清潔驗(yàn)證概述及四個(gè)階段劃分

在制藥企業(yè)中,，同一設(shè)備可能會(huì)用于多種產(chǎn)品的生產(chǎn),，在藥品生產(chǎn)結(jié)束后，對(duì)生產(chǎn)用到的相關(guān)設(shè)備進(jìn)行有效的清潔,，是防止藥品污染和交叉污染的必要手段,。

在GMP條款中一直強(qiáng)調(diào)關(guān)于清潔、防止交叉污染的的條款,，早在1963年美國(guó)頒布GMP條例（133.4）中就寫到“生產(chǎn)設(shè)備必須保持潔凈有序的狀態(tài)”,。為了達(dá)到相關(guān)法規(guī)規(guī)范的要求，藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)保證產(chǎn)品的殘留可以通過一定的清潔程序從設(shè)備表面清除,，并提供書面證據(jù)證明各種污染和交叉污染已被有效防止,。

設(shè)備的清潔程序取決于殘留物的性質(zhì)、設(shè)備的結(jié)構(gòu),、材質(zhì)和清洗的方法,，對(duì)于確定的設(shè)備和產(chǎn)品，清潔效果取決于清洗的方法,，書面的,、確定的清潔方法即所謂的清潔規(guī)程。清潔工藝的運(yùn)行參數(shù)包括清潔劑種類,、濃度,、接觸時(shí)間,、溫度等各種參數(shù),。

在制藥工業(yè)中，清潔的概念是指設(shè)備中各種殘留物（包括微生物及其代謝產(chǎn)物）的總量低至不影響下批產(chǎn)品的規(guī)定的療效,、質(zhì)量和安全性的狀態(tài),。通過有效的清洗，可將上批生產(chǎn)殘留在生產(chǎn)設(shè)備中的物質(zhì)減少到不會(huì)影響下批產(chǎn)品的療效,、質(zhì)量和安全性的程度,。清潔驗(yàn)證即對(duì)清潔規(guī)程的效力進(jìn)行確認(rèn)，通過科學(xué)的方法采集足夠的證據(jù),，以證實(shí)按規(guī)定的方法清潔后的設(shè)備,，能始終如一的達(dá)到預(yù)定的清潔標(biāo)準(zhǔn)。

通常的做法是將清潔驗(yàn)證分為四個(gè)階段,，方法開發(fā)階段,、方案準(zhǔn)備階段,、方案實(shí)施階段、驗(yàn)證狀態(tài)維護(hù)階段,，圖1將各個(gè)階段進(jìn)行流程化,，以下分別對(duì)其進(jìn)行闡述。

1.開發(fā)階段

根據(jù)產(chǎn)品性質(zhì),、設(shè)備特點(diǎn),、生產(chǎn)工藝及所使用的原輔料等因素進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室模擬，擬定清潔方法并制定清潔規(guī)程,，對(duì)清潔人員進(jìn)行操作培訓(xùn),。

2.方案準(zhǔn)備階段

首先應(yīng)該準(zhǔn)備清潔驗(yàn)證計(jì)劃，列出清潔驗(yàn)證的設(shè)計(jì)與策略,，對(duì)生產(chǎn)設(shè)備進(jìn)行詳細(xì)考察,，確定有代表性的，難清潔的部位作為取樣點(diǎn),；計(jì)算設(shè)備內(nèi)表面積,，根據(jù)產(chǎn)品的相關(guān)性質(zhì)選定某種物質(zhì)作為參照物質(zhì)，確定清潔后允許的最大殘留量為合格標(biāo)準(zhǔn),，驗(yàn)證中通過檢驗(yàn)其含量確定設(shè)備清潔的程度,，必要時(shí)還要考察清潔劑的殘留量；根據(jù)驗(yàn)證共同要

求制訂并批準(zhǔn)驗(yàn)證方案,，開發(fā)驗(yàn)證有關(guān)的取樣方法和檢驗(yàn)方法,，以保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，在驗(yàn)證開始前需要對(duì)有關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn),。

3.方案實(shí)施階段

按照批準(zhǔn)的驗(yàn)證方案開展試驗(yàn)獲取數(shù)據(jù),，評(píng)價(jià)結(jié)果得出結(jié)論。如驗(yàn)證的結(jié)果表明清潔程序無法確保設(shè)備清潔達(dá)到預(yù)定標(biāo)準(zhǔn),，則需要查找原因,、修改程序并重新驗(yàn)證，直至結(jié)果合格,。

4.驗(yàn)證狀態(tài)維護(hù)階段

已經(jīng)通過驗(yàn)證的清潔方法隨即進(jìn)行維護(hù)階段,，對(duì)已投入運(yùn)行的清潔方法進(jìn)行監(jiān)控，對(duì)清潔方法的變更實(shí)行變更管理,，根據(jù)監(jiān)測(cè)的結(jié)果來看各種生產(chǎn)活動(dòng)中,，所采用的清潔方法能達(dá)到的實(shí)際效果，以確定再驗(yàn)證的周期進(jìn)行再驗(yàn)證,。

圖1清潔驗(yàn)證四個(gè)階段

2

清潔工藝的設(shè)計(jì)與開發(fā)

可將清洗過程分為物理方法與化學(xué)方法,，物理方法包括沖淋、擦洗,、真空除塵,，使用物理清洗的方法須考慮殘留物的溶解性,、批量、及其在設(shè)備表面的粘附程度,?；瘜W(xué)清洗機(jī)制包括溶解、乳化,、濕潤(rùn),、鰲合、分散,、水解,、氧化作用等。

殘留物與清洗液接觸,、被潤(rùn)濕,、脫離設(shè)備表面等共同的過程，在此以最普遍的清洗機(jī)制—溶解為例進(jìn)行詳細(xì)討論,。

以溶解為機(jī)制的清洗過程主要是通過溶劑對(duì)殘留物的溶解作用以及流動(dòng)的清洗液對(duì)殘留物的沖擊而使附著在設(shè)備表面的殘留物進(jìn)入溶劑中,。微觀上看溶解的速度取決于單位時(shí)間內(nèi)由溶質(zhì)表面進(jìn)入溶液的溶質(zhì)分子數(shù)與從溶液中回到溶質(zhì)表面的分子數(shù)之差。一旦差值為零,，表面溶解過程達(dá)到動(dòng)態(tài)平穩(wěn),，此溶液即為飽和溶液。溶解過程中從溶質(zhì)表面很快形成一層薄薄的飽和溶液,，飽和溶液中的溶質(zhì)分子不斷向溶液深處擴(kuò)散,，形成從溶質(zhì)表面到溶液深處的一個(gè)遞減的濃度梯度。如果飽和層的溶質(zhì)分子不能迅速進(jìn)入非飽和的溶液深處,，就會(huì)降低溶解的速度,。因此即使是溶解度很大的物質(zhì)，如蔗糖的塊狀結(jié)晶（俗稱冰糖）在無攪拌的靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解速度也非常緩慢,，提高溶解速度的方法是提高溶液流動(dòng)速度,。

在清洗過程中，必須使清潔劑在的運(yùn)動(dòng)中與殘留物接觸,。清潔劑與殘留物的相對(duì)運(yùn)動(dòng)從宏觀上可分解為垂直方向和水平方向的運(yùn)動(dòng),。相對(duì)運(yùn)動(dòng)可將已溶解的物質(zhì)迅速帶離溶質(zhì)表面，而水平方向的相對(duì)運(yùn)動(dòng)根據(jù)流體力學(xué)的基本原理,，可分為層流和湍流兩類情況

圖2流體在層流及湍流中的流速

(a)層流狀態(tài)；(b)湍流狀態(tài)

W—最大流速,；Wm—平均流速

層流指流體在導(dǎo)管中流動(dòng)時(shí),，所有質(zhì)點(diǎn)均沿著與管軸平行的方向流動(dòng)。此時(shí)流體的速度在管道軸心處的速度最大,，自軸心至管壁速度逐漸減小至等于零,。由此可以推斷,，如果清潔劑在待清洗設(shè)備中形成了層流，會(huì)很迅速地在殘留物表面形成穩(wěn)定的飽和溶液層,，殘留物的溶解速度會(huì)急劇下降,，這與靜止?fàn)顟B(tài)下的溶解過程非常相似，從而清潔效率也隨之明顯下降,。因此在清潔中應(yīng)避免層流的產(chǎn)生,。流體以湍流形式流動(dòng)時(shí)，雖然宏觀上流體沿管道向一個(gè)方向流動(dòng),，但從微觀上看各質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)速度在大小和方向上都隨時(shí)發(fā)生變化,。總有部分質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)方向相對(duì)垂直于管軸或管壁,。這樣殘留物表面也就不會(huì)形成穩(wěn)定的飽和層,，溶解的速度就大大提高了，清潔的效率也隨之提高,。因此在清洗過程中,，必須保證清潔液以湍流形式流動(dòng)，流體以何種形式流動(dòng)取決于流體雷諾系數(shù)Re的大小,。

Re=dωρ/μ

式中,，d為管道直徑；ω為流速,；ρ為流體密度,；μ為黏度。

當(dāng)Re＜2300時(shí),，為層流,；Re＞10000時(shí)，為湍流,；2300＜Re＜10000時(shí),，為層流和湍流的過渡階段。Re越大,，表面湍流越劇烈,，即質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)方向和速率的變化越大，殘留物溶解的速度越快,。

在已確定清潔劑和淋洗液的情況下Re正比于管徑與流速的乘積,；

Re∝dω

比較普遍的在線清洗過程都有清潔劑在泵的驅(qū)動(dòng)下在設(shè)備與管道循環(huán)的步驟。對(duì)已確定的系統(tǒng),，清潔流量V是固定的,。根據(jù)液體的不可壓縮特性，在沒有平行管道和分叉的情況下，不管管徑如何變化,，管內(nèi)各點(diǎn)的流量必然相同,。

因V=ωS=ωπR2=π/4×ωd2，其中S為管道截面積,，

則ω=4/π×V/d2

則Re∝V/d,，如V為定值，

則Re∝1/d

由此可知,，在系統(tǒng)中,，管徑較大的部位或管徑由小變大的部位Re值較小，相對(duì)容易發(fā)生層流,，較難被清潔,。

對(duì)有多根平行管道尤其是管徑不同的系統(tǒng)，因各管道的流速變化,、流量分配各不相同,，通常將這些部位列為較難清潔的部位。

此外,，切不可忽視那些似乎不直接接觸產(chǎn)品的部位,，如復(fù)方氨基酸注射液配制系統(tǒng)一般需安裝防爆安全閥（膜）的歧管、排氣管,、充氮管,、抽真空管等。這些管道由于投料時(shí)物料微粒的飛揚(yáng),，或因?yàn)榕渲乒迌?nèi)霧化的小液滴隨充氮,、抽真空等工藝過程四處飄散而可能被污染。有時(shí)這種污染很輕微,，但如果清潔程序未能考慮這些管路,，日積月累可能產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。

綜合而言,，凡是死角,、清潔劑不易接觸的部位如帶密封墊圈的管道連接處，壓力,、流速迅速變化的部位如有歧管或岔管處,、管徑由小變大處、容易吸附殘留物的部位如內(nèi)表面不光滑處等,，都應(yīng)視為最難清潔部位,。

乳化和化學(xué)反應(yīng)的機(jī)制在微觀上與溶解過程相似，都有清潔劑分子作用于殘留物表面,，致其表面的分子脫離或反應(yīng)生成其他物質(zhì)進(jìn)而溶解,，因此宏觀上不容易形成湍流的部位也是難清潔的部位,。

3

清洗方式的分類及清潔劑選用原則

清潔方式的分類

按清洗位置對(duì)清洗方式分類,，可將清洗方式分為在線清洗與離線清洗兩類,。

按自動(dòng)/手動(dòng)清洗方式分類，可將清洗方式分為自動(dòng)清潔,、手動(dòng)清潔兩類,。

手動(dòng)清洗為了確保清潔程序的重現(xiàn)性，需要建立文件進(jìn)行詳細(xì)的過程描述,，操作人員的培訓(xùn),、充分的監(jiān)控、清晰的書面清潔程序有助于確保手動(dòng)清潔的一致性,。

自動(dòng)清洗通常不涉及人員介入,，清洗系統(tǒng)通常對(duì)不同的清洗行程進(jìn)行編程，采用自動(dòng)清潔方式可對(duì)自動(dòng)清洗的行程和參數(shù)進(jìn)行一致,、穩(wěn)定的監(jiān)控,。

清潔劑的選用

清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備,，且本身易被清除,，隨著環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)的提高，還應(yīng)要求清潔劑對(duì)環(huán)境盡量無害或可被無害化處理,，滿足以上要求并且應(yīng)盡量廉價(jià),。根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于水溶性殘留物,，水是首選的清潔劑,。

從驗(yàn)證的角度，不同批號(hào)的清潔劑應(yīng)當(dāng)有足夠的質(zhì)量穩(wěn)定性,。因此不宜提倡采用一般家用清潔劑,，因其成分復(fù)雜、生產(chǎn)過程中對(duì)微生物污染不加控制,、質(zhì)量波動(dòng)較大且供應(yīng)商不公布詳細(xì)組成,。使用這類清潔劑后，還會(huì)帶來另一個(gè)問題,，即如何證明清潔劑的殘留達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn),。

應(yīng)盡量選擇簡(jiǎn)單、成分確切的清潔劑,。根據(jù)殘留物和設(shè)備的性質(zhì),，企業(yè)還可自行配制成分簡(jiǎn)單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸,、堿溶液等,。企業(yè)應(yīng)有足夠靈敏的方法檢測(cè)清潔劑的殘留情況，并有能力回收或?qū)U液進(jìn)行無害化處理。

一般來說,，生產(chǎn)后清潔用到的清潔劑通常分為四類,。

4

清潔操作規(guī)程的要點(diǎn)

應(yīng)在設(shè)備的清潔規(guī)程中規(guī)定一臺(tái)設(shè)備需要拆卸的程度，大多數(shù)設(shè)備,，如大容量注射劑的灌裝機(jī),、固體制劑一步制粒機(jī)等在清潔前需要預(yù)先拆卸到一定程度，小針的灌裝機(jī)則幾乎可以說是完全拆卸,。應(yīng)有書面的,、內(nèi)容清晰完整的拆卸指導(dǎo)，最好附有示意圖,，以使操作人員容易理解,。

預(yù)洗/檢查

預(yù)洗的目的是除去大量的（可見的）殘留產(chǎn)品或原料，為此后的清潔創(chuàng)造一個(gè)基本一致的起始條件,。

由于清潔規(guī)程往往不是專用的,，它需要適用于生產(chǎn)多種產(chǎn)品和濃度或劑量規(guī)格的通用設(shè)備，以簡(jiǎn)化管理及操作,，因此需要進(jìn)行預(yù)洗,。預(yù)洗的作用是確立一個(gè)相對(duì)一致的起始點(diǎn)，以提高隨后各步操作的重現(xiàn)性,。

預(yù)洗所用水質(zhì)不必苛求,，通常飲用水或經(jīng)一定程序凈化（如過濾）的飲用水已經(jīng)足夠，使用水管或手持高壓噴槍以新鮮的流水沖洗設(shè)備以除去殘留物,。對(duì)于殘留物物理性質(zhì)差異較大的情況,，有的企業(yè)希望制定一份產(chǎn)品與預(yù)洗參數(shù)如水溫、壓力,、時(shí)間等一一對(duì)應(yīng)的對(duì)照表,，由操作人員按實(shí)際產(chǎn)品選擇參數(shù)。這種方法在實(shí)施時(shí)并不十分理想,。由于操作人員的素質(zhì)及習(xí)慣,，從一大堆方案中去選擇應(yīng)當(dāng)采用的方案反而容易造成差錯(cuò)，比較簡(jiǎn)單而切合實(shí)際的方法是讓操作者檢查是否還有可見的殘留物,，讓他們持續(xù)噴洗設(shè)備直至可見殘留物消失,，以此作為預(yù)洗的終點(diǎn)。因此操作者判斷預(yù)洗完成與否的標(biāo)準(zhǔn)必須盡可能的明確,，特別是應(yīng)檢查的部位,。例如可在規(guī)程中作出這樣的規(guī)定，用熱的飲用水持續(xù)噴淋機(jī)器的所有表面,，使所有可見的殘留顆粒消失,，特別注意檢查不易清潔的部位,。

清洗參數(shù)

清洗程序的操作參數(shù)（如清潔劑種類、濃度,、接觸時(shí)間,、殘留物的特性、污染條件）,，還包括清洗設(shè)備的特性,，自動(dòng)化的清洗路徑,，清潔環(huán)境的順序,，每步的流速，在投入使用前都需要確認(rèn),。清潔程序每一步均包含4個(gè)參數(shù),，分別是時(shí)間、動(dòng)作,、濃度及溫度,。這四個(gè)參數(shù)是互相聯(lián)系的，且會(huì)對(duì)清潔周期中的每一階段的成功存在直接關(guān)系,，比如通過對(duì)清潔劑的加熱以提高去污能力,。作為清潔參數(shù)的變量需要確定，清潔參數(shù)的可接受范圍作為清潔程序開發(fā)工作的一部分進(jìn)行建立,。

時(shí)間

被定義為清洗步驟的時(shí)間的長(zhǎng)短,，在一個(gè)清洗步驟中，可以采用兩種方式來進(jìn)行定義和測(cè)量：直接法與間接法,，直接法時(shí)可使用作為控制系統(tǒng)中的計(jì)時(shí)器測(cè)量時(shí)間,。也可以通過間接法測(cè)量時(shí)間，例如在淋洗時(shí),，有時(shí)通過測(cè)量體積來代替測(cè)量時(shí)間,，因?yàn)橥ㄟ^體積和流速可以確定時(shí)間。對(duì)于最終淋洗水,，普遍會(huì)增加測(cè)試要求,，如電導(dǎo)率。

動(dòng)作

被定義為清潔劑的流體動(dòng)作,。如浸泡,，洗滌，沖擊,，湍流,。攪動(dòng)能夠提高清潔劑的有效性和清潔工藝的效果。典型的手工清洗包括浸泡和擦洗,，以達(dá)到清潔效果,。自動(dòng)清潔程序通常采用沖擊流或湍流作為清潔動(dòng)作,。清潔程序需明確清潔動(dòng)作。流速是清潔劑和清洗水在流經(jīng)設(shè)備時(shí)的重要參數(shù),，應(yīng)該在清潔工藝的每個(gè)步驟中規(guī)定流速并進(jìn)行確認(rèn),。噴淋裝備要具有最大和最小流量的要求，管道的淋洗流速要確保形成湍流,。

清潔劑的濃度

直接影響清潔程序是否能夠成功,，化學(xué)清洗劑可以是濃縮型的稀釋后使用。清潔效果與清潔劑的濃度有關(guān)系,，清潔劑使用太少可能達(dá)不到清潔效果,，使用太多來自清潔劑的殘留可能難以去除，并需要使用大量的淋洗,。通常,，對(duì)于堿性清潔劑達(dá)到最佳清潔效果的方法可以是在攪拌狀態(tài)下提高溫度或延長(zhǎng)湍流淋洗周期的時(shí)間。

化學(xué)清洗劑在采購(gòu)和處置方面,，均會(huì)產(chǎn)生不小的資金投入,，因此確定正確的濃度以保證清潔效果是極為重要的。清潔劑添加的自動(dòng)系統(tǒng),，必須具有可重現(xiàn)性,。不管采用何種添加方式，確認(rèn)清潔劑濃度有助于證實(shí)該方式的一致性,。對(duì)于自動(dòng)清潔程序,，電導(dǎo)率測(cè)試是最容易測(cè)試強(qiáng)堿或強(qiáng)酸清潔劑濃度的方式。

應(yīng)能夠通過清潔劑的化學(xué)組成在線測(cè)試出清潔劑濃度的異常變化,，例如一些清潔劑添加系統(tǒng)以體積進(jìn)行控制并采用電導(dǎo)率測(cè)試作為確認(rèn)方法,。當(dāng)電導(dǎo)率超出預(yù)設(shè)值時(shí)，就會(huì)報(bào)警,，允許的范圍需來自清潔程序開發(fā)的數(shù)據(jù),。

溫度

清潔程序中不同步驟的最佳溫度范圍會(huì)有所不同，初始清潔劑典型的溫度為室溫,，目的是最大程度的去除變性或降解產(chǎn)物和最大程度的稀釋產(chǎn)物,。清潔劑經(jīng)過加熱以提高效果，最終清洗水可通過高溫以加快干燥速率和提高任何工藝及清潔劑殘留的溶解性,。

5

清潔驗(yàn)證主計(jì)劃

清潔驗(yàn)證主計(jì)劃

所有驗(yàn)證活動(dòng)應(yīng)有計(jì)劃,，清潔驗(yàn)證計(jì)劃的要求應(yīng)在主計(jì)劃或類似文件中規(guī)定和記錄，藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證主計(jì)劃的內(nèi)容原則上可能是相同,。計(jì)劃應(yīng)描述職責(zé),、清潔驗(yàn)證計(jì)劃和清潔驗(yàn)證的實(shí)施情況。最好有一個(gè)詳細(xì)的清潔驗(yàn)證主計(jì)劃,，該計(jì)劃在整個(gè)廠區(qū)驗(yàn)證主計(jì)劃中有所描述,，清潔驗(yàn)證主計(jì)劃可能包含所有內(nèi)容,。還有一種方法是準(zhǔn)備一個(gè)概述版的清潔驗(yàn)證主計(jì)劃，再準(zhǔn)備一個(gè)清潔驗(yàn)證執(zhí)行或項(xiàng)目計(jì)劃,，詳細(xì)說明清潔驗(yàn)證的要求,。應(yīng)當(dāng)定期審核和更新這些實(shí)際存在的文件，定期編寫計(jì)劃報(bào)告,，總結(jié)計(jì)劃執(zhí)行過程中的重要活動(dòng),。

計(jì)劃應(yīng)說明清潔驗(yàn)證程序的每個(gè)重要方面，主計(jì)劃的構(gòu)成及所需提供的適當(dāng)細(xì)節(jié)取決于特定設(shè)施的實(shí)際操作,，主計(jì)劃的構(gòu)成包括但不限于以下主題,。

01

目的

清潔驗(yàn)證主計(jì)劃有助于公司管理層了解驗(yàn)證活動(dòng)所涉及時(shí)間、人員的安排,，以及進(jìn)行相關(guān)確認(rèn)與驗(yàn)證活動(dòng)的必要性,，有助于驗(yàn)證團(tuán)隊(duì)成員了解各自的職責(zé)，此外讓參與這個(gè)項(xiàng)目的人員以及檢查人員能夠從全局了解該工廠所使用的驗(yàn)證方法和所有的驗(yàn)證活動(dòng),。

02

范圍

清潔驗(yàn)證主計(jì)劃包括驗(yàn)證的一般原則，可接受標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算,，分組（矩陣）和最差條件產(chǎn)品評(píng)估等方面的規(guī)定,。

03

職責(zé)規(guī)定

對(duì)驗(yàn)證過程中各部門的職責(zé)進(jìn)行詳細(xì)規(guī)定與描述。

04

產(chǎn)品與設(shè)備分組（矩陣）和最差條件產(chǎn)品評(píng)估

通常情況下一條生產(chǎn)線會(huì)同時(shí)生產(chǎn)多個(gè)品種,，每個(gè)品種由活性成分和輔料組成,，在清潔驗(yàn)證中不必為所有殘留物制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測(cè)，因?yàn)檫@是不切實(shí)際且沒有必要的,。在一定意義上,，清潔的過程是個(gè)溶解的過程，因此通常的做法是從各組分中確定最難清潔的物質(zhì),，作為目標(biāo)化合物即驗(yàn)證對(duì)象,，目標(biāo)化合物一般要考慮其特性，如：

溶解性風(fēng)險(xiǎn)

毒性,、藥理

難于清洗,，如對(duì)設(shè)備表面材質(zhì)有一定附著力

配方中包含難以清洗的油脂、色料或矯味劑的產(chǎn)品（顏色,、香味與味道）

生產(chǎn)量高的品種（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻率高）

清洗過程如果使用清洗劑,，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記物

同一工序使用到的設(shè)備可能會(huì)有很多種，對(duì)于同一類型的設(shè)備,，可以考慮對(duì)其分組并同時(shí)進(jìn)行驗(yàn)證,。對(duì)于設(shè)備分組，以形式和功能為標(biāo)準(zhǔn)定義分組原則,，對(duì)設(shè)計(jì)和功能相似,，大小不同的設(shè)備可以分為一組,。

05

殘留限度的計(jì)算和可接受標(biāo)準(zhǔn)

化學(xué)殘留可接受限度

清潔劑殘留的確定

微生物水平的確定

如何確定殘留物限度是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的問題，企業(yè)應(yīng)當(dāng)根據(jù)其生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品的實(shí)際情況,，制定科學(xué)合理的,，能實(shí)現(xiàn)并能通過適當(dāng)?shù)姆椒z驗(yàn)的限度標(biāo)準(zhǔn)。目前企業(yè)普遍接受的限度標(biāo)準(zhǔn)基于以下原則：以目檢為依據(jù)的限度,；化學(xué)殘留可接受限度,；微生物殘留可接受限度。

1.5.1.以目檢為依據(jù)的限度

目檢要求不得有可見殘留物,，在每次清洗完后都要求進(jìn)行檢查并對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行記錄,，此項(xiàng)檢查應(yīng)該作為清潔驗(yàn)證接受限度的第一個(gè)接受標(biāo)準(zhǔn)。

1.5.2.化學(xué)殘留可接受限度

計(jì)算化學(xué)殘留可接受限度有兩種方法,，生物活性限度（最低日劑量的1/1000）和濃度限度(10ppm),。在考慮可接受殘留限度時(shí)，綜合考慮兩種方法,，選擇最嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)作為清潔驗(yàn)證最終標(biāo)準(zhǔn),。

采用健康基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的可接受標(biāo)準(zhǔn)

在可以獲得可接受日暴露水平（ADE）或允許日暴露量（PDE）值時(shí)，最大允許殘留（MACO）應(yīng)基于ADE計(jì)算,。MACO計(jì)算的原則是基于ADE/PDE值,，計(jì)算允許從上一個(gè)產(chǎn)品帶入下一個(gè)產(chǎn)品中的殘留量。

根據(jù)以下公司計(jì)算ADE值或PDE值,，將結(jié)果用于MACO值的計(jì)算：

ADE=NOAEL×BW/（UFc×MF×PK）

根據(jù)以下公式從ADE值計(jì)算MACO值：

MACO=ADEprevious×MBSnext/TDDnext

ADE----可接受日暴露水平

MACO----允許最大殘留：從上一產(chǎn)品帶入下一產(chǎn)品的最大可接受量

BW----平均成人體重

UFc----組分不確定因子：反映單個(gè)變量之間,、不同品種差異、亞急性折算為急性外推,、最低可見損害作用水平到無可見損害作用水平的推斷,，數(shù)據(jù)完整性等補(bǔ)償因素的綜合系數(shù)

MF----修正因子：用于表達(dá)未被其它因子覆蓋的不確定因素

MBSnext----下一產(chǎn)品的最小批量

TDDnext----下一產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)治療日服用劑量

生物活性的可接受限度：最低日治療劑量的1/1000

根據(jù)藥物的生物學(xué)活性數(shù)據(jù)---最低日治療劑量（MTDD）確定殘留物的限度是制藥企業(yè)普遍采用的的方法。一般取最低日治療劑量1/1000為殘留物限度,，可以認(rèn)為即使存在很大個(gè)體差異,，該殘留量也不會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生藥理反應(yīng)。因此高活性,、敏感性的藥物宜使用本法確定殘留物限度,。

一般表面計(jì)算公式如下：

L1/1000=MTDa/1000×Nb/MDDb×Sb

MTDa----清洗前產(chǎn)品最小日給藥劑量中的活性成分含量

Nb----清洗后產(chǎn)品的批量

MDDb----清洗后產(chǎn)品的最大日給藥劑量的活性成分含量

Sb----清洗后產(chǎn)品活性成分含量的百分比（%，W/W）

濃度限度：十萬分之一（10ppm）

在下一個(gè)產(chǎn)品中的殘留物數(shù)量級(jí)別應(yīng)不超過十萬分之一（10ppm）,，該限度依據(jù)分析方法客觀能達(dá)到的能力而制定的,，從控制微生物污染及熱原污染角度上看，也比較安全,。一般除非是高活性,、高敏感性的藥品，該限度的安全性是足夠的,。

從殘留物濃度限度可以推導(dǎo)出設(shè)備內(nèi)表面的單位面積殘留物濃度（表面殘留物限度）,，假設(shè)殘留物均勻分布在設(shè)備內(nèi)表面上,，在下批生產(chǎn)時(shí)全部溶解在產(chǎn)品中。

設(shè)備下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg),，因殘留物濃度最高為10×10-6即10mg/kg,，則殘留物總量最大為10B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物總量除以測(cè)量的與產(chǎn)品接觸的內(nèi)表面積,，設(shè)設(shè)備總內(nèi)表面積為SA（cm2）,，則表面殘留物限度L=10B/SA(mg/cm2)。為確保安全,，一般應(yīng)除以安全因子F,，則L=10B/(SA×F)( mg/cm2)

計(jì)算接受殘留限度需考慮的要素如下表（計(jì)算接受殘留限度考慮因素）

1.5.3.微生物限度

清洗的微生物驗(yàn)證可以和清洗的化學(xué)驗(yàn)證同步進(jìn)行，微生物的特點(diǎn)是在一定環(huán)境條件下會(huì)迅速繁殖,，數(shù)量急劇增加,。而且空氣中存在的微生物能通過各種途徑污染已清潔的設(shè)備。設(shè)備清洗后存放的時(shí)間越長(zhǎng),，被微生物污染的幾率越大,。因此，企業(yè)應(yīng)綜合考慮其生產(chǎn)實(shí)際情況和需求,，自行制定微生物污染水平控制的限度及清洗后到下次生產(chǎn)的最長(zhǎng)貯存期限,。

1.5.4.殘留溶劑的限度標(biāo)準(zhǔn)

藥品生產(chǎn)和清潔中可能用到除水外的有機(jī)溶劑，ICH在《殘留溶劑指南》中將溶劑分為3個(gè)級(jí)別,。

一類溶劑

因其具有不可接受的毒性或?qū)Νh(huán)境造成公害，第一類溶劑在制藥生產(chǎn)中不應(yīng)該使用,，如必須使用時(shí)按下表對(duì)殘留進(jìn)行控制,，其名稱如下表（第一類溶劑濃度限度）

二類溶劑

由于其毒性在制劑中應(yīng)予限制，并嚴(yán)格限制允許的每日攝入量,，其名稱如下表（第二類溶劑濃度限度）

第三類溶劑

第三類溶劑屬于低毒,，對(duì)人體危害很小，其名稱如下表（第三類溶劑濃度限度）

ICH《殘留溶劑指南》規(guī)定,，一類,、二類溶劑僅在不可替代的情況下用于藥品生產(chǎn)，但不能用作清潔劑,。在無法避免時(shí),，三類溶劑可作為清潔劑，其在下批生產(chǎn)中允許的溶劑殘留濃度不應(yīng)超過初始溶劑濃度的0.5%,。

06

最難清潔部位和取樣點(diǎn)

設(shè)備最難清潔部位一般是根據(jù)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估進(jìn)行確定,，考慮到在線清洗無法覆蓋的區(qū)域及手工清洗中無法拆卸的部件表面，另外對(duì)于設(shè)備中不同組成部分,，使用到的不同材質(zhì),，需要對(duì)其進(jìn)行綜合考慮,，確認(rèn)設(shè)備最難清潔部位。

確定最難清潔部位首先可以作為設(shè)備設(shè)計(jì)時(shí)的參考,，其次能進(jìn)一步確認(rèn)清潔驗(yàn)證中取樣點(diǎn),，但這個(gè)過程僅適用于淋洗法取樣的方式。

07

清潔驗(yàn)證取樣方法確認(rèn)

清潔難清證取樣方法確認(rèn)可以參見下文取樣方法驗(yàn)證,。

08

清潔驗(yàn)證主計(jì)劃其他內(nèi)容還包括不局限于以下內(nèi)容

清潔驗(yàn)證時(shí)間計(jì)劃表

清潔驗(yàn)證日常監(jiān)測(cè)/維護(hù)要求

參考文件

附錄

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清潔驗(yàn)證風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估貫穿于產(chǎn)品整個(gè)生命周期,，同樣適用于清潔驗(yàn)證過程，合理運(yùn)用風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估在清潔驗(yàn)證中能達(dá)到如下目的：

選出清潔驗(yàn)證目標(biāo)產(chǎn)品,，有效的減少清潔驗(yàn)證工作量,，提高清潔驗(yàn)證的適用性；

選出合適的清潔劑,，更加高效且節(jié)省成本的達(dá)到清洗目的,；

選出合適的檢測(cè)方法，如專屬性與非專屬性的方法分別適用于不同的工藝與設(shè)備,；

選出取樣點(diǎn)位置并選擇合理的取樣方法,，從而更高效的開展清潔驗(yàn)證。

清潔和清潔驗(yàn)證可以從相關(guān)的工藝系統(tǒng)知識(shí),，污染物和設(shè)備清潔輔助系統(tǒng)中進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,、確認(rèn)。這些系統(tǒng)要進(jìn)行設(shè)計(jì)審核,，然后根據(jù)相關(guān)的可接受標(biāo)準(zhǔn)確認(rèn),，證明已經(jīng)達(dá)到系統(tǒng)的相關(guān)要求。在清潔驗(yàn)證執(zhí)行的過程中,，有很多影響清潔驗(yàn)證不成功的因素,，每個(gè)因素都存在著不同的潛在的風(fēng)險(xiǎn)，必須對(duì)每個(gè)因素進(jìn)行充分的分析,、評(píng)估,，確保清潔驗(yàn)證順利地進(jìn)行，下圖用魚骨圖分析確認(rèn)所有的影響因素,。

圖3風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估魚骨圖

1.環(huán)境

環(huán)境因素對(duì)清潔驗(yàn)證的影響至關(guān)重要,，一個(gè)良好的環(huán)境能夠保證清潔驗(yàn)證順利的進(jìn)行。環(huán)境因素嚴(yán)重影響著清潔驗(yàn)證過程中的微生物殘留項(xiàng)目,，不同級(jí)別的環(huán)境有不同的微生物和塵埃粒子要求,，在進(jìn)行清潔驗(yàn)證之前，必須確保HVAC的性能確認(rèn)已完成,，環(huán)境的溫濕度已經(jīng)符合要求,。特別是對(duì)清潔后的設(shè)備的儲(chǔ)存條件，清潔后的設(shè)備必須儲(chǔ)存在干燥的環(huán)境中，需要進(jìn)行干凈設(shè)備保留時(shí)間和臟設(shè)備保留時(shí)間的驗(yàn)證,，而這兩個(gè)時(shí)間驗(yàn)證主要是針對(duì)微生物殘留限度,，因?yàn)榄h(huán)境因素如不能被有效控制，必定導(dǎo)致清潔驗(yàn)證失敗,。

2.方法

清潔驗(yàn)證執(zhí)行之前,，必須完成與清潔驗(yàn)證相關(guān)的分析方法和取樣方法驗(yàn)證以及所有相關(guān)設(shè)備的清潔SOP。在設(shè)備清潔SOP中必須清楚的描述T.A.C.T（Temperature, Action,Concentration,Time）參數(shù),，確保清潔規(guī)程的可操作性,。

3.人員

對(duì)于參與的清潔驗(yàn)證的相關(guān)人員，特別是與清潔驗(yàn)證相關(guān)設(shè)備清潔的操作人員,，必須對(duì)相關(guān)的清洗規(guī)程進(jìn)行嚴(yán)格的培訓(xùn),，保證設(shè)備清洗的一致性，必要時(shí)在清潔驗(yàn)證過程中可以采用不同的班組人員對(duì)設(shè)備進(jìn)行清洗,，從而證明清潔SOP的耐用性,。執(zhí)行清潔驗(yàn)證的人員必須全部通過清潔驗(yàn)證方案的培訓(xùn)，在執(zhí)行過程中,，盡量選用有經(jīng)驗(yàn)的人員,，尤其是取樣操作人員，必須通過回收率實(shí)驗(yàn)的培訓(xùn),，否則不能進(jìn)行取樣操作,。

4.材料

為了使設(shè)備的清洗達(dá)到一定的潔凈度，設(shè)備的清洗必須嚴(yán)格選用清潔劑和清潔工具,，清潔劑必須采用成分單一和制藥行業(yè)允許的清潔劑,，而且在清潔驗(yàn)證執(zhí)行的過程中要測(cè)定清潔劑殘留，清潔工具一定要選擇沒有任何脫落物質(zhì)的清潔工具,，重要的清潔工具的變更可能導(dǎo)致清潔程序重新驗(yàn)證,。設(shè)備清洗所采用水的質(zhì)量對(duì)于最終可接受標(biāo)準(zhǔn)的制定有著很大的影響，不同的水質(zhì)清潔代表著不同的潔凈要求,，比如注射用水一般都是無菌制藥廠房中進(jìn)行，而純化水對(duì)設(shè)備的清潔一般都在非無菌制藥廠房中進(jìn)行,，所以最終清潔用水的質(zhì)量好壞決定著清潔驗(yàn)證微生物限度制訂原則,。

藥品生產(chǎn)過程中，每個(gè)公司的每個(gè)車間都會(huì)有很多品種和劑型藥品,，由于在清潔驗(yàn)證過程中,，要耗費(fèi)大量的人力和物力，我們不可能針對(duì)每個(gè)品種都要單獨(dú)的進(jìn)行清潔驗(yàn)證,，為了降低成本和將復(fù)雜的清潔驗(yàn)證簡(jiǎn)單化,，我們需要對(duì)車間所有的品種和劑型進(jìn)行分組分類，從中選擇最差條件的產(chǎn)品進(jìn)行清潔驗(yàn)證。

5.測(cè)量

清潔驗(yàn)證過程中涉及的所有的設(shè)備的儀器儀表必須進(jìn)行校準(zhǔn),，確保獲得數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,。考慮不同人員操作的差異性,，取樣操作應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)并能嚴(yán)格遵守規(guī)程的人員進(jìn)行,，同時(shí)為保證樣品具有較好的重現(xiàn)性，取樣操作應(yīng)由完成回收率實(shí)驗(yàn)的人員進(jìn)行操作,。棉簽使用前用取樣溶劑預(yù)先清洗,，以防止纖維殘留在取樣位置表面。不同材質(zhì)的回收率實(shí)驗(yàn)在此方案進(jìn)行前必須完成,，應(yīng)由同一人至少進(jìn)行3次操作,，應(yīng)大于或等于50%，三次結(jié)果的RSD應(yīng)不大于20%,，為確保產(chǎn)品的安全性,，在計(jì)算殘留量時(shí)應(yīng)以最低的回收值代入，即算得最大可能殘留量,。對(duì)于不同材質(zhì)的回收率結(jié)果進(jìn)行對(duì)比,，為最大程度地降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，采取回收率最低的材質(zhì)作為最終回收率,。

6.設(shè)備

制藥生產(chǎn)中每個(gè)公司有不同的劑型,，每個(gè)劑型使用的設(shè)備也各不相同，又存在著不同的產(chǎn)品,，在清潔驗(yàn)證的執(zhí)行過程中,，不可能對(duì)每個(gè)產(chǎn)品的設(shè)備鏈進(jìn)行驗(yàn)證，如果一個(gè)公司某劑型的產(chǎn)品非常多,，那么清潔驗(yàn)證周期會(huì)很長(zhǎng),，浪費(fèi)大量的人力和物力資源。所以我們會(huì)根據(jù)產(chǎn)品使用的設(shè)備鏈和產(chǎn)品的相似性對(duì)設(shè)備鏈進(jìn)行分組驗(yàn)證,，對(duì)于同一類別的設(shè)備鏈,，只需要選擇最差條件設(shè)備鏈驗(yàn)證，只要最差條件設(shè)備鏈通過驗(yàn)證,，那么其余的設(shè)備鏈也就不需要進(jìn)行驗(yàn)證了,，大大減輕了清潔驗(yàn)證的負(fù)擔(dān)。

制藥生產(chǎn)過程中,，由于設(shè)備的種類非常多,，每個(gè)設(shè)備都有不同的幾何形狀，所以設(shè)備取樣點(diǎn)的選擇是非常重要的,，所選擇的取樣點(diǎn)必須有很強(qiáng)的代表性,，最終取樣點(diǎn)結(jié)果的合格證明該設(shè)備的清洗程序是適用的,。

因?yàn)樵谇鍧嶒?yàn)證過程中主要的目的是證明上批產(chǎn)品的活性成分對(duì)下批產(chǎn)品沒有造成污染，所以對(duì)于有些沒有接觸到活性成分的設(shè)備,，我們可以適當(dāng)?shù)刂贫ㄆ錅y(cè)試項(xiàng)目,，并不是所有的測(cè)試項(xiàng)目都是一成不變的

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清潔驗(yàn)證分析方法驗(yàn)證

清潔驗(yàn)證相關(guān)的分析方法一般包括分析方法驗(yàn)證與取樣方法驗(yàn)證，清潔驗(yàn)證中選擇一個(gè)合適的分析方法是非常必要的,，適當(dāng)?shù)姆治龇椒☉?yīng)能夠充分檢測(cè)相關(guān)殘留物,。可以從分析結(jié)果中得出什么結(jié)論也很重要（例如檢測(cè)的是產(chǎn)品還是清潔劑,，結(jié)果是否合格）,，檢測(cè)結(jié)果決定了清潔方法是否可行或需要進(jìn)一步改進(jìn)。本章討論的內(nèi)容是怎樣選擇一個(gè)合適的測(cè)試方法,，包括適用性和化學(xué)與微生物測(cè)試方法的信息,，以及測(cè)試方法的驗(yàn)證。

分析方法驗(yàn)證

1.專屬性

專屬性是指其他物質(zhì)存在干擾的情況下,，被分析物能準(zhǔn)確可靠檢測(cè)的能力,。對(duì)于清潔驗(yàn)證來說，干擾物包括降解物,、輔料,、取樣溶劑、取樣棉簽,、清潔劑等干擾,。

2.準(zhǔn)確度

準(zhǔn)確度也稱為真實(shí)度，指真實(shí)值或認(rèn)可的參考值與測(cè)量值之間的相近程度,，一般用回收率表示,，綜合回收率要求不低于75%，回收率的RSD要求不大于10%,，將測(cè)定的回收率中最低值作為校正因子f,，樣品的測(cè)定結(jié)果除以校正因子表示樣品的實(shí)際量。

3.精密度

指在規(guī)定條件下對(duì)均質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)結(jié)果的接近程度,，精密度可從三個(gè)層次考查：重復(fù)性,、中間精密度、重現(xiàn)性,，精密度考察應(yīng)使用均質(zhì)的,、可信的樣品，如果得不到,，可人為配制樣品溶液進(jìn)行研究。

4.線性

分析方法的線性是指在給定的范圍內(nèi),，檢測(cè)結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（量）成比例關(guān)系的能力,。范圍指能達(dá)到一定的準(zhǔn)確度、精密度和線性，測(cè)試方法適用的試樣中被測(cè)物的高,、低限濃度或量,。

5.范圍

分析方法的范圍是指樣品中被分析物的較高濃度和較低濃度的一個(gè)區(qū)間，并已證實(shí)在此區(qū)間內(nèi),，該方法具有合適的準(zhǔn)確性,、精密度和線性。濃度范圍應(yīng)達(dá)到殘留物限度的50%~150%,。

6.檢測(cè)限與定量限

檢測(cè)限是指樣品中的被分析物能被檢測(cè)到的最低量,，定量限是指能定量檢測(cè)樣品中被分析物的最低量。檢測(cè)限和定量限可采用直觀評(píng)價(jià)和信噪比的方法,，或者采用響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率的方法進(jìn)行驗(yàn)證,。

7.耐用性

耐用性是指試驗(yàn)參數(shù)適當(dāng)?shù)陌l(fā)生細(xì)小改變時(shí)，測(cè)量保持不受影響的能力,，可用于說明正常使用時(shí)的可靠性,。

耐用性測(cè)試是在改變其分析參數(shù)的條件下，分析方法的適用性,，以HPLC方法為例典型變化的參數(shù)如下：流動(dòng)相PH值變化,、流動(dòng)相組分變化、柱溫和流速變化

8.溶液穩(wěn)定性

樣品在分析前放置于一定的儲(chǔ)存條件下,，可能會(huì)發(fā)生降解和變化,，在這些情況下，需要考察被分析物的穩(wěn)定性,。使用同一份溶液,，測(cè)定其預(yù)先選定的時(shí)間間隔里結(jié)果的差異，以此分析樣品的穩(wěn)定性,。

9.系統(tǒng)適用性

定量檢測(cè)時(shí)應(yīng)制備2份對(duì)照品,，對(duì)照品一致性檢查不大于5%，對(duì)照品的RSD不超過10%,。

表1檢驗(yàn)方法中限度檢查和定量檢查需驗(yàn)證的參數(shù)

取樣回收率研究

取樣回收率研究通常需要證明采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒ê腿映绦?，可充分測(cè)量或量化設(shè)備表面的殘留物。這些研究為殘留物測(cè)量的取樣以及分析方法建立提供了科學(xué)依據(jù),。它的目的是建立一個(gè)可重現(xiàn)的設(shè)備表面回收率,。以下探討三種類型的取樣回收率：擦拭取樣回收率，淋洗取樣回收率以及“目檢”回收率,。對(duì)于擦拭以及淋洗取樣而言,，回收率研究可以作為分析方法驗(yàn)證的一部分，或者一旦確定分析方法能夠檢測(cè)溶液中殘留物,，可單獨(dú)進(jìn)行研究,。取樣回收率研究是實(shí)驗(yàn)室研究,，需要不同被取樣設(shè)備材質(zhì)（如不銹鋼、玻璃,、PTFE以及EPDM）試樣,，并在上面涂布待檢測(cè)殘留物。

1.擦拭法回收率

擦拭回收率研究中,，將已知濃度的殘留物溶液均勻涂布在材質(zhì)試樣上,，自然晾干，采用一定的擦拭方法進(jìn)行取樣,，選用合適的溶劑提取棉簽上的殘留,，然后檢測(cè)提取液中殘留物的數(shù)量?；厥樟颗c材質(zhì)試樣上的加入量之比就是取樣百分回收率,。由于擦拭屬于人工操作，通常每人需要重復(fù)三次回收率研究,。每個(gè)殘留物和表面類型的組合至少需要兩個(gè)人進(jìn)行擦拭回收率研究,。研究建立的回收率可以通過不同的方式定義，但通常定義為任意一個(gè)擦拭取樣人員的最低平均回收率,。一個(gè)可接受的拭子回收率取決于如何進(jìn)行拭子回收率試驗(yàn),。如果在回收率研究確認(rèn)取樣方法時(shí)，沒有對(duì)殘留限度或分析結(jié)果進(jìn)行修正,，回收率通常要求70%或更高,。如果回收率用于修正殘留物限度或分析結(jié)果，回收率一般要達(dá)到50%或以上,。

2.淋洗法回收率

淋洗法回收率研究同擦拭回收率相似,，將目標(biāo)殘留物溶液涂布在材質(zhì)試樣上自然晾干。對(duì)于擦拭取樣的回收率,，必須嚴(yán)格執(zhí)行預(yù)定擦拭步驟,。與之相反對(duì)于淋洗取樣，無法在實(shí)驗(yàn)室中準(zhǔn)確地重復(fù)淋洗步驟（除了提取取樣的特殊情況）,。然而在實(shí)驗(yàn)室中模擬淋洗程序是可行的,。在可能的情況下，模擬淋洗的條件應(yīng)該同實(shí)際的設(shè)備淋洗條件相同,，包括淋洗溶劑以及淋洗溶劑溫度的選擇,。其他情況下，應(yīng)該選擇與設(shè)備淋洗相同或最差的淋洗條件,，例如回收率研究中溶劑量與被取樣表面積之比應(yīng)該同設(shè)備淋洗時(shí)相同或更低,。

3.目檢回收率

這個(gè)過程實(shí)際上是確定一個(gè)定量的“目視檢測(cè)限”，如果目檢只是作為擦拭或沖洗取樣的補(bǔ)充,，則可以但不要求確定“目視檢測(cè)限”,。指定觀察條件下的目視檢測(cè)限可以通過在設(shè)備材質(zhì)試樣上涂布不同濃度（μg/cm2）的殘留物來確定,。并需要一組訓(xùn)練有素的觀察者來確定表面殘留物明顯可見時(shí)的最低殘留水平。目視檢測(cè)限的意義在于,，如果在清潔驗(yàn)證方案中，在同樣（或更嚴(yán)格）的觀察條件下確定設(shè)備表面已目檢潔凈,，則可認(rèn)為實(shí)際殘留水平低于目視檢測(cè)限,。適當(dāng)?shù)挠^察條件包括距離，光照以及觀察角度,。目視檢測(cè)限取決于殘留物性質(zhì),，表面性質(zhì)（例如，不銹鋼對(duì)PTFE）以及觀察者的視力,。文獻(xiàn)報(bào)道的典型的目視檢測(cè)限是1-4μg/cm2,。對(duì)于目視檢測(cè)限，不需要確定回收率,。該研究的目的是確定殘留物明顯可見時(shí)的一個(gè)殘留物水平,，這樣目視潔凈的任何表面上殘留水平都低于目視檢測(cè)限。

4.生物負(fù)載及內(nèi)毒素取樣回收率

對(duì)于微生物取樣,，不適合進(jìn)行回收率研究以確定表面回收率,，原因之一是微生物檢測(cè)的計(jì)數(shù)問題通常以“菌落形成單位”進(jìn)行計(jì)數(shù)而不是單個(gè)微生物。第二個(gè)原因是在一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的取樣回收率研究中,，當(dāng)材質(zhì)試樣晾干時(shí)微生物會(huì)死亡或失去生存能力,。第三個(gè)原因是不清楚選用哪種微生物進(jìn)行回收率研究。第四個(gè)原因是通常生物負(fù)載限度已明顯低于可能影響產(chǎn)品質(zhì)量或工藝性能（如在線滅菌）的水平,，因此即使回收率低（

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清潔驗(yàn)證方案及驗(yàn)證狀態(tài)維護(hù)

清潔驗(yàn)證方案

參照物質(zhì)或最難清潔物質(zhì),、最難清潔部位和取樣部位，如何制訂驗(yàn)證的合格標(biāo)準(zhǔn)即最大允許殘留清潔驗(yàn)證方案必須符合一般驗(yàn)證方案的共性要求,。驗(yàn)證方案中最關(guān)鍵技術(shù)問題為如何確定限度,，用什么手段能準(zhǔn)確地定量殘留量，這包括取樣方法和檢測(cè)方法的開發(fā)和驗(yàn)證,。

1

參照物質(zhì)與最難清潔物質(zhì)

一般藥品都由活性成分和輔料組成,。對(duì)于復(fù)方制劑，含有多個(gè)活性成分,。所有這些物質(zhì)的殘留物都是必須除去的,。在清潔驗(yàn)證中是否需要為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)一一檢測(cè)呢？這是不切實(shí)際且沒有必要的,。在一定的意義上,，清潔的過程是個(gè)溶解的過程，因此通常的做法是從各組分中確定最難清潔（溶解）的物質(zhì),，以此作為參照物質(zhì),。通常相對(duì)于輔料,，人們更關(guān)注活性成分的殘留，因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量,、療效和安全性,。因此活性成分的殘留限度必須作為驗(yàn)證合格的標(biāo)準(zhǔn)之一。如當(dāng)存在兩個(gè)以上的活性成分時(shí),，其中最難溶解的成分即可作為最難清潔物質(zhì)論處,。以復(fù)方18氨基酸注射液為例，它有18種氨基酸,，均為活性成分,。其中最難溶解的為胱氨酸，僅微溶于熱水,，因此可將其作為最難清潔物質(zhì),。這樣一來，清潔驗(yàn)證就找到了殘留的“參照物”而不用考慮其他易溶解組分,。

2

最難清潔部位和取樣點(diǎn)

取樣點(diǎn)應(yīng)包括各類最難清潔的部位,，及各種材質(zhì)的全面考慮。

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清潔驗(yàn)證方案

清潔驗(yàn)證方案可用多種格式,，其共同要求要素包括如下內(nèi)容：

目的明確待驗(yàn)證的設(shè)備和清潔方法,。

清潔規(guī)程待驗(yàn)證的清潔方法的SOP即清潔規(guī)程應(yīng)當(dāng)在驗(yàn)證開始前確定下來，在驗(yàn)證方案中列出清潔規(guī)程以表明清潔規(guī)程已經(jīng)制定,。

驗(yàn)證人員列出參加驗(yàn)證人員的名單,，說明參加者所屬的部門和各自的職責(zé)，對(duì)相關(guān)操作人員的培訓(xùn)要求,。

確定參照物和限度標(biāo)準(zhǔn)在本部分應(yīng)詳細(xì)闡述確定參照物的依據(jù),，確定限度標(biāo)準(zhǔn)的計(jì)算過程和結(jié)果。一般可將相關(guān)設(shè)備列表,，計(jì)算總表面積,，特殊表面面積；將相關(guān)產(chǎn)品列表,，列入主要活性成分及其相關(guān)物理化學(xué)性質(zhì),，MTDD值等，確定參照物質(zhì),，計(jì)算限度標(biāo)準(zhǔn),。

檢驗(yàn)方法學(xué)本部分應(yīng)說明取樣方法、工具,、溶劑,，主要檢驗(yàn)儀器，取樣方法和檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證情況等。

取樣要求用示意圖,、文字等指明取樣點(diǎn)的具體位置和取樣計(jì)劃,，明確規(guī)定何時(shí)、何地,、取多少樣品,，如何給各樣品標(biāo)記。這部分的內(nèi)容對(duì)方案的實(shí)施和保證驗(yàn)證結(jié)果的客觀性是至關(guān)重要的,。

可靠性判斷標(biāo)準(zhǔn)在本部分應(yīng)規(guī)定為證明待驗(yàn)證清潔規(guī)程的可靠性,，驗(yàn)證試驗(yàn)須重復(fù)的次數(shù)，一般至少連續(xù)3次試驗(yàn),，所有數(shù)據(jù)都符合限度標(biāo)準(zhǔn)方可。

清潔驗(yàn)證狀態(tài)的維護(hù)

1

日常監(jiān)控

清潔驗(yàn)證完成后該清潔方法即生效,，清潔方法即進(jìn)入維護(hù)與再驗(yàn)證階段,，企業(yè)應(yīng)當(dāng)對(duì)清潔驗(yàn)證狀態(tài)進(jìn)行持續(xù)維護(hù)，保證清潔方法持續(xù)可靠,。

在日常生產(chǎn)過程中對(duì)清潔方法進(jìn)行監(jiān)控的目的是進(jìn)一步考察清潔程序的可靠性,，對(duì)于手工清洗過程來說，監(jiān)控尤其重要,，因?yàn)槠渲噩F(xiàn)性很在程度上取決于人員的培訓(xùn)和操作人員的實(shí)際操作技能,。

監(jiān)控辦法為在日常清潔時(shí)，定期進(jìn)行抽樣檢測(cè),，確認(rèn)清潔過程的有效性與操作的重現(xiàn)性,。通過日常監(jiān)控?cái)?shù)據(jù)的回顧，以確定再驗(yàn)證的周期,。

2

變更管理

當(dāng)已經(jīng)驗(yàn)證的設(shè)備,、清潔程序有任何變更以及產(chǎn)品處方、增加新產(chǎn)品等可能導(dǎo)致清潔規(guī)程或設(shè)備的變更,，應(yīng)組織相關(guān)人員對(duì)變更情況進(jìn)行評(píng)估,，確定是否需要進(jìn)行再驗(yàn)證，當(dāng)發(fā)生下列情形之一時(shí),，須對(duì)清潔程序進(jìn)行再驗(yàn)證,。

清潔程序變化時(shí)

清潔劑變化時(shí)

設(shè)備有重大變更時(shí)

增加相對(duì)更難清洗的產(chǎn)品時(shí)

3

清潔方法的優(yōu)化

在實(shí)際生產(chǎn)中，一臺(tái)（組）設(shè)備用于多種產(chǎn)品的生產(chǎn)是非常普遍的現(xiàn)象,。有時(shí)各種產(chǎn)品的物理,、化學(xué)性質(zhì)有很大差異。這就給清潔規(guī)程制定者提出這樣的問題：是否要為每個(gè)產(chǎn)品分別制定清潔規(guī)程呢,？經(jīng)驗(yàn)告訴我們,，為一臺(tái)（組）設(shè)備制定多個(gè)清潔規(guī)程并不可取：這不但由于為每個(gè)規(guī)程進(jìn)行難清潔驗(yàn)證的工作量過于龐大,，更主要的是對(duì)操作者來說要在多個(gè)規(guī)程中選擇適當(dāng)?shù)那鍧嵎椒ê苋菀自斐刹铄e(cuò),。比較可行的方法是在所有涉及的產(chǎn)品中,，選擇最難清潔的產(chǎn)品為對(duì)照產(chǎn)品，以所有產(chǎn)品/原料中允許殘留量最低的限度為標(biāo)準(zhǔn)（最差條件）,，優(yōu)化設(shè)計(jì)足以清除該產(chǎn)品/原料以達(dá)到殘留量限度的清潔程序,。驗(yàn)證就以該程序?yàn)閷?duì)象，只要證明其能達(dá)到預(yù)定的要求,，則該程序能適用于所有產(chǎn)品的清潔,。當(dāng)然，從環(huán)保和節(jié)約費(fèi)用的角度考慮,，如果實(shí)踐證明該清潔程序?qū)Υ蠖鄶?shù)產(chǎn)品而言過于浪費(fèi),，也可再選擇一個(gè)產(chǎn)品進(jìn)行上述規(guī)程制定和驗(yàn)證工作。這是在規(guī)程中必須非常明確地規(guī)定該方法適用于哪些產(chǎn)品,，還須明確為防止選擇時(shí)發(fā)生錯(cuò)誤需要采取的必要的措施,。

參照產(chǎn)品的選擇原則如下：

將所有產(chǎn)品列表。

確定產(chǎn)品的若干物理,、化學(xué)性質(zhì)為評(píng)價(jià)項(xiàng)目：如主要活性成分的溶解度,，黏度，吸附性等,，其中最主要的性質(zhì)為溶解度,。

對(duì)每個(gè)產(chǎn)品的評(píng)價(jià)項(xiàng)目打分。如將溶解度分為1/2/3/4級(jí),，依次表示難溶/微溶/可溶/易溶,。

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)和產(chǎn)品性質(zhì)，擬定適當(dāng)?shù)那鍧崉┓N類,。

計(jì)算各產(chǎn)品的最大允許殘留限度,。

將表格按照溶解度由小到大排序，選擇溶解度最小的產(chǎn)品作為參照產(chǎn)品,。

如果表格中使用的清潔劑可分為水/水溶性清潔劑（包括酸,、堿溶液）和有機(jī)溶劑兩類，應(yīng)分別選擇一種參照代表產(chǎn)品,。

將表中允許殘留限度最小的數(shù)值確定為驗(yàn)證方案的允許殘留物限度標(biāo)準(zhǔn),。

將與參照產(chǎn)品對(duì)應(yīng)的清潔劑確定為清潔方法使用的清潔劑。

某設(shè)備生產(chǎn)產(chǎn)品統(tǒng)計(jì)表（已按溶解性排序）

從表中可見,，產(chǎn)品丙,、丁、乙,、戊,，可用水溶性清潔劑清潔，應(yīng)選最難溶的產(chǎn)品丙為參照產(chǎn)品，清潔劑1%NaOH熱水溶液,，允許殘留限度定為1.5μg/cm2,。產(chǎn)品甲、己用乙醇為清潔劑,，可另算一類,，應(yīng)選擇產(chǎn)品甲為代表產(chǎn)品，清潔劑為95%乙醇,，允許殘留限度定為2.5μg/cm2,。

根據(jù)設(shè)備的情況、已確定的清潔劑和殘留限度,，設(shè)計(jì)清洗方法,。在生產(chǎn)后依法清洗并驗(yàn)證。

清潔驗(yàn)證試驗(yàn)至少進(jìn)行3次,，每批生產(chǎn)后按清潔規(guī)程清潔,，按驗(yàn)證方案檢查清潔效果，取樣并檢驗(yàn),。重復(fù)上述過程3次，3次試驗(yàn)的結(jié)果均應(yīng)符合預(yù)定標(biāo)準(zhǔn),。如果出現(xiàn)個(gè)別化驗(yàn)結(jié)果超標(biāo)的情況,，必須詳細(xì)調(diào)查原因。如果有證據(jù)表明結(jié)果超標(biāo)是因?yàn)槿?、化?yàn)失誤等原因造成,，可將此數(shù)據(jù)從統(tǒng)計(jì)刪除。否則應(yīng)判驗(yàn)證失敗,。不得采用重新取樣再化驗(yàn)直至合格（Testing until clean）的做法,。驗(yàn)證失敗意味著清潔規(guī)程存在缺陷，應(yīng)當(dāng)根據(jù)化驗(yàn)結(jié)果提供的線索修改清潔規(guī)程,，隨后開展新一輪的驗(yàn)證,。