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菌落總數(shù)能力驗證,,真的簡單嗎,?

 逐夢經(jīng)典 2020-09-04

食品微生物檢測

菌落總數(shù)的測定方法,看似非常簡單,,但由于食品種類繁多,,食品中可能存在的微生物菌群較多,要在同等條件下把所有的細菌培養(yǎng)出來,,反應(yīng)樣品的真實情況,,實屬不易。

菌總計數(shù)容易會出現(xiàn)哪些問題呢,?

 

1,、在營養(yǎng)成分單一、保存條件苛刻的食品(水,、水產(chǎn)品等)中,,微生物復(fù)蘇、生長緩慢,,培養(yǎng)48h計數(shù)時容易遺漏

2,、一些食品處理后,仍存在類似菌落的顆粒狀雜質(zhì),,很難判斷是菌落還是雜質(zhì)

3,、一些食品容易污染變形桿菌等運動性較強的蔓延菌,培養(yǎng)后無法計數(shù),。

關(guān)鍵是,,能力驗證是考察實驗室檢驗?zāi)芰Φ耐獠抠|(zhì)量活動,組織方提供試驗樣本,,在菌落總數(shù)項目上,,一般會考慮增加上述難度

防止蔓延的方法有哪些,?

No.1 增加覆蓋一層瓊脂培養(yǎng)基

蔓延菌大多為需氧菌,,覆蓋一層瓊脂的目的是隔絕空氣,降低需氧菌生長速度,。

No.2 添加TTC

TTC(2,,3,5-氯化三苯基四氮唑),,不僅可以使菌落產(chǎn)生紅色,,便于辨識,也可部分地抑制大片蔓延菌落的形成,。

No.3 陶瓦蓋代替平皿蓋

用陶瓦蓋代替平皿蓋,,可有效去除培養(yǎng)基表面水分,阻止細菌移動,,有效抑制蔓延,。傾注培養(yǎng)基凝固后,,用陶瓦蓋(干熱滅菌)代替平皿蓋,正置放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。

?以上三種方法哪種最好呢,?

??真相大揭秘

方法:我們分別采用PCA直接傾注法、覆蓋一層培養(yǎng)基法,、TTC法,、用陶瓦蓋代替平皿蓋法對同一樣本進行菌落總數(shù)計數(shù)。其中,,TTC培養(yǎng)基冷卻至56℃左右加0.5%的TTC溶液(1mL/100mL),。陶瓦蓋法平皿正置放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

從6小時開始觀察菌落生長情況并計數(shù),,以后每隔12小時觀察1次,。

結(jié)  果

PCA直接傾注法菌落生長相對較快,培養(yǎng)24h,,菌落數(shù)已達到峰值,,其他方法平板培養(yǎng)36h或48h后,達到峰值,。

添加TTC的平板菌落生長相對比較緩慢,,且培養(yǎng)到最后,菌落依然比較小,,但總體檢出數(shù)值較高,。其原因是TTC平板能將部分細小菌落,或生長于瓊脂內(nèi)部,、顏色與平板顏色相近,,肉眼不易觀察的菌落計出。

有圖有真相

單因素方差分析,,P>0.05(95%置信度),,四種試驗計數(shù)結(jié)果并無顯著差異。按照微生物能力驗證的數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析原則,,當Z≤2時方為滿意結(jié)果,。因此雖然方法之間數(shù)據(jù)差異不大,但有必要提高檢驗技術(shù),,將結(jié)果控制在最準確的數(shù)值范圍之內(nèi),,才能保證在能力驗證評價中取得滿意結(jié)果,。

get到了嗎,?

來源:食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報 食品微生物能力驗證樣品菌落總數(shù)檢驗方法 肖劍等

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