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葉綠體中色素的提取和分離-

 雅禮生物組集體備課資料 2009-04-15
高二生物:葉綠體中色素的提取和分離

1,、理解障礙的突破

用“遷移法”理解本課實(shí)驗(yàn)原理及方法步驟原理,。

(1)跨學(xué)科知識(shí)的遷移。

本實(shí)驗(yàn)中關(guān)于葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)就同時(shí)涉及到相關(guān)的有機(jī)物的性質(zhì),、有機(jī)溶劑的特點(diǎn),、物質(zhì)的溶解度等化學(xué)知識(shí)以及物質(zhì)擴(kuò)散等物理學(xué)知識(shí),借助于這些知識(shí),,可以更好地理解葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)的原理,。

葉綠體中色素提取的原理是:由于光合色素位于葉綠體中的囊狀結(jié)構(gòu)(繁注:即類(lèi)囊體)上,要把它提取出來(lái)必須破壞葉表皮,、細(xì)胞壁和細(xì)胞膜,、葉綠體的雙層膜,所以要剪碎后加二氧化硅研磨,,以便使色素充分被提取,。又因?yàn)槿~綠體的色素不溶于水,但可溶于有機(jī)溶劑中,,所以還要加入丙酮使色素溶解,,來(lái)提取各種色素。另外還要加碳酸鈣以保護(hù)葉綠體中的色素,,原因是加碳酸鈣以調(diào)節(jié)液體的pH,,防止葉綠素被破壞。葉綠體中的色素溶解于有機(jī)溶劑如酒精或丙酮(相似相溶),,形成色素液,。

分離的原理與四種色素在層析液中的溶解度有關(guān)。層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑,,由于四種色素的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)不同,,因此每一種色素分子在層析液分子的作用下,克服色素分子之間的引力,,向?qū)游鲆褐袛U(kuò)散的速度不同,,即在層析液中的溶解度不同,因而四種色素隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度就不同,,其中胡蘿卜素在層析液中的溶解度最高,,擴(kuò)散速度最快,其次是葉黃素,、葉綠素a,,葉綠素b溶解度最低,擴(kuò)散得最慢,。依據(jù)此原理使濾紙條上處于同一濾液細(xì)線(xiàn)上的四種色素在擴(kuò)散中分離開(kāi)來(lái),。

(2)實(shí)驗(yàn)原理知識(shí)的遷移。

學(xué)習(xí)色素的提取和分離實(shí)驗(yàn),關(guān)鍵在于對(duì)實(shí)驗(yàn)原理的理解,。實(shí)驗(yàn)的每一步都有其內(nèi)在的道理,,理解原理不僅是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵,也是理解實(shí)驗(yàn)方法步驟的關(guān)鍵,。將實(shí)驗(yàn)原理知識(shí)遷移到方法步驟中,,便于理解。

①取材時(shí)要選取新鮮的顏色較深的葉片,,是因?yàn)橐员闶篂V液中含較多的色素,;

②研磨時(shí)加入二氧化硅的目的是為了研磨得充分,更有效地破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),;但由于二氧化硅是特別細(xì)的白色粉末,,再加上控制不好用量,易過(guò)量,,使濾液中含有較多的二氧化硅,,而導(dǎo)致濾液顏色變淺。濾液中雜質(zhì)越多,,實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象越不明顯,。有實(shí)驗(yàn)證明,改用白細(xì)河沙(洗凈干燥后用)代替二氧化硅粉末,,這樣研磨更充分,,濾液中減少了雜質(zhì)的含量,顏色變得深綠,,實(shí)驗(yàn)效果明顯,。

③加入少許碳酸鈣的目的是為了防止在研磨過(guò)程中,葉綠素受到破壞,。因?yàn)槿~綠素分子結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)鎂原子,,當(dāng)細(xì)胞破裂時(shí),細(xì)胞液內(nèi)有機(jī)酸中的氫可取代鎂原子而成為褐色的去鎂葉綠素,,碳酸鈣可中和有機(jī)酸以防止去鎂反應(yīng)的發(fā)生,。

④研磨要迅速、充分,。這是因?yàn)橐皇且驗(yàn)楸菀讚]發(fā),;二是為了使葉綠體完全破裂,從而能提取較多的色素,;三是葉綠素極不穩(wěn)定,,能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而破壞。

⑤制備濾紙條時(shí),,根據(jù)小孔(邊緣)擴(kuò)散原理,,物質(zhì)分子沿邊緣擴(kuò)散速度要大于里邊擴(kuò)散的速度,,因此要將濾紙條的一端剪去兩角,主要是為了延長(zhǎng)邊緣長(zhǎng)度,,這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均勻,便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。

⑥畫(huà)線(xiàn)時(shí),,一定要細(xì)并且直,這樣可以防止色素帶重疊,,使色素分子均勻分布在一條直線(xiàn)上,,做到擴(kuò)散起點(diǎn)一致。重復(fù)劃2~3次,,是為了增加濾液細(xì)線(xiàn)上的色素分子數(shù)量,,使實(shí)驗(yàn)效果更加明顯。

⑦分離色素時(shí),,一定不要讓濾紙條上的濾液細(xì)線(xiàn)沒(méi)及到層析液,,這是因?yàn)樯匾兹芙庥趯游鲆褐校瑢?dǎo)致色素帶不清晰,,影響實(shí)驗(yàn)效果,。

2.解題障礙的突破

(1)用“類(lèi)比分析法”或“直接判斷法”解某些實(shí)驗(yàn)步驟對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響的題。

[例1]某同學(xué)在做“葉綠體中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)時(shí),,操作情況如下所述:

①將5 g新鮮完整的菠菜葉,,放入研缽中,加入丙酮,、石英砂,、碳酸鈣以后,迅速研磨,,然后按要求過(guò)濾,。

②用毛細(xì)吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線(xiàn)處小心均勻地劃出一條濾液細(xì)線(xiàn),,并連續(xù)迅速地重復(fù)劃2~3次,。

③把劃好細(xì)線(xiàn)的濾紙條插入層析液中,并不斷搖晃,,以求加快色素在濾紙條上的擴(kuò)散,。

但結(jié)果實(shí)驗(yàn)失敗,請(qǐng)指出其錯(cuò)誤所在:

(1)____________________________,;

(2)____________________________,;

(3)____________________________。

解析:用“類(lèi)比分析法”解,。對(duì)新鮮綠葉應(yīng)除去粗的葉脈后再行稱(chēng)重,,以增加單位重量葉片所含的葉綠素;此外,還需將葉盡量剪碎,,提高研磨效果,;劃濾液線(xiàn)時(shí),須待所劃的濾液線(xiàn)干燥后再重復(fù)劃線(xiàn),,否則會(huì)造成劃線(xiàn)過(guò)粗和色素濃度低的情況,;濾紙條插入層析液后,由于搖晃,,使層析液接觸濾液線(xiàn)而將色素溶解,,會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

答案:

(1)未去除粗葉脈和將葉剪碎,,降低了葉綠素的提取率

(2)上一次濾液細(xì)線(xiàn)未干燥,,即劃下一次線(xiàn),使濾液線(xiàn)過(guò)粗或線(xiàn)上色素量較低

(3)由于搖晃,,層析液接觸濾液線(xiàn),,溶解了色素

(2)用“發(fā)散思維與輻合思維結(jié)合法”解用實(shí)驗(yàn)原理進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的問(wèn)題。

所謂“發(fā)散思維”主要是指從不同方面對(duì)同一問(wèn)題進(jìn)行思維的方法,。發(fā)散思維與創(chuàng)造力有直接聯(lián)系,,是創(chuàng)造思維的中心,是測(cè)定創(chuàng)造力的重要標(biāo)志之一,。創(chuàng)造活動(dòng)的確需要進(jìn)行發(fā)散思維,,盡可能多地聯(lián)想,提出多種假設(shè)或可能的解決辦法,;然而,,創(chuàng)造過(guò)程并不到此為止,接著還要根據(jù)一定的標(biāo)準(zhǔn),,從中選擇一種最合適的辦法或經(jīng)過(guò)檢驗(yàn),,采納某一種假設(shè),這就是輻合思維了,。人的創(chuàng)造力固然要依靠發(fā)散思維,,但是在創(chuàng)造活動(dòng)中發(fā)散思維與輻合思維是緊密地聯(lián)系著的。

[例2]某同學(xué)設(shè)計(jì)一個(gè)“探索葉綠體中色素的提取和分離”的實(shí)驗(yàn),,但缺少漏斗,、試管、濾布,、直尺,、鉛筆,怎樣做才能使其提取的色素又多分離的效果又好,?請(qǐng)你幫助設(shè)計(jì)一個(gè)最佳方案,。

解析:用“發(fā)散思維與輻合思維結(jié)合法”解,。在掌握實(shí)驗(yàn)原理的基礎(chǔ)上,可以采用不同的方法來(lái)做此實(shí)驗(yàn),,進(jìn)行充分發(fā)散思維,,從中選出當(dāng)時(shí)條件下的最佳方案。
答案:

方法1:在原實(shí)驗(yàn)(葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn))步驟的基礎(chǔ)上做如下改進(jìn):

(1)第一步加入的丙酮要少些(1~2 mL),。

(2)將研磨液(稍稠糊狀)取出,,放在干凈載玻片上,用另一干凈載玻片在研磨液上平推一下,,越平越好。

(3)將濾紙條剪角端在1 cm處折180°,,將折處在研磨液平面上沾一下(要快而平),,達(dá)到畫(huà)濾液線(xiàn)效果,待干燥后可重復(fù)沾2~3次(這樣由于研磨液濃度大,,濾紙條上的色素線(xiàn)含色素多,,且簡(jiǎn)便易做)。

方法2:用粉筆分離色素

(1)按上述方法提取葉綠體色素提取液,。

(2)取一支白粉筆(干燥),,把一端(0.5 cm)豎直浸入葉綠體色素提取液中,充分吸液,,然后讓其干燥,。

(3)取一培養(yǎng)皿,注入少量95%乙醇,,把上述粉筆綠色一端豎立于乙醇當(dāng)中,,片刻,可以看到不同色素沿粉筆分離,。

【同步達(dá)綱練習(xí)】

1.在圓形濾紙的中央,,滴上葉綠體的色素濾液進(jìn)行色素分離,可看到近似同心環(huán)狀的四個(gè)色素圈,,排列在最外的一個(gè)呈

A.藍(lán)綠色

B.黃綠色

C.黃色

D.橙黃色

2.葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)主要證明了

A.色素分布在葉綠體囊狀結(jié)構(gòu)薄膜上

B.葉綠素含量是類(lèi)胡蘿卜素的四倍

C.葉綠體中色素的種類(lèi)和各種色素的顏色

D.四種色素?cái)U(kuò)散速度不同

3.某同學(xué)做“葉綠體中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn),,在下列操作中若有失誤,請(qǐng)?jiān)谑д`處劃線(xiàn)并更正:

①將5克綠葉片剪碎放研缽中,,加入少許二氧化硅和碳酸鈣,,再加2 mL石油醚,并迅速充分研磨,。

②在預(yù)備好的濾紙條上,,距剪去兩角一厘米處用鋼筆畫(huà)橫線(xiàn)。

③用毛細(xì)管吸取少量濾液,,沿橫線(xiàn)處均勻地劃出一條濾液細(xì)線(xiàn),,緊接重復(fù)劃2~3次,。

④將層析液倒入燒杯中,然后將濾紙條劃有細(xì)線(xiàn)的一端朝下,,輕輕插入到層析液中,,注意層析液最好沒(méi)及濾紙條上濾液細(xì)線(xiàn)。

更正的內(nèi)容為:

①____________________________,。

②____________________________,。

③____________________________。

④____________________________,。

若用葉色很淺的菠菜心葉做此實(shí)驗(yàn),,效果很差的原因在于_________;若用菠菜的老黃葉作實(shí)驗(yàn)材料,,經(jīng)層析后在濾紙條上分離出來(lái)了色素帶,,但是色素帶存在缺陷,缺陷是________________________________________,。

【同步達(dá)綱練習(xí)】參考答案

1,、 解析:用“直接判斷法”來(lái)解。

答案:D

2.解析:用“類(lèi)比分析法”來(lái)解,。

答案:C

3.解析:用“類(lèi)比分析法”來(lái)解,。

失誤處劃線(xiàn):

①將5克綠葉片剪碎放研缽中,加入少許二氧化硅和碳酸鈣,,再加2 mL石油醚,,并迅速充分研磨。

②在預(yù)備好的濾紙條上,,距剪去兩角一厘米處用鋼筆畫(huà)橫線(xiàn),。

③用毛細(xì)管吸取少量濾液,沿橫線(xiàn)處均勻地劃出一條濾液細(xì)線(xiàn),,緊接重復(fù)劃2~3次,。

④將層析液倒入燒杯中,然后將濾紙條劃有細(xì)線(xiàn)的一端朝下,,輕輕插入到層析液中,,注意層析液最好沒(méi)及濾紙條上濾液細(xì)線(xiàn)。

更正的內(nèi)容為:

答案:加2 mL丙酮    用鉛筆劃線(xiàn)    干燥后再劃下一次    色素線(xiàn)不能沒(méi)入層析液    色素含量太少    缺乏葉綠素

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