標(biāo)本溶血是臨床生化檢驗(yàn)最常見的一種干擾和影響因素,。標(biāo)本溶血后導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,,不能客觀真實(shí)地反映患者當(dāng)時(shí)的身體狀況,臨床醫(yī)生不能正確地做出判斷,、指導(dǎo)臨床診斷治療,。本文的目的在于探討溶血對(duì)常規(guī)生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的影響及預(yù)防對(duì)策,。 溶血已成為分析前誤差的常見因素。哪些原因會(huì)導(dǎo)致樣本溶血呢,? 溶血可以分為體內(nèi)溶血和體外溶血,。而血管內(nèi)溶血的原因很復(fù)雜,與許多疾病相關(guān),。體外溶血原因也很多,,在抽血、標(biāo)本運(yùn)送,、儲(chǔ)存等過程中均有可能發(fā)生,。結(jié)合我們?nèi)粘9ぷ鞣治鲈斐扇苎目赡茉蛑饕ǎ?/span> 1、由于抽血困難,,采血時(shí)定位進(jìn)針不準(zhǔn),、針尖在血管中探來探去造成血腫等而發(fā)生溶血。 2,、注射器和針頭連接不緊,,采血時(shí)空氣進(jìn)入,在抽取的血標(biāo)本中混有泡沫,,這種混有泡沫的血標(biāo)本,放置一定時(shí)間后泡沫破裂或迅速干燥,,造成血細(xì)胞破壞而發(fā)生溶血,。 3、血標(biāo)本在運(yùn)輸過程中過度振蕩或貯存不當(dāng),。 4,、不合格的塑料制品會(huì)因聚合不完全而具有毒性,,這種毒性可造成溶血; 5,、試管質(zhì)量粗糙,。 實(shí)驗(yàn)室如何檢驗(yàn)樣本是否溶血? 可依靠?jī)x器自動(dòng)檢測(cè)血清指數(shù)(包括溶血,、黃疸和脂血指標(biāo)),。與目測(cè)比,自動(dòng)檢測(cè)更敏感,,在有其他色源如膽紅素干擾的情況下,,重復(fù)性更好。尤其是可以把檢測(cè)的結(jié)果傳輸?shù)絃IS系統(tǒng),。 溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的干擾機(jī)制 1,、紅細(xì)胞內(nèi)外有顯著濃度差的物質(zhì):如K+,ALT,,AST,,LDH等在RBC內(nèi)分布明顯高于血清(漿),即使輕度溶血,,血細(xì)胞高濃度組分逸出,,使血漿分析物濃度增加,測(cè)定結(jié)果高于真值,,溶血越嚴(yán)重,,增高越顯著。某些成分若RBC內(nèi)濃度低于血清(漿)濃度時(shí),,則溶血相當(dāng)于血清被稀釋,,使這些成分的檢測(cè)值降低,造成負(fù)干擾,。 2,、血細(xì)胞成分進(jìn)入血清(漿)中因化學(xué)反應(yīng)而引起濃度改變,如溶血后RBC的磷脂進(jìn)入血清被血清中磷酸酯酶水解,,造成血清無(wú)機(jī)磷濃度顯著增高,。又如HGB能將膽紅素氧化成膽綠素使血清膽紅素降低。 3,、RBC內(nèi)含物作為干擾物參與血清成分的檢測(cè)反應(yīng)而引起的化學(xué)性干擾,,如谷胱甘肽、HGB等,。谷胱甘肽是由谷氨酸,、半胱氨酸以及甘氨酸組成的三肽,RBC中含量較多,,起到維持RBC膜穩(wěn)定性的作用,,因其具有較強(qiáng)的還原性,,可與具有氧化性的中間產(chǎn)物(如過氧化氫)發(fā)生氧化還原反應(yīng)影響檢測(cè)結(jié)果;HGB中的Fe2+可被某些試劑中的氧化劑氧化為Fe3+,,生成黃色的正鐵血紅素既可引起光學(xué)干擾,,又因?qū)ρ趸瘎┑南模瑢?duì)血清目標(biāo)分析物的檢測(cè)造成負(fù)干擾,。 4,、HGB本身顏色對(duì)檢測(cè)的光學(xué)干擾,HGB在431和555nm波長(zhǎng)附近均有吸收峰,,如果檢測(cè)方法主波長(zhǎng)在此波長(zhǎng)附近,,則必然干擾比色,影響結(jié)果,。 溶血標(biāo)本對(duì)部分檢驗(yàn)結(jié)果的影響 1,、對(duì)肝功能指標(biāo)的影響: 溶血對(duì)肝功能指標(biāo)ALT、AST,、TP,、ALB產(chǎn)生正干擾,對(duì)TBIL,、DBIL,、GGT、ALP,、TBA,、AFU產(chǎn)生負(fù)干擾,且隨著HGB的增大,,干擾更加明顯,。這是因?yàn)锳ST、ALT等由于紅細(xì)胞內(nèi)外的濃度差異顯著,,紅細(xì)胞內(nèi)AST濃度是血漿的38倍,,因而輕微溶血就可導(dǎo)致結(jié)果假性增高;對(duì)于ALP,、GGT,,由于紅細(xì)胞內(nèi)含量低,溶血對(duì)標(biāo)本的稀釋作用及對(duì)反應(yīng)體系氧化劑的消耗,,造成負(fù)干擾,;溶血對(duì)蛋白測(cè)定的干擾則是源于血紅蛋白與雙縮脲試劑發(fā)生內(nèi)源性反應(yīng),其反應(yīng)復(fù)合物可使540nm的吸光度增加,,導(dǎo)致結(jié)果偏高,,通常球蛋白由總蛋白減去清蛋白所得,輕度溶血會(huì)使清球比例下降;溶血對(duì)TBIL,,DBIL產(chǎn)生負(fù)干擾,是由于血清膽紅素的測(cè)定如果采用重氮法,,溶血后HGB可競(jìng)爭(zhēng)性地抑制膽紅素與重氮試劑的偶氮反應(yīng),,使測(cè)定結(jié)果低于真值,但輕度溶血對(duì)TBIL影響較輕,,可能是由于HGB在測(cè)定波長(zhǎng)處的光吸收作用所致,。因此,應(yīng)選擇合適的測(cè)定波長(zhǎng)如600nm以避開其吸收峰或采用雙波長(zhǎng)法減少血紅蛋白的干擾,,近年來實(shí)驗(yàn)室采用釩酸鹽方法測(cè)定膽紅素,,其原理是釩酸鹽將膽紅素氧化為膽綠素。采用雙試劑及雙波長(zhǎng)法,,通過測(cè)定其吸光度變化來計(jì)算膽紅素含量,,消除HGB的干擾。溶血對(duì)AFU,,TBA產(chǎn)生明顯負(fù)干擾,,導(dǎo)致部分負(fù)值出現(xiàn)因此,對(duì)于溶血標(biāo)本,,不適宜測(cè)定AFU,,TBA。 2,、對(duì)腎功能各指標(biāo)的影響: 溶血對(duì)腎功能指標(biāo)CREA無(wú)明顯干擾,,對(duì)UA 產(chǎn)生負(fù)干擾,這主要是溶血后紅細(xì)胞內(nèi)含物谷胱甘肽可競(jìng)爭(zhēng)尿酸檢測(cè)反應(yīng)體系中過氧化氫而導(dǎo)致結(jié)果偏低,。嚴(yán)重溶血對(duì)U REA 產(chǎn)生正干擾,, 是溶血導(dǎo)致光學(xué)反應(yīng)的吸光度值升高,造成結(jié)果偏高,。 3,、對(duì)心肌酶譜分析的影響: 溶血對(duì)心肌酶學(xué)指標(biāo)產(chǎn)生明顯的正干擾,LDH,、CK,、CK- MB 顯著增高尤其對(duì)CK- MB 影響嚴(yán)重, 輕微的溶血,,可使CK- MB 成倍升高,,嚴(yán)重溶血可使其假性增高10倍以上。由于LDH在紅細(xì)胞內(nèi)的含量明顯高于胞外,,溶血后結(jié)果明顯升高,。雖然紅細(xì)胞中不含CK,但含有大量腺苷酸激酶(AK),可干擾CK測(cè)定中的酶偶聯(lián)反應(yīng)體系,,引起CK結(jié)果升高,,許多試劑盒中加入AK抑制劑以減少溶血的干擾,但溶血仍可對(duì)心肌酶學(xué)指標(biāo)造成明顯的正干擾,,故溶血標(biāo)本,,不適宜測(cè)定CK-MB。 4,、對(duì)血糖,、血脂測(cè)定的影響: 溶血對(duì)GLU測(cè)定產(chǎn)生正干擾,這是因?yàn)槟壳把菧y(cè)定大多采用葡萄糖氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法,,反應(yīng)產(chǎn)物為紅色醌亞胺類物質(zhì),,血紅蛋白可直接加深反應(yīng)產(chǎn)物的紅色對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生正干擾,使結(jié)果偏高,。溶血對(duì)血脂測(cè)定影響較小,,分析原因,在檢測(cè)體系中,,既有溶血引起的稀釋作用的負(fù)干擾,,又有血紅蛋白增加吸光度造成的正干擾存在。 預(yù)防溶血的對(duì)策 為了最大限度減少血液標(biāo)本溶血的現(xiàn)象,,我們應(yīng)該做到以下幾點(diǎn): 1,、護(hù)士抽血時(shí)止血帶不可扎得過緊過久,抽血后將血液注入試管時(shí)不可過快,,不可劇烈震蕩試管混勻,,以免造成血細(xì)胞破壞;采血困難者不可反復(fù)用針尖探尋血管造成血腫而發(fā)生溶血,;不可從輸液處抽血,。 2、在采血過程中,,應(yīng)保持注射器,、采血針、試管的清潔和干凈,,采血針不可用酒精消毒,,因?yàn)榫凭珪?huì)導(dǎo)致溶血。 3,、檢驗(yàn)人員離心分離血清時(shí)速度不要過快,,不要用力剝離血塊。 4,、妥善保存樣本,。血液標(biāo)本應(yīng)立即送檢,存放時(shí)間不可過久、不可放置在冷凍室,,以免融化后溶血,。 5、如標(biāo)本已溶血應(yīng)重新采集標(biāo)本或?qū)θ苎潭容p的標(biāo)本結(jié)果進(jìn)行校正,,如因特殊情況不能重采,,應(yīng)在化驗(yàn)單上注明,盡量寫清哪些項(xiàng)目可能會(huì)升高或降低的具體數(shù)據(jù),,以便臨床醫(yī)生準(zhǔn)確判斷病情。 6,、選擇正規(guī)廠家的合格醫(yī)療器械,,嚴(yán)把器械產(chǎn)品質(zhì)量關(guān)。 綜上所述,,溶血會(huì)引起一些生化檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果的誤差,,對(duì)臨床診斷造成不利影響,因此,,提高從業(yè)人員的技術(shù)水平和專業(yè)精神,、降低檢驗(yàn)人員的失誤和提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性對(duì)更好地服務(wù)于臨床有著非常重要的意義。 來源:邁瑞檢驗(yàn)技術(shù)應(yīng)用平臺(tái) |
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