生化檢驗(yàn)?zāi)壳耙呀?jīng)成為臨床醫(yī)師診斷疾病,、觀察療效,、判斷病情的發(fā)展和預(yù)后不可缺少的工具，但是影響生化檢驗(yàn)結(jié)果的因素很多,，也很復(fù)雜,。隨著近年來(lái)科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，各醫(yī)院檢驗(yàn)科先后引進(jìn)了各種類型的自動(dòng)化生化分析儀,，大大提高了臨床生化分析的精密度,，同時(shí)檢測(cè)方法學(xué)的改進(jìn)和校準(zhǔn)品質(zhì)量的提高，使得分析的準(zhǔn)確度得到很大提高,，但分析過(guò)程之外的影響因素常被臨床醫(yī)生和檢驗(yàn)工作者所忽視,。本文對(duì)引起生化檢驗(yàn)結(jié)果誤差的各種析前因素進(jìn)行了闡述。

1.生理因素對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

影響檢驗(yàn)結(jié)果的生理因素可分為可控因素和不可控因素兩種類型,。主要有年齡,、性別、運(yùn)動(dòng),、情緒,、體位改變、生活方式,、妊娠,、季節(jié)變化、海拔高度,、生理性波動(dòng)等,，現(xiàn)分述如下：

1.1 年齡 

正常生長(zhǎng)期兒童由于骨骼生長(zhǎng)使得成骨母細(xì)胞分泌堿性磷酸酶（ALP）增加，因此生長(zhǎng)期兒童的ALP的活性比健康成人要高3倍左右,；新生兒肝臟缺乏葡萄糖酸轉(zhuǎn)移酶,，不能將未結(jié)合膽紅素轉(zhuǎn)化為水溶性的結(jié)合膽紅素，因此血清總膽紅素（TBIL）和間接膽紅素（IBIL）水平比正常成人高 ,；年齡還可以影響體內(nèi)的血脂水平和腎功能,，人體肌酐（Cr）清除率每隔十年有所減少。這些實(shí)例都說(shuō)明了年齡的變化會(huì)影響到某些生化檢驗(yàn)的結(jié)果,，因而在臨床檢驗(yàn)工作中應(yīng)針對(duì)這些項(xiàng)目在不同的年齡段制定相應(yīng)的參考范圍,。

1.2 性別 

不同性別其體內(nèi)的性腺激素水平不同，并且生育期女性的性腺激素水平還隨其處在月經(jīng)周期的不同階段而有明顯變化,；此外和肌肉代謝有關(guān)的分析項(xiàng)目如Cr和肌酸激酶（CK）,，其血清水平男性明顯高于女性。因此對(duì)于這些有性別差異的項(xiàng)目,，需針對(duì)不同的性別制定相應(yīng)的參考范圍,。

1.3 運(yùn)動(dòng) 

強(qiáng)烈的肌肉運(yùn)動(dòng)可以明顯加快體內(nèi)的新陳代謝，暫時(shí)的變化的是血清游離脂肪酸迅速下降后繼而上升，丙酮酸和乳酸亦接著升高,；細(xì)胞酶的釋放引起血清CK,、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）,、乳酸脫氫酶（LDH）的升高,；磷酸肌酸分解增多，導(dǎo)致血清Cr,、磷的濃度升高,，有時(shí)可升高25%甚至更多。因此為減少運(yùn)動(dòng)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響,，一般主張?jiān)谇宄砍檠?，住院病人可在起床前抽血，匆忙起床到門(mén)診的病人應(yīng)至少休息15分鐘后采血,。

1.4 情緒 

情緒激動(dòng),、緊張可影響神經(jīng)—內(nèi)分泌系統(tǒng)功能，使血清游離脂肪酸,、乳酸,、血糖（GLU）等升高。故采血前患者情緒應(yīng)保持穩(wěn)定,，同時(shí)護(hù)理人員應(yīng)向患者作適當(dāng)解釋,，以消除患者不必要的疑慮和恐懼。

1.5 體位改變 

體位改變時(shí)血液循環(huán)與體液循環(huán)之間的平衡發(fā)生改變,，導(dǎo)致血清內(nèi)細(xì)胞成份和大分子物質(zhì)濃度發(fā)生改變,。例如由臥位變?yōu)榱⑽粫r(shí)，血清內(nèi)ALP,、甘油三酯（TG）,、白蛋白（ALB）等會(huì)增加5%以上。有報(bào)道站,、坐,、臥三種體位的不同組合變化對(duì)血脂多種成分都有影響，認(rèn)為血脂采樣當(dāng)以坐姿為佳,。為兼顧多數(shù)受試者的情況,，生化血樣的抽采體位應(yīng)以坐姿為宜。

1.6 生活方式 

非素食者的飲食是高蛋白或高嘌呤,，其尿酸（UA）、尿素氮（BUN）的水平比素食者高,；富含魚(yú)油的飲食會(huì)降低血清中TG和極低密度脂蛋白（VLDL）的水平,；攝入咖啡因會(huì)影響某些游離藥物和激素濃度的測(cè)定；吸煙和飲酒會(huì)對(duì)某些生化項(xiàng)目產(chǎn)生影響，嗜煙者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達(dá)8%,，而不吸煙者含量在1%以下,，此外兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為多,，而飲酒后會(huì)使血漿UA,、乳酸增加，長(zhǎng)期飲酒者血清高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C),、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（γ-GT或GGT）水平亦會(huì)增高,。

1.7 妊娠 

當(dāng)女性處于妊娠階段時(shí)，由于血容量增加導(dǎo)致血液稀釋,，使微量元素水平明顯降低,；妊娠期代謝需求增加使脂肪動(dòng)員增加，使血清TG,、載脂蛋白AI（ApoAI),、載脂蛋白AⅡ(ApoAⅡ)和總膽固醇（TC）特別是低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）大大增加；妊娠時(shí)胎盤(pán)生成ALP,、甲胎蛋白（AFP）,、急性時(shí)相反應(yīng)期蛋白（APRP）等，使它們相應(yīng)的檢查結(jié)果升高,；在妊娠后期,，胎盤(pán)產(chǎn)生的雌激素和絨毛膜促性腺生長(zhǎng)激素使血糖的水平升高。妊娠是特殊的生理過(guò)程,，臨床醫(yī)療人員查看孕婦的檢測(cè)結(jié)果時(shí)應(yīng)充分考慮妊娠的影響,。

1.8 季節(jié)變化 

在北半球由于夏季比冬季暴露于日光中的時(shí)間較長(zhǎng)，因而維生素D的水平會(huì)升高,TC則與之相反,。因此當(dāng)病人在不同的季節(jié)檢查這些類項(xiàng)目時(shí),，應(yīng)考慮季節(jié)變化帶來(lái)的影響。

1.9 海拔高度 

一些血漿中的分析物如C反應(yīng)蛋白（CRP）,、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）等因海拔高度增加而減少,，而血紅蛋白則反應(yīng)性增高。因此當(dāng)病人在兩個(gè)差別很大的海拔高度做這些項(xiàng)目的檢查時(shí),，對(duì)于結(jié)果的分析應(yīng)考慮高度的影響,。

1.10 生理性波動(dòng) 

皮質(zhì)醇的釋放呈周期性變化，通常在早晨6點(diǎn)達(dá)高峰,，午夜時(shí)降至最低,。此外尚有報(bào)道膽紅素、促腎上腺皮質(zhì)激素,、血清鐵亦是清晨最高,，而血鈣中午最低,。

2.飲食對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

飲食一方面影響血液中多種物質(zhì)成分，許多化學(xué)成分如GLU,、TG,、ALP、磷等容易受到飲食成分特別是近期食譜的影響,；抽血前1天進(jìn)食高蛋白食品會(huì)導(dǎo)致BUN,、UA等結(jié)果偏高，但對(duì)Cr影響不大,；高比例不飽和脂肪酸食物可減低膽固醇含量,；含咖啡因飲料可使血漿游離脂肪酸增加，繼而使腎上腺素和腦組織釋放兒茶酚胺增多,。另一方面進(jìn)食后血中脂質(zhì)特別是TG的增加,，可導(dǎo)致血清或血漿呈乳白色樣渾濁，這可給比色,、比濁或滴定等帶來(lái)一定干擾,，然而目前許多生化檢驗(yàn)項(xiàng)目都是用比色等分析方法進(jìn)行的，這就干擾了檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性,。因此臨床生化血樣原則上必須堅(jiān)持空腹采血,。但是如果讓患者空腹時(shí)間過(guò)長(zhǎng)超過(guò)16小時(shí)后，因?yàn)檫^(guò)度饑餓反而會(huì)使血清ALB,、TRF,、GLU、補(bǔ)體C3含量下降,，而血清膽紅素因清除率減少而上升,。

3.藥物對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

藥物對(duì)檢測(cè)的影響非常復(fù)雜，國(guó)內(nèi)外都進(jìn)行了許多研究,，并有許多專著論述,。藥物引起生化檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差的原因可分為物理干擾和化學(xué)干擾，物理干擾是由于藥物進(jìn)入體內(nèi)后使血清的物理性質(zhì)如顏色等發(fā)生變化進(jìn)而影響某些項(xiàng)目的檢測(cè),，而化學(xué)干擾是由于藥物本身的化學(xué)性質(zhì)如藥物的強(qiáng)還原性等對(duì)體內(nèi)某些物質(zhì)測(cè)定的影響,。此外，許多藥物的副作用使肝,、腎功能發(fā)生改變而引起檢驗(yàn)結(jié)果異常,。近年來(lái)，利用過(guò)氧化物酶催化過(guò)氧化氫（H2O2）,，以Trinder生成反應(yīng)檢測(cè)體內(nèi)代謝物質(zhì)濃度,，如GLU、TC,、TG,、HDL-C等,，但是由于某些藥物如維生素C等有較強(qiáng)的還原性,，易與反應(yīng)中H2O2起作用,，降低紅色醌亞胺的生成致使這些項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果偏低；長(zhǎng)期口服避孕藥的婦女,，由于肝酶的誘導(dǎo)合成增加,，可使TG及轉(zhuǎn)氨酶升高。值得注意的是長(zhǎng)期靜脈點(diǎn)滴的病人留取標(biāo)本時(shí)可使標(biāo)本稀釋,，造成某些項(xiàng)目結(jié)果偏低,，又因靜點(diǎn)時(shí)高濃度的藥物進(jìn)入標(biāo)本中，使許多檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生巨大變化,。因此護(hù)理人員應(yīng)避免在靜點(diǎn)時(shí)和用藥4h以內(nèi)采取檢驗(yàn)標(biāo)本,，必要時(shí)停藥后再查，以防藥物的干擾作用,。

4.標(biāo)本采集對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

4.1 采集時(shí)間 

同一患者在不同時(shí)間所采集標(biāo)本的檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)有明顯的差異,，為了盡可能取得檢驗(yàn)條件的一致性，生化檢驗(yàn)原則上都是于清晨早餐前或進(jìn)食12h后采集,。這是因?yàn)檫M(jìn)食后血液中的某些化學(xué)成分有較大幅度的波動(dòng),，而飲水還可使血液稀釋，所以此期間血液成分的波動(dòng)不應(yīng)忽視,，此外在臨床上血液生化指標(biāo)參考值的調(diào)查與界定,，通常以空腹血樣的檢測(cè)值為統(tǒng)計(jì)樣本。但是在某些急診情況下,，為了爭(zhēng)取搶救時(shí)間,，接診后需立即進(jìn)行治療，且同時(shí)需要進(jìn)一步生化檢查以判斷病情的發(fā)展和預(yù)后,，此時(shí)應(yīng)該注意輸液及藥物對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響,，盡量在輸液及藥物治療之前采取標(biāo)本并立即送檢。

4.2 采集部位

實(shí)際工作中有時(shí)能遇到患者短時(shí)間內(nèi)生化結(jié)果出現(xiàn)較大幅度的波動(dòng),，分析其原因除患者病情的急劇變化和靜脈補(bǔ)充液體的影響外,，血標(biāo)本的采集部位也是一個(gè)重要原因。臨床上常有危重患者需要多通道輸液,，在采集他們的血標(biāo)本出現(xiàn)困難時(shí),，有些標(biāo)本是從輸液側(cè)肢體甚至輸液的同一條靜脈取血，這樣血液稀釋和輸液藥物的影響將會(huì)使檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)很大的誤差,。所以在采集血標(biāo)本時(shí)應(yīng)盡可能避免在補(bǔ)液側(cè)肢體采血,。

4.3 抗凝劑

草酸鹽、枸櫞酸鹽,、EDTA的抗凝原理是與血液中的凝血因子ⅣCa2 發(fā)生反應(yīng)從而阻斷凝血反應(yīng),，因此使用抗凝劑將會(huì)使血清中的Ca2 ,、Mg2 含量下降；抗凝劑本身還常含有某些的離子成分如K ,、Na ,它們?cè)谑褂每鼓齽┖蟮难鍧舛葧?huì)升高,；某些酶的活化還需要Ca2 、Mg2 的輔助,，當(dāng)使用上述抗凝劑后,，這些抗凝劑與標(biāo)本和試劑中的離子結(jié)合，使得游離Ca2 ,、Mg2 的含量明顯減少,，從而抑制這些酶的活性；此外草酸鹽可與乳酸,、丙酮酸發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制,，又能與LDH、煙堿輔酶腺嘌呤二核苷酸(NADH),、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD )形成復(fù)合物,。因此用這些抗凝劑分離的血漿一般不適用于酶活性的測(cè)定。肝素為含硫酸基團(tuán)的粘多糖,，對(duì)ALT,、AST、LDH,、酸性磷酸酶（ACP）無(wú)影響,，適用于急診時(shí)迅速分離進(jìn)行測(cè)定，但值得注意的是肝素對(duì)CK等酶有輕微的抑制作用,，因此臨床上生化檢測(cè)除纖維蛋白原測(cè)定外,，基本都是采用血清標(biāo)本。

5.標(biāo)本處理,、儲(chǔ)存對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

5.1 標(biāo)本處理

檢驗(yàn)科收到標(biāo)本后如果先45℃水浴10min,再3000rpm離心5min即可使血清LDH,、K 濃度顯著升高，因此只需要低速離心分離血清即可,。

5.2 標(biāo)本儲(chǔ)存

標(biāo)本分離前放置太久可造成溶血,，另外，由于葡萄糖的酵解作用和細(xì)胞對(duì)葡萄糖的利用導(dǎo)致標(biāo)本采集后的血液葡萄糖濃度進(jìn)行性下降,，有報(bào)道全血樣品中葡萄糖在室溫下條件下,，每小時(shí)約酵解5%；Na ,、Cl-,、K 靜置2-3h后則會(huì)有明顯上升的趨勢(shì)。血清蛋白對(duì)酶蛋白有一定的穩(wěn)定作用,，如果沒(méi)有細(xì)菌污染,，大部分酶存在于清蛋白中可在室溫下保存1-3天而活性不受影響,，但是也有有些酶如CK放置4h后其活性明顯下降；前列腺酸性磷酸酶極不穩(wěn)定,，在離體后較短的時(shí)間內(nèi)活性即明顯下降,，此外大部分酶在低溫下比室溫更穩(wěn)定，但有些酶如醛縮酶（ALD）在低溫下特別是-20℃冰凍時(shí),，可引起不可逆性失活,；LDH在低溫下反而不如室溫穩(wěn)定,。標(biāo)本分離后放置太久,，其水分容易蒸發(fā)，使標(biāo)本濃縮而結(jié)果偏高,。因此標(biāo)本應(yīng)盡快分析,，對(duì)于暫時(shí)不能分析的標(biāo)本應(yīng)該先密封然后保存于4℃冰箱中。

6.標(biāo)本狀態(tài)對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響

6.1 溶血 

溶血是臨床生化檢驗(yàn)中最常見(jiàn)的一種影響因素,，它能引起很多指標(biāo)明顯異常,。引起標(biāo)本溶血的原因有很多：注射器或容器內(nèi)不干凈；抽血時(shí)使用的針頭過(guò)小,、抽血用力過(guò)大,、較長(zhǎng)時(shí)間地使用止血帶、產(chǎn)生過(guò)多的泡沫,；抽血后未取下針頭直接將血液注入容器內(nèi),、混勻抗凝劑時(shí)用力過(guò)大等。因此有研究者主張抽血時(shí)不束扎止血帶,，因扎帶可造成局部淤血,、缺氧、水腫,、溶血等而影響檢驗(yàn)結(jié)果,，若確需扎帶，則不宜過(guò)緊,，且不能超過(guò)1分鐘,。

溶血的干擾機(jī)理有以下三種：一是血細(xì)胞中高濃度組分逸出，使測(cè)定結(jié)果增高,血細(xì)胞內(nèi)濃度比血漿中濃度明顯高的物質(zhì)有LDH,、ACP,、AST、K ,，只要輕微溶血就可以對(duì)這些項(xiàng)目產(chǎn)生很大影響,。另外若某些物質(zhì)的血細(xì)胞內(nèi)濃度低于血清濃度時(shí)，則溶血相當(dāng)于血清被稀釋,，因而使這些血清成分特別是發(fā)生重度溶血時(shí)的檢測(cè)值降低,，這類項(xiàng)目主要有Ca2 ,、Na 、Cl-,、UA等,。二是血細(xì)胞成分進(jìn)入血清中后因化學(xué)反應(yīng)而引起其他物質(zhì)的濃度改變，如溶血后紅細(xì)胞的磷脂進(jìn)入血清被血清中的磷酸酯酶水解,，其結(jié)果造成血清無(wú)機(jī)磷濃度顯著增高,。三是血紅蛋白本身顏色對(duì)檢測(cè)的光學(xué)干擾，血紅蛋白的顏色在431nm和555nm波長(zhǎng)附近能使比色,、比濁法的吸光度增高,，如溶血引起重氮單試劑法膽紅素測(cè)定結(jié)果明顯升高。實(shí)際上,，以上三類干擾在溶血標(biāo)本中同時(shí)存在并可相互作用,，因而使受影響的檢項(xiàng)更為復(fù)雜，這在超微量,、高精度和多指標(biāo)的檢測(cè)分析中顯然不可忽視,，因此，嚴(yán)控標(biāo)本溶血是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的重要方面,。

6.2 脂血 

血液脂濁可散射光線,，所以對(duì)吸光度一般產(chǎn)生正向干擾，導(dǎo)致某些項(xiàng)目如ALB,、UA,、總蛋白（TP）等測(cè)定結(jié)果偏高,此時(shí)即使使用兩點(diǎn)法或連續(xù)監(jiān)測(cè)法不能排除脂血干擾。而在pH10以上的環(huán)境中,，乳糜中的TG會(huì)皂化可使血清逐漸變清,，使許多比色法測(cè)定如Ca2 、Cr,、ALP,、TP等結(jié)果產(chǎn)生負(fù)誤差,此時(shí)可以用雙波長(zhǎng)法或設(shè)計(jì)樣本空白消除干擾。在某些實(shí)驗(yàn)室用乙醚處理脂血以消除脂濁對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響,，但是乙醚處理的脂濁標(biāo)本雖然可以排除脂濁對(duì)ALT,、AST、TP等指標(biāo)的干擾,，但是不能排除對(duì)ALB,、GGT、LDH,、BUN,、GLU、Ca2 等指標(biāo)的干擾。

6.3 黃疸

膽紅素對(duì)反應(yīng)結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大,，一般可以用樣本空白或兩點(diǎn)比色法,、連續(xù)監(jiān)測(cè)法來(lái)消除膽紅素對(duì)黃色結(jié)果的影響，但由于膽紅素不穩(wěn)定,，隨著膽紅素被氧化為膽綠素,、膽褐素而變色，此時(shí)如果使用兩點(diǎn)法,、連續(xù)監(jiān)測(cè)法同樣也不能排除膽紅素對(duì)結(jié)果的干擾,。此外膽紅素作為一種還原劑對(duì)氧化反應(yīng)有干擾，如氧化酶法測(cè)定GLU,、TG,、UA、膽固醇等,，因?yàn)槟懠t素可以與上述過(guò)程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng),，從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色源物質(zhì)結(jié)合減少，導(dǎo)致結(jié)果偏低,。此時(shí)也可用雙波長(zhǎng)法或設(shè)計(jì)樣本空白消除干擾，亦或當(dāng)外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時(shí)可先除蛋白,，然后加膽紅素氧化酶預(yù)先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素,，可大大減低甚至消除膽紅素的干擾。

綜上所述,，影響生化檢驗(yàn)結(jié)果的標(biāo)本因素確實(shí)很多,，亦很復(fù)雜，因此分析前的標(biāo)本質(zhì)量問(wèn)題不能忽視,。檢驗(yàn)人員除了應(yīng)該不斷的加強(qiáng)專業(yè)學(xué)習(xí)外,，還應(yīng)該多向臨床各科室宣傳和講解分析前標(biāo)本的質(zhì)量控制對(duì)保證檢驗(yàn)結(jié)果的重要性。臨床醫(yī)療人員也應(yīng)該了解標(biāo)本因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響,，在分析病情時(shí)應(yīng)排除這些影響因素,。臨床科室與檢驗(yàn)科攜手合作，共同把好分析前的質(zhì)量關(guān),，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,，為臨床提供可靠的診療依據(jù)。