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抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 說 明 書 【產(chǎn)品名稱】 通用名：抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP）抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法） 【包裝規(guī)格】48人份/盒,；96人份/盒 【預(yù)期用途】 檢測類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）患者血清中抗環(huán)瓜氨酸肽（anti-CCP）自身免疫性抗體,，其具有早期診斷和提高特異性并用作替代進(jìn)口產(chǎn)品,。 近來不斷發(fā)現(xiàn)對RA診斷具有特異性的抗體,，如抗核周因子（APF）,、抗角蛋白抗體（AKA）,、這些抗體在大約50%的RA病人中有表達(dá),，特異性為90%左右,。已經(jīng)證實上述抗體識別的共同抗原決定族是聚纖蛋白（filaggrin）中的瓜氨酸殘基,?？弓h(huán)瓜氨酸肽（CCP）抗體即是其中的一種,，它與關(guān)節(jié)病變相關(guān),，可出現(xiàn)于RA的早期,。 【檢驗原理】 本試劑盒利用酶聯(lián)免疫吸附分析法（ELISA）體外定性檢測人血清或血漿中針對環(huán)瓜氨酸肽（CCP）的抗體（Anti-CCP）。由于抗環(huán)瓜氨酸肽抗體對于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）具有高度特異性而用于臨床診斷,。 【主要組成成份】 1,、 預(yù)包被反應(yīng)板（已包被有CCP抗原，可拆板條,。不同批號間不能互換） 12×4/12×8,； 2、 標(biāo)本稀釋液（磷酸緩沖液為主,，含BSA,、0.1%疊氮鈉。不同批號間可以互換） 11/22ml,； 3,、 濃縮洗滌液（30×）(磷酸緩沖液為主，含TW-20,、0.1%疊氮鈉,。不同批號間可以互換) 10/20ml； 4,、 酶結(jié)合物（酶標(biāo)記SPA,，含蛋白穩(wěn)定劑、0.02%硫柳汞,。不同批號間不能互換） 5/12ml,； 5、顯色劑A,、B （TMB溶于檸檬酸緩沖液,，含過氧化脲。不同批號間可以互換） 各3/5ml,； 6,、終止液 （2M H2SO4。不同批號間可以互換） 3/5ml,； 7,、陰性,、陽性對照（正常兔血清和兔CCP陽性血清、甘油等,。不同批號間可以互換） 各0.6/1.0ml,； 8、標(biāo)準(zhǔn)品（直接使用）6支（0,、12.5,、25、50,、100,、200U/ ml）各0.6ml/1.0ml； 9,、說明書 1份（不同批號間可以互換）,。 【貯存條件及有效期】 2-8℃密封保存，避免凍結(jié),。有效期10個月,。 【適用儀器】 各類國產(chǎn)和進(jìn)口酶標(biāo)儀均可使用，檢測波長450nm,。 【樣本要求】 1,、 盡量用新鮮標(biāo)本，如需保存,，可于2-8℃冷藏48小時或-20℃凍存4周（樣本應(yīng)避光）,。避免反復(fù)凍融（3次以上）。 2,、 避免用溶血,、混濁或脂血標(biāo)本。 3,、 樣本若需運輸,，應(yīng)保持2-8℃或凍存狀態(tài)。 4,、 標(biāo)本中避免加入抗凝劑或保護(hù)劑或防腐劑,，以免影響試驗結(jié)果,。 【檢驗方法】 1,、 試劑盒平衡至室溫后取出反應(yīng)板拆封。 2,、 加樣：每孔加標(biāo)本稀釋液200ul,，再分別加待檢標(biāo)本5ul（1︰41）。設(shè)陰陽性對照（100ul各一孔）于反應(yīng)板中,；設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品（100ul各一孔）建議設(shè)雙孔于反應(yīng)板中,；設(shè)空白對照一孔（加100ul標(biāo)本稀釋液）,；輕拍混勻。 3,、 孵育：37℃溫育60分鐘,。甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液洗板3次并在吸水紙上拍干,。 4,、 加酶結(jié)合物：每孔2滴，混勻后置37℃溫育60分鐘,。同上法洗滌3次并拍干,。 5、 顯色：每孔加顯色劑A,、B各一滴,，輕拍混勻（或震蕩器混勻）后置37℃10分鐘。 【檢驗結(jié)果的解釋】 1,、 標(biāo)儀測定：每孔加終止液一滴,，混勻后在450nm下以空白孔調(diào)零測定各孔O.D值。 2,、 以6支標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為縱坐標(biāo),，其濃度（0、12.5,、25,、50、100,、200U/ ml）為橫坐標(biāo),，做標(biāo)準(zhǔn)曲線。待檢樣品的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上所對應(yīng)的濃度即為該樣品的實際含量,。建議標(biāo)準(zhǔn)品做雙孔,，取OD均值。 3,、 對實驗結(jié)果可能產(chǎn)生影響的因素見“注意事 項”內(nèi)容,。 [參考值（參考范圍）] 樣品含量大于或等于12.5U/ ml即為陽性，小于12.5U/ ml為陰性,。 [檢驗方法的局限性] 1,、本試劑盒檢測結(jié)果只作為輔助診斷，疾病的確診需要結(jié)合臨床癥狀/體征和其他檢查方法方可做出判斷,。 2,、O.D值大于2.5以上、小于0.10以下時為非線性,，若要得到準(zhǔn)確值,，需要調(diào)整標(biāo)本稀釋度并在判讀結(jié)果時結(jié)合考慮相應(yīng)的稀釋度,。 [產(chǎn)品性能指標(biāo)] 1、特異性：對RA患者的特異性可達(dá)97%,，對正常人群的特異性在99%,。 2、靈敏度：對低值陽性標(biāo)本的檢測,，O.D值應(yīng)在0.21-0.45之間,。 3、重復(fù)性：批內(nèi),、批間變異系數(shù)均＜10%,。 【注意事項】 1、 試劑盒僅供體外診斷用,。 2,、 微孔板須密封防潮，從冷藏環(huán)境中取出時,，應(yīng)置室溫平衡至潮氣盡干后方可開啟使用,，余者封存置2-8℃短期內(nèi)用完。 3,、 滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次混勻,，滴加時保持瓶身垂直。 4,、 洗滌時每孔均須加滿,，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。 5,、 試劑置2-8℃存放,，不能凍結(jié)。 6,、 本試劑盒中陰陽性對照雖不含人源性血清成分,，但應(yīng)嚴(yán)格按常規(guī)作為污染物處理。 1,、 【參考文獻(xiàn)】 1. Schellekens GA,et al,The diagnostic properties of rheumatoid arthritis antibodies recognizing a cyclic citrullinated peptide,Athriti Rheum,2000,43:155-163. 【生產(chǎn)企業(yè)】 |
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