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1.將血液混勻,，與等體積1640培養(yǎng)基混合與50ml離心管中（留大約3ml血液放置4℃冰箱）
2.準(zhǔn)備5只15毫升離心管，分別加入5mlPBMC分選液
3.小心地將血液-培養(yǎng)基緩慢,、逐滴加入至15ml離心管中
4.2000r/min離心20min
5.取兩只15ml離心管,，加入10mlPBS，小心吸取4步驟中離心管中間白色層細(xì)胞,，并加入PBS中,，混勻
6.1800r/min離心5min，棄上清,，10mlPBS重懸,，10倍稀釋計(jì)數(shù)。部分凍存,。
7.取2個(gè)EP管,，分別加入2.5*10^5個(gè)細(xì)胞，1800r/min離心5min,。棄上清,，加入200μlPBS重懸，其中一管避光加入CD1c抗體5μl,，避光孵育20min,。
8.1800r/min離心5min,，棄上清,，加200μlPBS重懸
9.（如果能立即流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，則可省略此步），加30μl多聚甲醛（4%多聚甲醛儲(chǔ)存,，最終體系需0.5%濃度的多聚甲醛）,。
10.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。
接第六步
取1個(gè)EP管,，加入1*10^6細(xì)胞,，1800r/min離心5min。棄上清,，1mlTrizol混勻,，立即凍存于-80℃冰箱。以備RNA抽提,。
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