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匯總丨HIV診斷標(biāo)志物

 生物_醫(yī)藥_科研 2019-07-10

來源:石頭道科普


檢測HIV對于篩查,,確認(rèn)和監(jiān)測感染至關(guān)重要。有不同類型的診斷工具可用于檢測HIV特異性抗體,,病毒抗原或核酸,。檢測HIV特異性IgG和IgM抗體的第三代酶免疫檢測,檢測抗HIV抗體和HIV p24抗原的第四代酶免疫檢測以及基于核酸的HIV RNA檢測是目前最常用的診斷方法,;對于HIV感染患者,,HIV 病毒載量檢測和CD4+細(xì)胞計數(shù)等是最常用的監(jiān)控方法;HIV基因分型檢測用于檢測 HIV 基因組突變,,其對研究和改善HIV病毒的藥物抗性非常有用,;干血斑測試對于幼兒和偏遠(yuǎn)地區(qū)HIV感染疫情的掌握有著獨特的優(yōu)勢;一些常用的免疫因子,,感染指標(biāo),,血栓標(biāo)志物對于HIV感染后期患者監(jiān)控具有一定指導(dǎo)意義。生物標(biāo)志物的發(fā)展的利用對于病情的篩查,、診斷,、監(jiān)控和治療具有指明燈似的作用,對于控制HIV感染和AIDS的治療起到了關(guān)鍵性作用,。

目前常用的HIV感染指標(biāo)

1                    

血清學(xué)檢測 

HIV-1/2抗體

應(yīng)用:HIV感染篩選和HIV感染確認(rèn),。

篩選測試方法:酶聯(lián)免疫吸附測試、化學(xué)發(fā)光,、免疫熒光,、免疫層析試紙條、免疫滲濾法等測試方法,。

確認(rèn)測試方法:免疫印跡,、條帶/線性免疫實驗(RIBA/LIA)、間接免疫熒光(IFA)和快速確認(rèn)等方法,。

HIV-1/2抗體是應(yīng)用最多,,且效果最好的感染篩選指標(biāo)。相比于HIV抗原p24,,盡管其窗口期更長,,但不存在后期衰減。相比于HIV RNA,,其成本更低,,方法更多,,更適合普及HIV感染篩選。

HIV抗原p24

應(yīng)用:HIV感染篩選

測試方法:酶聯(lián)免疫吸附測試,、化學(xué)發(fā)光,、免疫熒光、免疫層析試紙條,、免疫滲濾法等測試方法,。

HIV抗原p24無法單獨應(yīng)用于HIV感染篩選,但可結(jié)合HIV-1/2抗體進(jìn)行早期感染篩選,。其窗口期更短,,是目前四代HIV試紙條的基礎(chǔ)。

2                    

病毒學(xué)檢測 

HIV病毒分離

應(yīng)用:HIV感染確認(rèn),。

測試方法:外周血單核細(xì)胞(PBMC)共培養(yǎng)法,。

陽性判定:培養(yǎng)上清液p24抗原或逆轉(zhuǎn)錄酶連續(xù)2次呈現(xiàn)陽性反應(yīng)、并有p24抗原含量/逆轉(zhuǎn)錄酶活性升高,,或同時出現(xiàn)HIV特異性細(xì)胞病變,,并經(jīng)鑒定為HIV基因序列,判為HIV-1分離陽性,。

HIV病毒分離陽性是最直接的HIV感染確認(rèn)方法,。但該法檢測技術(shù)要求較高,較難普及,。同時分離陰性并不能排除HIV感染,。

HIV核酸檢測

應(yīng)用:HIV感染篩查、HIV感染確認(rèn),、嬰兒HIV感染篩查,、抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療監(jiān)控等。

HIV定性檢測:實時定量PCR,。

HIV定量檢測:靶核酸擴(kuò)增和信號放大,。

定量結(jié)果判定:新行標(biāo)規(guī)定,當(dāng)檢測值>5000 cps/mL報告陽性檢測值,;檢測值<5000cps/mL,,需要再次采樣檢測,以確認(rèn)檢測值,。最終結(jié)果需要結(jié)合臨床及流行病史、CD4+淋巴細(xì)胞檢測或者HIV-1抗體檢測結(jié)果進(jìn)行綜合判斷,。

HIV核酸檢測的窗口期更短,,且是抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療效果監(jiān)控推薦的指標(biāo)之一。盡管行標(biāo)把核酸診斷納入全民篩查方法,,但較HIV-1/2抗體和HIV抗原p24,,核酸檢測技術(shù)難度和成本都也更高,。HIV核酸檢測是嬰兒HIV感染最好的篩查指標(biāo)。

3                    

細(xì)胞免疫學(xué)檢測 

CD4+淋巴細(xì)胞檢測

應(yīng)用:HIV感染檢測,、AIDS分期,、抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療監(jiān)控等。

CD4+淋巴細(xì)胞計數(shù):用于成人及5歲以上兒童和青少年,。當(dāng)計數(shù)結(jié)果≥500/mm3,,則無缺陷。350-499/mm3,,輕度缺陷,。200-349/mm3,中度缺陷,。<200/mm3,,重度免疫缺陷。

CD4+淋巴細(xì)胞百分比:用于5歲以下兒童,。具體判定標(biāo)準(zhǔn)如下,。

檢測技術(shù):流式細(xì)胞儀或顯微鏡手動計數(shù)。

CD4+淋巴細(xì)胞檢測是HIV感染和AIDS分期的判定標(biāo)準(zhǔn),。無法單獨作為篩查的診斷標(biāo)志物,。

匯總表格如下

     其它標(biāo)志物:

應(yīng)用于HIV感染監(jiān)控

1                    

基因分型檢測 

研究該技術(shù)的企業(yè)有雅培和西門子?;蚍中拖到y(tǒng)適用于檢測 HIV 基因組突變(這些突變賦予其對特定類型抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物的抗性),,從而作為監(jiān)測和治療 HIV 感染的輔助手段。本質(zhì)上這是一個技術(shù)集成系統(tǒng),,包括樣品準(zhǔn)備系統(tǒng),,反轉(zhuǎn)錄PCR系統(tǒng),測序系統(tǒng),,毛細(xì)管電泳系統(tǒng)和報告系統(tǒng),。

2                    

干血斑測試 

干血斑(Dry Blood Spots, DBS)目前用在新生兒HIV早期感染診斷與偏遠(yuǎn)落后地區(qū)HIV流行的監(jiān)控。由于采血量少(50-80μL),,采集制備成本低,,制作簡單,適合運輸?shù)忍攸c,,該方法在一些特殊場合有他的應(yīng)用價值,。

3                    

免疫類標(biāo)志物 

這些免疫因子盡管不屬于HIV感染的特異性標(biāo)志物,但可溶性白細(xì)胞介素-2受體,,白細(xì)胞介素-6,,血清IgA和血清細(xì)胞因子等的升高意味著HIV感染者的患病率會升高。

4                    

其它標(biāo)志物 

HIV感染后期與慢性炎癥相關(guān)的許多生物標(biāo)志物也會升高,這些疾病包括心血管疾病,,多種形式的癌癥,,肝病,腎病,,神經(jīng)認(rèn)知衰退和骨質(zhì)疏松癥等,。白細(xì)胞介素-6,C-反應(yīng)蛋白,,D-二聚體這些都會在這個過程中出現(xiàn)異常,。白細(xì)胞介素-6是一種細(xì)胞因子,目前也用作感染的生物標(biāo)志物,。C-反應(yīng)蛋白是目前最常用的感染生物標(biāo)志物之一,。D-二聚體的升高證明了凝血酶正在生成,是血栓診斷常用的生物標(biāo)志物,。目前大量的研究證明,,HIV感染會增加靜脈血栓形成的風(fēng)險。

結(jié)語

HIV相關(guān)的推送基本到此結(jié)束了,??偨Y(jié)起來介紹了HIV及HIV感染的情況HIV檢測國內(nèi)企業(yè)技術(shù)分析和試劑盒批準(zhǔn)情況,,HIV檢測國外企業(yè)技術(shù)分析和試劑盒批準(zhǔn)情況,,微流控HIV檢測Alere與Cepheid HIV檢測芯片設(shè)計和原理對比以及HIV診斷標(biāo)志物,。具體可在歷史消息中查看,。在這個過程中,認(rèn)識了很多新的朋友,,也學(xué)習(xí)了很多新知識,。非常感謝您們的支持和意見。接下來一段時間,,我將圍繞著HBV和HCV的相關(guān)內(nèi)容推送一系列文章,,希望在檢索和整理的過程中,能有所新發(fā)現(xiàn),。


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