV integration site family member2)基因,、RAYI/ST7,、REELIN、FOXP2基因以及TP32區(qū)域的PEG1/MEST,、COPG2,、CPA1和CPA5基因，位于2號(hào)染色體上的PAX3基因,，8號(hào)染色體上的MMP16基因,，1s號(hào)染色體上的UBE3A和ATP10C基因等。但因?yàn)闃颖玖啃。械幕蛑貜?fù)性有限,，只能被列人可能與孤獨(dú)癥有關(guān)的候選基因之列,，是否是孤獨(dú)癥的致病基因，需作進(jìn)一步研究,。

　　孤獨(dú)癥動(dòng)物模型的研究

　　孤獨(dú)癥的動(dòng)物模型 人胚發(fā)育的20～24 d是神經(jīng)管關(guān)閉和第1批神經(jīng)元發(fā)育的時(shí)間,，是孤獨(dú)癥形成的關(guān)鍵時(shí)間窗。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn),，在這個(gè)關(guān)鍵時(shí)間窗內(nèi)(懷孕的前3個(gè)月),，有抗癲癇藥丙戊酸鈉鹽(VPA)或反應(yīng)停(THAL)用藥史的產(chǎn)婦所生孩子孤獨(dú)癥的發(fā)病率明顯升高。后來(lái)發(fā)現(xiàn),，酒精,、風(fēng)疹病毒疫苗(含汞)和反復(fù)冷凍刺激(repeatedcold stress，RCS)等也是導(dǎo)致孤獨(dú)癥的重要因素,。受此啟示,，用這兩種化學(xué)物質(zhì)處理受孕9～12.5 d的動(dòng)物，果然發(fā)現(xiàn)其子代出現(xiàn)很多與孤獨(dú)癥病人相似的形態(tài)與功能異常,，這使得孤獨(dú)癥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型成為可能,。

　　經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，人們確認(rèn)THAL主要作用于靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物,，而VPA則對(duì)嚙齒類(lèi)動(dòng)物作用明顯,。Tazumi等 研究發(fā)現(xiàn)對(duì)孕鼠反復(fù)冷凍刺激后產(chǎn)的仔鼠也有類(lèi)似于孤獨(dú)癥的癥狀。大鼠懷孕12.5 d被認(rèn)為是在這個(gè)關(guān)鍵時(shí)間窗內(nèi),，給此期的大鼠腹腔注射VPA或以RCS處理孕鼠,，是建立孤獨(dú)癥動(dòng)物模型較可靠的方法。研究表明,，2種孤獨(dú)癥動(dòng)物模型與從孤獨(dú)癥病人取得的解剖學(xué),、病理學(xué)、病因?qū)W和行為學(xué)等方面的數(shù)據(jù)有明顯的相似性,，現(xiàn)已廣泛用于孤獨(dú)癥的實(shí)驗(yàn)研究,。而病毒感染誘導(dǎo)的孤獨(dú)癥模型，雖然行為上和解剖結(jié)構(gòu)上與孤獨(dú)癥相似L6 ,，但其意義需要進(jìn)一步研究。需要指出是,，與其它各種動(dòng)物模型一樣,，因生物基因的特殊性，用動(dòng)物模型模擬人類(lèi)孤獨(dú)癥疾病病理同樣具有局限性,。

　　為探討孤獨(dú)癥的神經(jīng)病理學(xué)變化及其分子病因,，近年來(lái)，我們課題組開(kāi)展了對(duì)孤獨(dú)癥的研究,，我們用上述方法建立了動(dòng)物模型,，檢測(cè)了模型鼠腦內(nèi)多種神經(jīng)化學(xué)物質(zhì)的變化,。

　　孤獨(dú)癥模型鼠的發(fā)育及行為特點(diǎn) 我組采用Wistar大鼠，在其受孕12.5 d時(shí),，腹腔注射VPA獲得子代孤獨(dú)癥動(dòng)物模型,。檢測(cè)了模型動(dòng)物的外觀、體重,、睜眼時(shí)間,、游泳平衡能力和對(duì)麻醉藥物耐受性等生理指標(biāo)。孤獨(dú)癥模型組大鼠與對(duì)照組相比,，結(jié)果顯示：① 體重輕;② 睜眼時(shí)間推遲;③游泳平衡力差;④ 麻醉藥耐受性低;⑤ 尾部出現(xiàn)卷曲畸形,。這些表現(xiàn)與人類(lèi)孤獨(dú)癥的某些特征極為相似，表明用VPA注射法較成功地建立了接近人類(lèi)孤獨(dú)癥的動(dòng)物模型 ,。

　　孤獨(dú)癥模型鼠皮質(zhì)內(nèi)錐體神經(jīng)元的變化Golgi染色顯示：VPA孤獨(dú)癥模型大鼠各腦區(qū)錐體神經(jīng)元較對(duì)照組出現(xiàn)普遍的形態(tài)學(xué)改變,。主要表現(xiàn)為神經(jīng)元胞體變小，形態(tài)不規(guī)則;神經(jīng)元及其纖維排布紊亂;神經(jīng)元軸突普遍較對(duì)照組短,，樹(shù)突紊亂無(wú)序,。如，前額葉皮層錐體神經(jīng)元密度增加,、突起紊亂,，頂樹(shù)突縮短。這些變化有可能導(dǎo)致皮層的體積增加,、神經(jīng)元之間形成錯(cuò)誤連結(jié),、腦區(qū)間神經(jīng)回路異常，進(jìn)而不可避免地造成興奮與抑制失衡的神經(jīng)元功能障礙 ,。

　　孤獨(dú)癥模型鼠腦內(nèi)小清蛋白(PV)陽(yáng)性神經(jīng)元的變化用免疫組化方法,，觀察了成年(12周)模型大鼠腦內(nèi)情緒與認(rèn)知相關(guān)腦區(qū)(杏仁體、前額葉皮層和海馬)內(nèi)的PV 陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)情況,，并與正常對(duì)照組進(jìn)行比較,。結(jié)果顯示：孤獨(dú)癥模型鼠杏仁體、前額葉皮層和海馬區(qū)內(nèi)的PV免疫反應(yīng)陽(yáng)性神經(jīng)元的胞體形態(tài),、大小,、突起的長(zhǎng)度和密度等與正常對(duì)照組相比，都發(fā)生了不同程度的變化,。前額葉皮層與杏仁體內(nèi)PV陽(yáng)性神經(jīng)元的變化特點(diǎn)相似,，可能與兩者的構(gòu)造特點(diǎn)相似有關(guān);海馬內(nèi)的變化少有不同，可能與其功能有關(guān),。這些結(jié)果提示：PV 中間神經(jīng)元在孤獨(dú)癥的發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用,。由于PV神經(jīng)元屬抑制性神經(jīng)元，它們的改變可能削弱了對(duì)孤獨(dú)癥相關(guān)的神經(jīng)環(huán)路中錐體神經(jīng)元的抑制作用 。

　　根據(jù)孤獨(dú)癥發(fā)病特點(diǎn)及PV的表達(dá)特點(diǎn),，分別取發(fā)育過(guò)程中不同時(shí)間點(diǎn)的孤獨(dú)癥模型鼠的杏仁體區(qū),、前額葉皮層區(qū)和海馬區(qū)，用RT-PCR法觀察了VPA孤獨(dú)癥模型鼠和正常鼠發(fā)育過(guò)程中情緒與認(rèn)知相關(guān)腦區(qū)內(nèi)PV mRNA 的表達(dá),。結(jié)果顯示：正常大鼠在出生至第1周末,，各個(gè)腦區(qū)內(nèi)mRNA水平的PV表達(dá)量很少，第2周出現(xiàn)PV表達(dá)量的顯著增加,，這種增加持續(xù)到第3周末,，但是第4周又出現(xiàn)PV表達(dá)量的急劇減少，4周之后海馬區(qū)的PV表達(dá)量將維持在較低的水平,，而杏仁體和前額葉皮層的PV表達(dá)量則緩慢恢復(fù)到3周時(shí)的高水平,。孤獨(dú)癥模型鼠不同腦區(qū)各個(gè)時(shí)間段的PV表達(dá)水平均較正常對(duì)照組低，尤其見(jiàn)于第2周到第4周,，而這段時(shí)間正是突觸形成和功能成熟的關(guān)鍵時(shí)期,，大約有90 的突觸在這段時(shí)間發(fā)育成熟。所以,，我們認(rèn)為,，孤獨(dú)癥模型鼠發(fā)育過(guò)程中情緒與認(rèn)知相關(guān)腦區(qū)內(nèi)PV 的表達(dá)變化可能響突觸的正常發(fā)育與功能成熟，這也可能是導(dǎo)致孤獨(dú)癥發(fā)病的原因之一,。

　　孤獨(dú)癥模型鼠腦內(nèi)BDNF的變化 通過(guò)免疫組織化學(xué)方法和圖像分析技術(shù),，觀察了不同年齡的孤獨(dú)癥模型鼠大腦皮層中BDNF免疫陽(yáng)性神經(jīng)元;進(jìn)而，通過(guò)Western blot方法,，檢測(cè)了孤獨(dú)癥模型大鼠大腦皮層BDNF蛋白表達(dá),。免疫組化結(jié)果顯示：孤獨(dú)癥模型鼠大腦皮層內(nèi)BDNF陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)目在成年前的各年齡段均比對(duì)照組減少，而成年后則比對(duì)照組增多,。Western blot結(jié)果與免疫組化的結(jié)果相符,。這些結(jié)果提示：BDNF可能參與了孤獨(dú)癥發(fā)病過(guò)程中的病理變化，BDNF在發(fā)育期的低水平表達(dá)可能延遲了孤獨(dú)癥患者大腦的發(fā)育,。

　　取新生孤獨(dú)癥模型鼠和正常Wistar大鼠大腦皮層做體外神經(jīng)元培養(yǎng),，用免疫熒光方法比較觀察了模型組與對(duì)照組大腦皮層神經(jīng)元的形態(tài)以及BDNF的表達(dá)。結(jié)果顯示,，對(duì)照組和模型組在神經(jīng)元形態(tài)上無(wú)明顯差異;用BDNF免疫熒光標(biāo)記后,，可見(jiàn)孤獨(dú)癥模型組BDNF免疫陽(yáng)性神經(jīng)元比對(duì)照組少;對(duì)照組BDNF免疫陽(yáng)性物分布在神經(jīng)元的胞質(zhì)、胞核和突起內(nèi),，而模型組僅分布在胞核和胞質(zhì)內(nèi),。這些體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果與上述體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。

　　信號(hào)蛋白 catenin和GSK一3p的表達(dá)變化 Wnt信號(hào)通路是與神經(jīng)發(fā)育相關(guān)的重要通路,。我們用Western blot方法檢測(cè)了孤獨(dú)癥模型鼠前額葉皮層、海馬和小腦中Wnt信號(hào)通路中信號(hào)蛋白分子3-catenin和GSK一3口在發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)變化L6 。結(jié)果顯示：出生后1周的大鼠前額葉皮層中,，catenin的表達(dá)量模型組比對(duì)照組高,，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;在海馬和小腦，模型組和對(duì)照組之間的差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;至出生后第2,、3,、4周和第90天時(shí)，模型組7-catenin在上述各腦區(qū)中的表達(dá)均比對(duì)照組高,，隨年齡增長(zhǎng),，差異趨于顯著。出生后1周,，模型組GSK一3B在前額葉皮層和海馬的表達(dá)比對(duì)照組低,，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而其在小腦的表達(dá)，兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;出生后第2,、3,、4周和90天時(shí)，模型組GSK一3G在上述各腦區(qū)的表達(dá)均比對(duì)照組低,，且隨年齡增長(zhǎng),，差異趨于明顯。根據(jù)這些信號(hào)蛋白分子在wnt中的作用進(jìn)行分析,，結(jié)果提示,，孤獨(dú)癥模型鼠腦內(nèi)wnt信號(hào)通路傳導(dǎo)亢進(jìn)，而亢進(jìn)的結(jié)果可能正是導(dǎo)致孤獨(dú)癥腦內(nèi)神經(jīng)元發(fā)育異常的主要原因之一,。所以,，wnt信號(hào)通路亢進(jìn)在孤獨(dú)癥的發(fā)病中起重要作用。

　　為進(jìn)一步從形態(tài)學(xué)上證明前述結(jié)果,，我們選擇性地對(duì)部分腦區(qū)進(jìn)行了免疫組織化學(xué)染色觀察,。對(duì)出生后1～4周和90 d模型鼠腦內(nèi)的GSK-3β進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，結(jié)果顯示：GSK-3β口主要在小腦的浦肯野細(xì)胞胞質(zhì)中表達(dá),。在出生后1周,，模型鼠的GSK-313免疫陽(yáng)性神經(jīng)元與對(duì)照組相比，沒(méi)有明顯變化;至第2,、3周時(shí),，模型組的GSK-3β免疫陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)量減少;而在第4周和9()天時(shí)，模型組的GSK-3β免疫陽(yáng)性神經(jīng)元的減少更為明顯,，且部分神經(jīng)元染色較淡,，說(shuō)明GSK 3B在小腦內(nèi)的表達(dá)明顯減少。這種形態(tài)變化與上述Western blot的結(jié)果相符,。由于GSK-3β是β-catenin的主要負(fù)性調(diào)節(jié)因子,，能使β-catenin發(fā)生磷酸化，使其進(jìn)入蛋白酶體被降解,，如果GSK-3β水平降低,，對(duì)β-catenin的降解就會(huì)減少，從而引起wnt信號(hào)增強(qiáng) ,。

　　小結(jié)與展望

　　綜上所述,，作為一種嚴(yán)重影響兒童身心健康的廣泛發(fā)育障礙性疾病，孤獨(dú)癥正在越來(lái)越多地受到人們的關(guān)注,。然而,，盡管有各學(xué)科專(zhuān)家的不懈努力，孤獨(dú)癥的發(fā)病原因仍不很清楚,，因而尚無(wú)有效的治療方法和預(yù)防措施,，對(duì)孤獨(dú)癥的研究之路仍然很長(zhǎng)。

　　未來(lái)研究的重點(diǎn)將仍然是孤獨(dú)癥的分子病因,，包括基因和環(huán)境兩方面的因素,。其中，對(duì)基因的研究,，主要有與神經(jīng)元遷移相關(guān)的基因,，如參與神經(jīng)元發(fā)育和遷移的RELN 基因;與神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)的基因，如與GABA 和5-HT等神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)的基因;與突觸形成相關(guān)的蛋白基因,，如Neurexins和neuroligin等基因;與細(xì)胞內(nèi)通路及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白的基因,，如PTEN 基因、wnt信號(hào)通路及其信號(hào)蛋白Dvl一1基因,。

　　預(yù)防是降低孤獨(dú)癥出生風(fēng)險(xiǎn)的重要措施,。在女性懷孕早期，即胚胎神經(jīng)管形成和發(fā)育期,，應(yīng)避免濫用藥,，特別是抗癲癇類(lèi)藥物;避免病毒性感染;避開(kāi)冷熱溫差變化較大的環(huán)境;以及避免受重大精神刺激和創(chuàng)傷等。

　　全社會(huì)特別是政府部門(mén),，有必要從提高國(guó)民人口素質(zhì)的戰(zhàn)略高度,，重視對(duì)孤獨(dú)癥的研究和治療，有必要對(duì)孤獨(dú)癥研究和防治進(jìn)行專(zhuān)項(xiàng)投資,。在美國(guó),、與孤獨(dú)癥相關(guān)的年度開(kāi)支已經(jīng)達(dá)300多億美元,，還在全國(guó)范圍內(nèi)建立了孤獨(dú)癥實(shí)時(shí)情況報(bào)告體系,。我國(guó)還應(yīng)該建立正規(guī)的、專(zhuān)業(yè)化的孤獨(dú)癥康復(fù)訓(xùn)練學(xué)校,，培養(yǎng)專(zhuān)業(yè)化的孤獨(dú)癥康復(fù)和培訓(xùn)的師資隊(duì)伍,，對(duì)孤獨(dú)癥患者盡早進(jìn)行專(zhuān)業(yè)化的康復(fù)訓(xùn)練。我們相信,，經(jīng)過(guò)系統(tǒng)的科學(xué)的康復(fù)訓(xùn)練和治療,，很多孤獨(dú)癥患兒有望不同程度地走出“孤獨(dú)”,。

　　文章來(lái)源：維普資訊網(wǎng) 復(fù)旦學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版-2010年1期