呼吸系統(tǒng)疾病的檢查
由于大氣污染,、吸煙、工業(yè)化發(fā)展等所導(dǎo)致的理化因子,、生物因子的吸入和人口老齡化等因素的影響,,近年來呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)病率明顯增加,尤其是呼吸道感染性疾病,,如急性上呼吸道感染,、急性氣管-支氣管炎、慢性支氣管炎,、肺炎,、肺結(jié)核及其所致的并發(fā)癥等嚴重威脅著人類健康。呼吸系統(tǒng)疾病的實驗診斷內(nèi)容較廣,,最常用的血細胞檢查,、呼吸道感染的病原體檢查和血清學(xué)診斷、電解質(zhì)與酸堿平衡檢查,、過敏原檢查等分別在有關(guān)章節(jié)已述,,本章主要介紹痰液、支氣管-肺泡灌洗液,、胸腔積液的一般檢查,,并結(jié)合前述內(nèi)容論述呼吸系統(tǒng)疾病的實驗診斷策略和常見呼吸系統(tǒng)疾病的實驗診斷。
痰液檢查
痰液(sputum)是氣管、支氣管和肺泡所產(chǎn)生的分泌物,。生理狀況下支氣管粘膜腺體和杯狀細胞可分泌少量粘液,,有助于呼吸道粘膜保持濕潤,健康人有時可咯出少量無色或灰白色粘液痰或泡沫樣痰,。當呼吸系統(tǒng)由于各種原因使粘膜或肺泡充血,、水腫、毛細血管通透性增高,、腺體和杯狀細胞分泌增加,,滲出物或漏出物、感染的病原體,、組織破壞產(chǎn)物和吸入的塵埃等混合在一起,,使痰排出量增多,而且痰的性狀及痰內(nèi)成分也發(fā)生顯著變化,。因此,,痰液檢查包括痰液的一般性狀、顯微鏡檢查,、免疫學(xué)檢查等,,對呼吸系統(tǒng)疾病的診治有重要價值。 一,、適應(yīng)癥:各種感染性呼吸系統(tǒng)疾病,,如急、慢性支氣管炎,、各類肺炎,、細菌性肺膿腫、支氣管胸膜瘺,、阿米巴肺膿腫,、肺吸蟲病、肺結(jié)核,、艾滋病等,。支氣管擴張、支氣管哮喘,,肺癌,、心功能不全肺淤血、肺栓塞,、肺出血,、特發(fā)性肺含鐵血黃素沉著癥等。 二,、標本采集 1,、一般檢查應(yīng)該取清晨第一口痰為宜,,留痰時應(yīng)先漱口,然后用力咯出氣管深處痰液,,放入清潔干燥的專用痰盒內(nèi)送檢,。注意不要將唾液混入。 2,、細胞學(xué)檢查可取上午9~10時深咳的痰液送檢,,尤其注意取有病理變化,如含血液,、膿液的部分,。 3、做24小時痰量和分層檢查時,,把痰留在無色廣口瓶內(nèi),,需要時可加少許石炭酸以防腐。 4,、對咳痰困難者,,可由臨床醫(yī)師用喉拭子取痰,或用化痰藥,、汽浴法采集,,必要時也可用支氣管鏡抽取。 三,、檢測方法 ㈠一般性狀檢查:包括痰液的量,、性狀、顏色,、氣味及異物等。 ㈡顯微鏡檢查:包括直接涂片和涂片染色檢查,。 ㈢隱血試驗與含鐵血黃素檢查:用化學(xué)法或單克隆抗體法可檢查微量的呼吸道出血或疑為呼吸道出血的痰液,。普魯士藍染色可檢查痰液中含鐵血黃素。 ㈣免疫學(xué)檢查:可測定痰液中的免疫球蛋白,。 四,、參考范圍:健康人一般無痰,偶有少量白色或灰白色粘液痰,,痰液中可有少量中性粒細胞和上皮細胞,,無紅細胞及其他異常成份。IgA (2.03?0.21)mg/L,。 五,、臨床意義 ㈠痰液的一般性狀 1、痰量:排痰量以ml/24h計,。急性呼吸道炎癥時,,痰量增加不多,;慢性支氣管炎、肺炎,,支氣管哮喘,,肺結(jié)核、支氣管擴張,、肺膿腫,、支氣管胸膜瘺時,痰液量增多,。細菌性炎癥比病毒感染時痰量多,。痰量較多時,把痰留在容器內(nèi),,靜置后可出現(xiàn)分層現(xiàn)象,,上層為泡沫、中層為漿液或漿液膿性,、底層為壞死組織碎屑,。 2、痰液的性狀及顏色:根據(jù)痰液的性狀可分為粘液性,、漿液性,、粘液膿性、膿性,、血性等,。 ⑴膿痰或粘液膿痰:主要成分為膿細胞,多為黃色,,提示呼吸道有化膿性感染,,見于化膿性支氣管炎、支氣管擴張,、肺膿腫,、膿胸、空洞型肺結(jié)核,、支氣管胸膜瘺等,。當銅綠假單胞菌感染時,可有黃綠色或翠綠色膿痰,。 ⑵紅色或棕紅色血痰:主要因呼吸道出血所致,,可見于肺結(jié)核、肺癌,、支氣管擴張,、及非肺部疾病如二尖瓣狹窄等。粉紅色泡沫痰,,多為左心功能不全,,肺瘀血導(dǎo)致毛細血管擴張,,形成急性肺水腫的特征性表現(xiàn)。 ⑶鐵銹色痰:因痰中所含血紅蛋白變性產(chǎn)生大量含鐵血黃素顆粒所致,,見于大葉性肺炎,、肺梗死、特發(fā)性肺含鐵血黃素沉著癥等,。 ⑷泡沫樣痰:支氣管哮喘發(fā)作時為白色泡沫樣痰,。 ⑸粘液樣痰:為無色透明或灰色粘稠痰,由于炎癥刺激呼吸道分泌粘液增多所致,,主要見于支氣管炎,、哮喘、早期肺炎等,。 ⑹棕褐色膿痰:見于阿米巴肺膿腫等,。 ⑺爛桃樣灰黃色痰:見于肺吸蟲病所致的肺組織壞死。 ⑻黑色或灰黑色痰:由于吸入大量塵?;蜷L期吸煙者,。 ⑼稀薄漿液性痰:量多且含有粉皮樣物,常提示棘球蚴病,。 3,、氣味 ⑴糞臭味:多見于膈下膿腫與肺相通時。 ⑵惡臭味:肺膿腫,、支氣管擴張,、晚期惡性腫瘤的痰液。 ⑶血腥味:見于肺結(jié)核,、肺癌,、支氣管擴張等血性痰。 ㈡ 痰液中的有形成分 顯微鏡檢查分為不染色痰涂片檢查和染色痰涂片檢查,。 1,、不染色痰涂片檢查 ⑴ 紅細胞:膿性痰中可見少量紅細胞。肺癌,、支氣管擴張、肺結(jié)核及二尖瓣狹窄等引起咯血時,,痰中可見大量紅細胞,。 ⑵ 白細胞:呼吸道炎癥時,痰中白細胞明顯增多,。大量中性粒細胞或成堆膿細胞出現(xiàn),,表明呼吸道有化膿性感染。嗜酸性粒細胞增多見于支氣管哮喘,、過敏性支氣管炎,、肺吸蟲病及熱帶嗜酸粒細胞增多癥等,。肺結(jié)核患者痰中以淋巴細胞增生為主。 ⑶ 上皮細胞:①圓形上皮細胞(肺泡上皮細胞):來自肺泡,,呈圓形或橢圓形,,比白細胞大2~4倍,含1~2個圓形核,,胞漿內(nèi)常有灰塵,、煤煙等淺黑色顆粒。大量出現(xiàn),,見于肺部炎癥或肺組織破壞,。②柱狀上皮細胞(支氣管上皮細胞):來自氣管、支氣管粘膜,,呈狹長形,,其寬端有一個圓形或橢圓形小核,新鮮標本中可見到細胞端邊的纖毛,。增多見于支氣管炎,、氣管炎及支氣管哮喘等,粘膜癌變時也可見較多脫落柱狀上皮細胞,。③鱗狀上皮細胞: 來自口腔,、鼻咽、喉壁及上呼吸道表面,,呈多邊形或圓形,,扁而平,比白細胞大7~8倍,,核位于細胞中央,;在痰涂片中常見,增多見于急性喉炎及上呼吸道感染,。 ⑷ 肺泡巨噬細胞(pulmonary alveolar macrophage):胞體較大,,常吞噬異物或塵埃顆粒,又稱塵細胞,,常見于吸煙者和接觸大量粉塵后,;巨噬細胞吞噬紅細胞后,并將其破壞使血紅蛋白降解,,轉(zhuǎn)變?yōu)楹F血黃素,,形成含鐵血黃素細胞,又稱心衰細胞(heart failure cell),,常見于心功能不全時的長期肺淤血,、肺炎、肺栓塞,、肺出血等,,尤其多見于慢性肺出血,,如特發(fā)性肺含鐵血黃素沉著癥。 ⑸ 寄生蟲或寄生蟲卵:在呼吸系統(tǒng)的一些寄生蟲感染時,,可在痰中找到寄生蟲或寄生蟲卵,,如卡氏肺孢子蟲、阿米巴滋養(yǎng)體,、細粒棘球蚴和肺吸蟲卵等,。 ⑹彈力纖維:由小支氣管壁、肺泡壁或血管等組織壞死脫落所致,,見于肺膿腫,、肺壞疽、肺癌等,。 ⑹ 夏科-萊登結(jié)晶:為無色菱形結(jié)晶,,常與嗜酸性粒細胞同時出現(xiàn),可見于支氣管哮喘,、肺吸蟲感染等,。 ⑺干酪樣小塊:是肺組織壞死的崩解產(chǎn)物,形似干酪或豆腐渣,,多見于肺結(jié)核患者痰中,。 2、染色涂片檢查 ⑴ 瑞氏染色檢查,,主要用于痰中各種細胞的分類及識別,。 ⑵ HE染色:瑞氏染色檢查發(fā)現(xiàn)有巨大或成堆的疑似腫瘤細胞時,用HE染色進行確認,。對疑為肺癌的患者進行痰液脫落細胞學(xué)檢查,,若發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞,有利于肺癌的早期診斷與治療,。 ⑶ 銀染色 (silver stain ):主要用于艾滋病患者等卡氏肺孢子蟲感染的檢查,。 ⑷ 鐵染色:用普魯士蘭染色檢測痰中的含鐵血黃素,慢性肺瘀血和特發(fā)性肺含鐵血黃素沉著癥患者痰中可見大量染成藍綠色的鐵血黃素顆粒,。 ㈢ 其他檢查 1,、隱血試驗(occult blood test):隱血檢查方法主要有化學(xué)法和免疫法。常用的化學(xué)法有愈創(chuàng)木酯法和聯(lián)苯胺法,,免疫法主要為單克隆隱血試紙法,。正常人痰液隱血試驗陰性,當痰液中含有大量紅細胞,,或由于紅細胞破壞使痰中血紅蛋白增多時,隱血試驗為陽性,。常見于肺淤血,、支氣管擴張,、肺部腫瘤及肺結(jié)核等疾病。 2,、分泌型IgA(secretory immunoglobulin A)測定:SIgA是呼吸道,、消化道和泌尿生殖道等外分泌液的主要免疫球蛋白,它是粘膜表面重要的抗菌,、抗病毒或抗毒素的免疫成分,,是機體抗感染的一道重要“屏障”。一般采用放射免疫測定法(RIA)測定痰液中的分泌型IgA,。當SIgA減少時,,粘膜抵抗能力下降,易患呼吸道感染,。臨床發(fā)現(xiàn)部分反復(fù)肺部感染患者,,痰液中SIgA明顯降低。經(jīng)有效治療后,,免疫功能改善,,一些患者痰中SIgA可回升。 六,、評價與問題 1,、痰液的檢查因其無創(chuàng)性、標本收集方便,,易被患者接受,,它有助于呼吸系統(tǒng)疾病的診斷、觀察療效和預(yù)后判斷,。 2,、痰液檢查雖可對呼吸道疾病的診斷提供幫助,但不夠靈敏與特異,,且對疾病定位幫助不大,。痰易受唾液稀釋,分析結(jié)果時應(yīng)慎重,。
支氣管-肺泡灌洗液檢查
支氣管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage,,BAL)技術(shù)是在纖維支氣管鏡基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一項新技術(shù),是應(yīng)用纖維支氣管鏡進行支氣管肺泡灌洗,,采集肺泡表面襯液,,進行細胞學(xué)、微生物學(xué),、寄生蟲學(xué)和免疫學(xué)等方面的檢驗,,作為研究下呼吸道疾病的病因、發(fā)病機制,診斷,、評價療效和判斷預(yù)后的一種手段,。 支氣管肺泡灌洗術(shù)分全肺灌洗和肺段亞肺段灌洗。前者多用于治療,,后者多用于采集檢驗標本,。 一、 適應(yīng)證及禁忌證 ㈠適應(yīng)證:主要用于肺部感染的病原學(xué)診斷,、間質(zhì)性肺炎的診斷,,同時也可用于支氣管哮喘、成人呼吸窘迫綜合征,、彌漫性肺出血,、肺泡蛋白沉著癥的病因?qū)W診斷。 ㈡禁忌證:① 嚴重的肺功能損害者,;②新近發(fā)生急性心肌梗死患者,;③新近發(fā)生大咳血者;④活動性肺結(jié)核未經(jīng)治療者等,。 二,、標本采集 1、用1%~2%利多卡因?qū)粑肋M行局部麻醉,,然后將纖維支氣管鏡從鼻腔插入氣管,,經(jīng)右或左總支氣管楔入右肺中葉或左肺的肺段支氣管口。 2,、用三路開關(guān)注射器經(jīng)支氣管鏡活檢孔緩慢注入37℃無菌生理鹽水,,每次30~50ml,總量100~250ml,,>300ml時可導(dǎo)致并發(fā)癥增多,。 3、每次注液后以負壓6.67~10.6kPa(50~80mmHg)吸出,。 4,、將灌洗液分別收集于用硅油處理過的容器中,容器周圍用冰塊包裹,,并及時送檢,。記錄回收液量(ml),至少應(yīng)回收30%~40%以上,,才能進行支氣管-肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,,BALF)分析。 5,、對BALF采集的要求:①達到規(guī)定回收的比例,;②不混有血液,,RBC<10%;③上皮細胞應(yīng)<3%,。 三,、檢測方法 ㈠ 顯微鏡檢查 1、有形成分檢查:肺泡-支氣管灌洗液細胞學(xué)檢查使用細胞離心涂片機或用離心沉淀物制成涂片,,經(jīng)H-E染色、巴氏染色,,瑞氏(Wright)或姬姆薩(Giemsa)染色后顯微鏡檢查,。包括有核細胞計數(shù)和分類、腫瘤細胞和寄生蟲檢查,。 2,、微生物學(xué)檢查:BALF含非病原雜菌較少,故其涂片檢菌的意義較大,。取BALF沉淀物進行革蘭染色與抗酸染色檢查,。 ㈡淋巴細胞亞群檢查:BALF中淋巴細胞增多超過10%時,可用單克隆抗體進行淋巴細胞亞群分析,。用流式細胞儀,、多參數(shù)分析較為準確。一般主要測定T淋巴細胞亞群,。 ㈢可溶物質(zhì)分析:包括BALF中各種蛋白,、酶類及化學(xué)成分定量分析,但應(yīng)用較少,。 四,、參考范圍:有核細胞數(shù)計數(shù)與分類:除紅細胞和上皮細胞外的所有細胞數(shù)量為(5~10)×106/L, 各種細胞百分率:巨噬細胞93%~99%,,淋巴細胞6%~8%,,偶見中性分葉核粒細胞。 五,、臨床意義 由于支氣管肺泡灌洗技術(shù)能獲得肺泡表面襯液,,因此其內(nèi)容物的檢查對下呼吸道疾病的病因、發(fā)病機理,、診斷,、評價療效和判斷預(yù)后均有重要價值。其應(yīng)用越來越廣,。 1,、肺部感染的輔助診斷:BALF可收集較大范圍的肺泡表面襯液標本,可進行原蟲,、病毒及細菌學(xué)檢查,,找出病原體。同時由于肺部感染,肺泡表面膜的滲透性增加,,BALF中的細胞數(shù)也增加,,在急性感染時,細胞數(shù)可>800×106/L,?;撔匝装Y時,BALF中性粒細胞增多,;外源性變應(yīng)原性肺泡炎時,,淋巴細胞增多。BALF直接涂片或培養(yǎng)查到細菌,,如結(jié)核分枝桿菌,、軍團菌等可直接診斷。 2,、肺部腫瘤的診斷:BALF檢查對診斷呼吸道原發(fā)性或繼發(fā)性惡性腫瘤的效果較好,,包括周圍型肺癌、彌漫性肺惡性腫瘤,、小細胞肺癌等,。但BALF檢查結(jié)果受癌類型和腫瘤大小的影響,以腺癌和肺泡癌陽性率最高,。 3,、間質(zhì)性肺部疾病的鑒別診斷:間質(zhì)性肺部疾病主要包括如結(jié)節(jié)病,外源性變應(yīng)性肺泡炎,,特發(fā)性間質(zhì)性纖維化,。①結(jié)節(jié)病患者大量輔助T淋巴細胞(CD4+T細胞)聚集在肺泡中,因此時肺泡灌洗液中有大量CD4+T細胞,,CD4+/CD8+比值增大,,IgG、IgA增高,;②外源性變應(yīng)性肺泡炎患者抑制T淋巴細胞(CD8+T細胞)大量聚集,, CD4+/CD8+的比值減小,;③特發(fā)性間質(zhì)纖維化患者BALF中主要為中性粒細胞增多,,嗜酸性粒細胞也可能增加。據(jù)此與以淋巴細胞增多為主的其它肉芽腫肺疾病鑒別,。 六,、評價與問題 ㈠ BALF一般由有經(jīng)驗的臨床醫(yī)師采集。 ㈡支氣管-肺泡灌洗技術(shù)做為一種特殊的檢查方法對某些其它肺疾患如支氣管哮喘,、成人呼吸窘迫綜合征,、彌漫性肺出血,、肺泡蛋白沉著癥等的臨床意義尚處于研究和觀察之中。 ㈢BALF檢查中細胞計數(shù)和分類包括T淋巴細胞亞群分類,,經(jīng)過多年的研究已基本標準化,,但對可溶性物質(zhì)檢查還存在某些問題,主要是灌洗液量與方法的不同,,對肺襯液稀釋程度等影響測定結(jié)果,,尚須進一步的研究。 ㈣BALF稀釋的比例判斷:由于尿素為小分子物質(zhì),,易穿過肺泡上皮孔道,,故正常肺泡上皮表面襯液的濃度與血清中的濃度是相同的,通過計算BALF中尿素與血清中尿素濃度的比率即可判斷BALF稀釋的比例,。 ㈤BALF中的蛋白質(zhì):BALF中的蛋白是血清中蛋白的2/3,主要有白蛋白,、免疫球蛋白和一些肺表面活性物質(zhì),。當肺部炎癥時滲透壓增加導(dǎo)致BALF中蛋白質(zhì)增加。
胸腔積液檢查
健康成人胸腔液在20ml以下,,在胸膜腔內(nèi)主要起潤滑作用,。在病理情況下,如胸膜毛細血管靜水壓增加或膠體滲透壓下降,,或者胸腔內(nèi)負壓和胸腔液內(nèi)膠體滲透壓增加,,均可導(dǎo)致胸腔液產(chǎn)生過多而吸收明顯減少,從而形成病理性胸腔積液(pleural effusion),,又稱為胸水,。常見的原因有胸膜或鄰近組織感染,原發(fā)性或轉(zhuǎn)移性腫瘤等,。胸腔積液檢查除傳統(tǒng)的細胞學(xué),、生物化學(xué)及微生物學(xué)檢查外,現(xiàn)已發(fā)展到應(yīng)用免疫學(xué)和分子生物學(xué)方法進一步區(qū)別積液的性質(zhì),。 一,、適應(yīng)證:膿胸、胸膜炎,、肺結(jié)核,、肺梗死、胸腔轉(zhuǎn)移或原發(fā)的惡性腫瘤,、真菌感染,、狼瘡性胸膜炎、乳糜胸,、食管穿孔,、尿毒癥性胸腔積液等,。 二、標本采集:胸腔積液標本采集是通過胸腔穿刺方法獲取,。抽取標本后要立即送檢,,以免細胞變性、破壞或出現(xiàn)凝塊而影響結(jié)果,。 三,、檢測方法 ㈠一般性狀檢查:主要包括積液的量、顏色,、透明度,、比密、凝固性等,。 ㈡顯微鏡檢查:胸水經(jīng)離心后,,取沉淀物涂片,不染色或染色(多為瑞氏染色)后在高倍鏡和油鏡下觀察各種細胞,、結(jié)晶,、寄生蟲或蟲卵等有形成分。 ㈢腫瘤細胞學(xué)檢查 1,、巴氏或H-E染色檢查:疑為惡性腫瘤性胸水時,,胸水經(jīng)離心后,取沉淀物涂片或?qū)S眉毎科x心機收集積液中的細胞,,進行染色,,仔細尋找有無腫瘤細胞。 2,、染色體檢查:胸水中惡性腫瘤細胞常存在活躍的細胞分裂,、增殖,可直接根據(jù)染色體檢查方法制片,,檢查染色體,。 3、流式細胞DNA分析:直接用可產(chǎn)生熒光的核酸染料(如碘化丙啶)對胸水中細胞進行染色,,流式細胞儀分析胸水細胞的DNA含量,、細胞周期分布和DNA倍體數(shù)。 ㈣臨床化學(xué)檢查:包括pH值,、粘蛋白定性試驗(rivalta test),、蛋白定量、葡萄糖定量,、乳酸及一些酶類(如乳酸脫氫酶,、腺苷脫氨酶等)。 ㈤免疫化學(xué)檢查:包括部分腫瘤標志物,、C反應(yīng)蛋白,、淋巴細胞亞群等檢查,。 ㈥微生物學(xué)檢查:主要為胸水細菌培養(yǎng)、直接涂片經(jīng)革蘭染色或抗酸染色后查細菌等,。 四,、參考范圍:由于健康人極難抽出胸腔液,因此參考范圍很難得到,。一般區(qū)別其為漏出液或滲出液,。 五、臨床意義 ㈠胸腔積液的一般性狀 1,、積液量可因病情不同而有很大差別,。 2、顏色及透明度:生理性胸腔液為清亮,、淡黃色液體,,病理狀況下可出現(xiàn)多種變化。由于炎癥等病變引起的滲出液(exudate)常呈深黃色,,但因病因不同,,可呈多種顏色,因含有大量細胞,、細菌、乳糜物質(zhì)或脂肪等,,所以顏色較深,,多見混濁。滲出液主要顏色有:①紅色:多為血性,,提示有創(chuàng)傷,、惡性腫瘤、肺梗死,、結(jié)核分枝桿菌感染,,或穿刺損傷出血。②乳白色混濁:積液離心后,,若上清液變清,,則混濁為細胞或碎片所致;若上清液仍混濁,,則很可能是乳糜液或假性乳糜液,。真性乳糜液因胸導(dǎo)管或淋巴管阻塞引起的;假乳糜液含有大量膽固醇或卵磷脂,。③膿樣淡黃色:見于化膿性感染,,表明有大量白細胞和細菌。④黃綠色:可能為銅綠假單胞菌感染或類風(fēng)濕病,。⑤棕色:見于阿米巴肝膿腫累及胸膜時,。⑥黑色:胸膜曲霉菌感染,。 3、胸腔積液的比密與凝固性: 漏出液(transudate)比密多在1.015以下,;滲出液因含有多量蛋白及細胞,,比密多高于1.018。漏出液中因含纖維蛋白少,,一般不易凝固,;滲出液因含有纖維蛋白、細菌及細胞裂解產(chǎn)物,,易于自行凝固或有凝塊出現(xiàn),。 ㈡胸腔積液中的顯微鏡檢查 1、紅細胞計數(shù):對滲出液與漏出液的鑒別意義不大,。積液中紅細胞>5×109/L時,,積液呈淡紅色;當>100×109/L應(yīng)考慮可能患惡性腫瘤,、結(jié)核病,、肺栓塞,或創(chuàng)傷所致,。 2,、白細胞計數(shù):胸腔積液以100×106/L為界時,80%以上漏出液低于此值,,80%以上滲出液卻高于此值,。滲出液常>500×106/L,結(jié)核性與癌性積液中白細胞通常超過200×106/L,,而化膿性積液時多達10000×106/L,。 3、白細胞分類:漏出液中細胞較少,,以淋巴細胞及間皮細胞為主,;滲出液則細胞種類較多。 ⑴ 中性粒細胞增多(大于50%),,常見于化膿性感染,、結(jié)核性胸腔積液早期、肺梗塞,、隔下膿腫等,。 ⑵ 淋巴細胞增多(大于50%):主要見于結(jié)核性、病毒性,、腫瘤,、乳糜性胸腔積液,以及風(fēng)濕性胸膜炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和尿毒癥等,;漿細胞,、淋巴細胞增多可能為骨髓瘤。非霍奇金淋巴瘤,、慢性淋巴細胞白血病與良性淋巴細胞增多的積液難以區(qū)分時,,可借助免疫細胞化學(xué)檢查或流式細胞術(shù)免疫分型作出正確判斷。 ⑶ 嗜酸性粒細胞增多(大于10%):最常見的原因是血胸和氣胸,,也見于肺梗死,、寄生蟲或真菌性感染、過敏綜合征,、藥物反應(yīng),、風(fēng)濕病、霍奇金病,、間皮瘤,、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等,可伴有夏科-萊登(Charcot-Leyden)結(jié)晶,。 4,、間皮細胞(mesothelial cell)增多:常見于漏出液中。在結(jié)核性胸腔積液,、肺氣腫,、類風(fēng)濕胸膜炎時,間皮細胞則少,。腫瘤細胞有時可與間皮細胞相似,,常需做巴氏或H-E染色或免疫細胞化學(xué)染色鑒別。 5,、寄生蟲及蟲卵:乳糜性胸腔積液中可查到微絲蚴,阿米巴性肺膿腫的胸腔積液可見到阿米巴滋養(yǎng)體,。 ㈢腫瘤細胞學(xué)檢查 1,、腫瘤細胞:在惡性積液中,巴氏或H-E染色檢查約60%可發(fā)現(xiàn)形態(tài)不規(guī)則,、細胞體大小不均,、胞核大并可見核仁、胞質(zhì)受色較深的成堆或散在分布的惡性腫瘤細胞,,易見呈腺腔樣排列的腺癌細胞,。但積液中腫瘤細胞一般較難判斷腫瘤的來源。胸腔原發(fā)性腫瘤主要是惡性間皮瘤,,發(fā)病率較低,,約為1%~4%。轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤約占95%左右,,80%左右為腺癌,,鱗癌僅占2%~3%,,淋巴瘤或白血病可占5%~11%。 2,、流式細胞DNA分析:可以研究間期細胞,,并不受細胞增殖狀態(tài)的影響,對檢測胸腔積液中的惡性細胞的有重要意義,。Huang等對71例胸腔積液做流式細胞DNA分析,,結(jié)果顯示,對惡性胸腔積液診斷的敏感性為52%,,特異性達100%,。若與常規(guī)檢查聯(lián)合應(yīng)用,則可使診斷的敏感性達到94%,。癌性胸水細胞的DNA分析可見異倍體和S期,、G2/M期細胞比例增高。 3,、染色體檢查:染色體分析主要是用于胸腔積液中轉(zhuǎn)移或原發(fā)性惡性腫瘤的診斷,,可查到染色體的數(shù)量、非整倍體和染色體結(jié)構(gòu)異常,,如斷裂,、易位等,陽性率達75%左右,。 通過涂片的細胞學(xué),、染色體和DNA倍體的聯(lián)合檢查,可極大提高對胸腔積液惡性腫瘤診斷的靈敏度和特異性,。 ㈣胸腔積液的臨床化學(xué)檢查 1,、pH值:滲出液一般偏低。pH值減低并伴有葡萄糖含量降低時,,提示炎性積液,;胸腔化膿性感染及食管破裂所致積液時,積液pH<7.0,。結(jié)核性積液pH<7.3,。pH降低還可見于風(fēng)濕病、結(jié)核,、紅斑狼瘡性胸膜炎等,。急性胰腺炎所致積液的pH>7.3,pH>7.4可見于惡性積液,。 2,、蛋白質(zhì)定性與定量:胸腔炎癥反應(yīng)時,漿膜上皮細胞在炎性反應(yīng)的刺激下使分泌的粘蛋白量增加,粘蛋白定性試驗(rivalta test)呈陽性,。一般非炎性積液(漏出液)多為陰性,。滲出液蛋白定量常超過30g/L;漏出液常低于30g/L,,以白蛋白為主,,粘蛋白定性試驗呈陰性。 3,、葡萄糖定量:生理性胸膜腔積液中葡萄糖含量與血清近似,,如出現(xiàn)積液中葡萄糖降低(<3.35mmol/L,或積液中含量/血液含量<0.5),,一般見于風(fēng)濕性積液,、積膿、惡性腫瘤性積液,、結(jié)核性積液,、狼瘡性積液或食管破裂等,以膿性積液為多見,。 4,、乳酸定量:胸膜腔積液中乳酸含量測定有助于細菌性感染和非細菌性感染積液的鑒別診斷,當乳酸高達6mmol/L以上時,,應(yīng)高度提示有細菌感染,,尤其在應(yīng)用抗生素治療后的胸水,一般細菌檢查為陰性時更有價值,。類風(fēng)濕病,、充血性心力衰竭及惡性腫瘤引起的積液中,乳酸含量也可見輕度升高,。 5,、脂類測定:如果乳糜狀的積液在離心后仍呈混濁狀,甘油三酯含量增高(>4.52mmo1/L),,膽固醇含量不高,、蘇丹III染成紅色,為乳糜性積液,,見于胸導(dǎo)管破裂,。如果乳糜狀的積液膽固醇增高(>2.59mmo1/L),,甘油三酯正常,,為膽固醇性胸水,見于陳舊性結(jié)核性胸膜炎,、惡性胸水,、肝硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。 6,、酶類測定 ⑴ 乳酸脫氫酶(LD)活性:積液LD>200U/L或與血清LD比值超過0.6,,可作為胸腔滲出液診斷的指標。在滲出液中,,化膿性積液的LD活性最高,,其次為惡性積液。胸腔積液LD活性與胸膜炎程度成正比,,LD活性降低提示炎癥消退,,而LD活性增高則表明病情惡化。 ⑵ 腺苷脫氨酶(ADA):在結(jié)核性積液中,,ADA活性明顯增高,;癌性積液ADA水平較低,漏出液最低,。如ADA>40U/L,,甚至高于100U/L時,多為結(jié)核性積液,,常見于結(jié)核性胸膜炎,。當經(jīng)抗結(jié)核藥物治療有效時,其胸水中ADA也隨之下降,,因此也能作為抗結(jié)核治療時療效觀察指標,。 ⑶淀粉酶(AMY):急性胰腺炎伴胸腔積液時,AMY可溢漏至胸水中,,而且常高于血清活性,,這對于發(fā)生劇烈胸痛、呼吸困難的胰腺炎患者的鑒別診斷尤為重要,。 ㈣ 免疫學(xué)檢查 1,、癌胚抗原(CEA):CEA是一種分子量較大的糖蛋白,當積液中CEA>20μg/L,,積液CEA/血清CEA比值>1時,,應(yīng)高度懷疑為癌性積液。 2,、補體:系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)引起的胸腔積液中,總補體活性(CH50),、C3,、C4等補體成分降低,若積液CH50或C4減低,,則SLE和RA的可能性很大,。同時,此類患者胸腔積液中免疫復(fù)合物的含量與血清中的比值>1,;而其他原因引起的胸腔積液此值<1,。 3、T淋巴細胞亞群:結(jié)核性胸水中以淋巴細胞為主(早期以中性粒細胞為主),,其中T細胞增加明顯,,T細胞中又以CD4+為主,CD4+/CD8+比值升高,。CD4+T細胞的絕對數(shù)與積液的量呈負相關(guān),,積液中CD4+、CD8+的百分數(shù)及絕對數(shù)都高于自身外周血,。而惡性胸腔積液的T細胞的含量雖也增加,,但低于結(jié)核性胸腔積液中的CD3+、CD4+,,CD4+/CD8+亦明顯降低,。故淋巴細胞亞群檢測對鑒別結(jié)核性和惡性胸腔積液有一定意義。 ㈤ 微生物學(xué)檢查 對疑為滲出液的積液,,一般需做病原生物學(xué)檢查,。懷疑細菌感染可做細菌培養(yǎng)。結(jié)核性胸腔積液,,經(jīng)離心取沉淀物涂片,、抗酸染色,鏡下可找到抗酸桿菌,?;撔詽B出液中的常見致病菌有葡萄球菌、鏈球菌,、大腸埃希菌,、脆弱類桿菌、綠膿桿菌等,,少數(shù)病例可有厭氧菌或放線菌感染,。 六、評價與問題 通過外觀,、比密,、凝固性、粘蛋白試驗及細胞計數(shù)來鑒別胸腔積液屬于滲出液或漏出液,,但有時也難以準確判斷,,臨床符合率僅約60%,遠遠滿足不了臨床需要,。70年代Light提出檢測胸腔積液和血清的蛋白質(zhì)及乳酸脫氫酶活性,,當積液LD>200U/L;積液LD/血清LD比值>0.6,,積液總蛋白/血清總蛋白比值>0.5,,三項同時存在時可以判斷為滲出液,反之為漏出液,,大大提高了臨床符合率,,但還有約5%誤診率。
呼吸系統(tǒng)感染的實驗診斷
㈠ 呼吸系統(tǒng)感染的病原學(xué)特點 1,、常見細菌感染:呼吸道細菌菌群復(fù)雜,,正常寄生和攜帶細菌種類繁多,因此痰和咽拭子所分離出來的細菌不一定都與疾病相關(guān),,有時還會因病人已接受治療,,使某些細菌培養(yǎng)、生長受到抑制,,或結(jié)果發(fā)生變異,。正常上呼吸道常見細菌有葡萄球菌、鏈球菌,、肺炎克雷伯菌,、卡他莫拉菌等,這些細菌大多為條件致病菌,,數(shù)量顯著占優(yōu)勢時,可提示有感染存在,。在院內(nèi)獲得性肺炎的病原體中,,革蘭陰性桿菌占60%以上,,以銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)最多;革蘭陽性菌約占20%,,以金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌為主,。在社區(qū)獲得性肺炎的病原體中,,以革蘭陽性球菌和流感嗜血桿菌感染為主。 2,、其他病原體感染:軍團菌,、厭氧菌、病毒,、支原體,、衣原體感染比例增加,。上呼吸道感染多為病毒感染,而且病毒的種類較多,。肺部感染多為細菌感染,,但病毒、支原體感染近年來不斷增多,,并且常出現(xiàn)細菌與病毒的混合感染。 3,、特殊病原體感染:在免疫功能低下或免疫功能缺陷患者的呼吸系統(tǒng)感染中,,真菌,、卡氏肺孢子蟲,、弓形體、結(jié)核分枝桿菌等感染較多,。 ㈡ 實驗檢查項目的選擇 1,、結(jié)合臨床癥狀,初步判斷為細菌感染還是其他病原微生物感染,;可選擇全血細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù),、血清CRP測定進行篩查。 2,、根據(jù)發(fā)病部位,、選擇適當?shù)臉吮具M行病原學(xué)檢查,如為上呼吸道感染,,應(yīng)取咽拭子或痰液為樣本進行檢查,;如為下呼吸道感染,且難以判斷病因,,可選擇肺泡灌洗液,。出現(xiàn)胸腔積液時,應(yīng)及時抽取送檢,。 3、結(jié)合臨床癥狀,,適當選擇血液學(xué),、免疫學(xué)和臨床化學(xué)檢查項目,協(xié)助對病變程度及病程的判斷及療效監(jiān)測等,。 ㈢常見呼吸系統(tǒng)感染性疾病的實驗診斷 1,、急性上呼吸道感染 急性上呼吸道感染(acute upper respiratory tract infection)是指鼻腔、咽或喉部炎癥的概稱,,是呼吸道最常見的一種急性傳染病,,70%~80%由病毒感染引起,,少數(shù)由細菌引起。主要臨床表現(xiàn)為急性鼻炎或上呼吸道卡他性咽炎和喉炎,、咽峽炎,、扁桃體炎等。 ⑴全血細胞計數(shù)與白細胞分類計數(shù)(血常規(guī)檢查或血象):病毒性感染時,,白細胞計數(shù)正常或偏低,,淋巴細胞比例升高,,有時可見異型淋巴細胞增多;細菌感染時,,白細胞計數(shù)與中性粒細胞增多,,重者血涂片中可見中性桿狀核粒細胞增多伴核左移現(xiàn)象和中性粒細胞中毒現(xiàn)象(出現(xiàn)中毒顆粒等),。急性上呼吸道感染的血象變化并無特異性,只具有輔助診斷價值,。 ⑵病原體檢查:可取痰或咽拭子做病毒或細菌培養(yǎng),、分離和鑒定,,判斷病原體的類型,,區(qū)別病毒和細菌感染。主要病毒有流感病毒,、副流感病毒,、呼吸道合胞病毒、腺病毒,、鼻病毒,、柯薩奇病毒、麻疹病毒,、風(fēng)疹病毒等,。當培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)優(yōu)勢菌或致病菌生長時,可鑒定細菌類型并進行藥敏試驗,。常見的細菌感染為溶血性鏈球菌,,其次為流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和葡萄球菌等,。 ⑶血清學(xué)診斷:可用免疫熒光法,、酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測患者血清中的感染病原體的抗體,尤其需要區(qū)別抗體的類型和測定滴度,,IgM型抗體出現(xiàn)有診斷意義,??共《究贵w的檢測簡便、快速,,比病毒培養(yǎng)鑒定更有使用價值,。 2、肺炎 肺炎(pneumonia)是肺實質(zhì)的炎癥,,以感染性肺炎最常見,,可由多種病原體引起,如細菌,、病毒,、真菌、寄生蟲等,。按病因可分為:①細菌性肺炎:如肺炎雙球菌,、葡萄球菌、溶血性鏈球菌,、肺炎克雷伯菌等,;②病毒性肺炎:如腺病毒、流感病毒等,;③支原體肺炎,;④真菌性肺炎:如白色念珠菌、曲霉菌等,;⑤其他病原體引起的肺炎:如立克次體,、衣原體,、弓形體,、結(jié)核分枝桿菌等。按發(fā)病區(qū)域可分為社區(qū)獲得性肺炎和醫(yī)院獲得性肺炎,,兩種肺炎的病原體類型有差別。 ⑴常見病原體引起肺炎的實驗診斷與臨床特點
病原體 易感因素 痰涂片革蘭染色 病原體及抗體檢查 并發(fā)癥 肺炎球菌 上呼吸道感染后,、慢性肺心病 革蘭陽性雙球菌 痰,、胸水、血培養(yǎng),,PCR 菌血癥,、膿胸,、心內(nèi)膜炎、心包炎、腦膜炎 流感嗜血桿菌 上呼吸道感染后,、慢性心肺疾病 多形性革蘭陰性桿菌 痰,、胸水、血培養(yǎng) 膿胸,、心內(nèi)膜炎 金黃色葡萄球菌 慢性疾病,、流感流行、支氣管擴張 革蘭陽性球菌 痰,、胸水,、血培養(yǎng) 膿胸、空洞 肺炎克雷伯菌 糖尿病,、酗酒,、醫(yī)院獲得性 粗大、有莢膜的革蘭陰性桿菌 痰,、胸水,、血培養(yǎng) 膿胸,、空洞 大腸桿菌 醫(yī)院獲得性多見 革蘭陰性桿菌 痰,、胸水、血培養(yǎng) 膿胸 綠膿桿菌 醫(yī)院獲得性,、囊性纖維化 革蘭陰性桿菌 痰,、血培養(yǎng) 膿胸 厭氧菌 吸入、口腔及牙齒不衛(wèi)生 混雜菌 胸水培養(yǎng),、胸腔引流物培養(yǎng) 壞死性肺炎,、膿胸 軍團菌 夏秋季、接觸污染環(huán)境,、社區(qū)或醫(yī)院獲得性 痰涂片中少量白細胞,,無細菌 痰或組織直接免疫熒光試驗,血清抗體滴度,,痰或組織培養(yǎng),,PCR 膿胸、空洞,、心內(nèi)膜炎,、心包炎 肺炎支原體 秋、冬季 痰涂片中有巨噬細胞,、白細胞,,無細菌 血清肺炎支原體抗體測定,補體結(jié)合試驗 皮疹,、大皰性鼓膜炎,、心包炎 肺炎衣原體 秋冬季 對診斷無特異性 血清衣原體IgM型抗體測定 慢性阻塞性肺病或心功能不全易并發(fā)感染 卡氏孢子蟲 AIDS,應(yīng)用免疫抑制劑、細胞毒藥物,、惡性腫瘤 對診斷無幫助 痰或支氣管灌洗液銀染色或Giemsa染色可見卡氏肺孢子蟲孢子體的包囊或滋養(yǎng)體,。 氣胸、呼吸衰竭,、成人呼吸窘迫綜合征
在社區(qū)獲得性肺炎中,,最常見的致病菌是肺炎鏈球菌,約占分離出細菌的2/3,,其他包括流感嗜血桿菌,、肺炎支原體、肺炎衣原體,、金黃色葡萄球菌,、腦膜炎奈瑟菌、卡他莫拉菌,、肺炎克雷伯菌,、軍團菌等;最常見的病毒為流感病毒,、呼吸道合胞病毒,、腺病毒等。 在醫(yī)院獲得性肺炎中,,最常見的致病菌是銅綠假單胞菌(綠膿桿菌),,其他包括金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌,、大腸埃希菌等,。對醫(yī)院獲得性肺炎至少應(yīng)從不同部位采血作兩次血培養(yǎng),陽性率一般為20%左右,。痰涂片革蘭染色在醫(yī)院獲得性肺炎的診斷中不敏感,,也無特異性;通過痰培養(yǎng)所鑒定的一般細菌并不能證明就是下呼吸道的病原菌,;分枝桿菌和一些真菌可以通過痰涂片染色和培養(yǎng)作出診斷,。 厭氧菌感染:患者通常表現(xiàn)為發(fā)熱、不適,、體重下降等,,常伴有膿臭痰的咳嗽提示厭氧菌感染。痰涂片可見大量細菌,,但普通細菌培養(yǎng)卻為陰性,。咳出的痰因被口腔菌群污染,,不適于厭氧菌培養(yǎng),。經(jīng)皮肺穿刺、胸腔穿刺或帶保護刷的支氣管鏡獲得的標本才能用于厭氧菌培養(yǎng)。 ⑵血常規(guī)檢查:細菌性肺炎有白細胞計數(shù)與中性粒細胞增高和核左移現(xiàn)象,,感染嚴重者中性粒細胞可達85%以上,,并有明顯的中毒現(xiàn)象(中毒顆粒、空泡變性,、Döhle小體等),。病毒性感染、結(jié)核感染時,,白細胞計數(shù)正?;蚱停馨图毎壤嗌?;但某些病毒感染,,如引起嚴重急性呼吸綜合征(SARS)的新型冠狀病毒感染可引起淋巴細胞明顯減低。 ⑶血氣分析:對判斷疾病的嚴重性和決定是否需要氧療有意義,。 ⑷胸腔積液檢查:對出現(xiàn)胸水的患者,,應(yīng)進行胸腔穿刺,進行胸水有關(guān)分析,,包括一般性狀,、化學(xué)成分、有形成分和微生物學(xué)檢查,,對鑒別胸水的性質(zhì),、查明病原體有意義,。
呼吸衰竭的診斷
呼吸衰竭(Respirtory failure, RF)指呼吸功能嚴重受損,,肺部不能進行有效的氣體交換,通氣和(或)換氣功能嚴重障礙,,發(fā)生缺氧伴有或不伴有體內(nèi)二氧化碳潴留,,從而引起一系列的病理生理改變和相應(yīng)的臨床表現(xiàn)的一種綜合征。參與呼吸運動過程的任何一個環(huán)節(jié)異常,,都可能導(dǎo)致呼吸衰竭,。臨床上常見的病因包括呼吸道阻塞性病變(如氣管-支氣管炎、痙攣,、腫瘤,、異物等引起的氣道阻塞)、肺組織病變(如肺炎,、肺結(jié)核,、肺氣腫、肺纖維化,、急性呼吸窘迫綜合征),、肺血管疾病(如肺動脈栓塞)和神經(jīng)中樞及其傳導(dǎo)系統(tǒng)和呼吸肌疾病(如腦血管病變,、腦外傷,、重癥肌無力)。 ㈠呼吸衰竭的分類 1,、根據(jù)動脈血液氣體分析,,呼吸衰竭分為I型和II型兩類: ⑴I型:只有低氧血癥,動脈血PaO2<60mmHg(8.0Kpa),,無高碳酸血癥(PaCO2減低或正常),,為換氣衰竭,見于急性呼吸窘迫綜合征(acute respiranary distress syndrome, ARDS)等,。 ⑵II型:低氧血癥伴高碳酸血癥,,動脈血PaO2<60mmHg、PaCO2>50mmHg(6.7 Kpa),,為通氣衰竭,,見于慢性阻塞性肺病等。 2,、根據(jù)呼吸衰竭發(fā)生的病程分為急性和慢性兩類,。 ⑴急性呼吸衰竭:呼吸功能原來正常,由于突發(fā)病因而引起通氣或換氣功能嚴重障礙,,短時間發(fā)生呼吸衰竭,,見于ARDS、急性氣道阻塞,、外傷等,。若不及時搶救,可危及生命,。 ⑵慢性呼吸衰竭:由于支氣管-肺疾病引起,,如慢性阻塞性肺病、重癥肺結(jié)核,、肺間質(zhì)纖維化,、胸廓或神經(jīng)肌肉病變等。雖有缺氧和二氧化碳潴留,,但機體可通過代償適應(yīng),。 ㈡動脈血氣分析 ⑴急性呼吸衰竭:一般為PaO2<60mmHg,但此標準并非絕對,。當PaO2<40mmHg時,,提示病情極嚴重且危及生命。 ⑵慢性呼吸衰竭:典型改變?yōu)镻aO2<60mmHg和/或PaCO2>50mmHg,,臨床上以伴有PaCO2>50mmHg的II型呼吸衰竭常見,。代償性呼吸性酸中毒時,,PaCO2升高,pH≥7.35,;失代償性呼吸性酸中毒時,,PaCO2升高,pH<7.35,?;颊咴谖鯛顟B(tài)下采血分析血氣時,PaCO2 升高,,PaO2可>60mmHg,。 ㈢電解質(zhì)紊亂和酸堿平衡失調(diào) 呼吸衰竭時,可嚴重抑制氧化代謝,,使糖酵解增加,,血乳酸增高,產(chǎn)生代謝性酸中毒,。由于細胞能量不足,,鈉泵功能障礙,出現(xiàn)高血鉀癥等,。隨著病情加重,,還可出現(xiàn)其他酸堿和電解質(zhì)失衡,應(yīng)結(jié)合臨床,、血氣分析等進行綜合分析,。 ㈣其他血液生化改變:重癥病例可并發(fā)多臟器功能衰竭,如肝,、腎功能障礙,,此時血清ALT和膽紅素,血清尿素,、肌酐可增高,;長期低氧血癥者,,血液RBC,、HGB、HCT代償性增高,,在危重患者中還可出現(xiàn)凝血功能障礙或繼發(fā)彌散性血管內(nèi)凝血(DIC),,PT、APTT延長,,D-二聚體增高等,。 ㈤微生物學(xué)檢測:如慢性呼吸衰竭合并感染,應(yīng)根據(jù)病情,,取痰或咽拭子標本進行細菌培養(yǎng)及藥敏試驗,,找出病原菌,,進行合理的抗感染治療,但應(yīng)防止使用抗生素類藥物不當造成的酸堿平衡失調(diào)加重,。
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