實(shí)驗(yàn)：綠葉中色素的提取和分離

實(shí)驗(yàn)原理：綠葉中的色素能夠溶解在有機(jī)溶劑無水乙醇中,，所以，可以用無水乙醇提取綠葉中的色素,；石油醚是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑,。綠葉中的色素在脂溶性層析液中的學(xué)期工作總結(jié)溶解度不同，擴(kuò)散速度也不同,，因而可用紙層析法分離,。

實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果：

（ 1 ）提取

提取色素首先了解色素存在的部位和性質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)色素存在于綠色植物葉肉細(xì)胞的葉綠體中,，且具有脂溶性,。因此。①選擇的材料應(yīng)是葉肉細(xì)胞（幼嫩,、色濃綠的葉片）,；②要充分研磨細(xì)胞（加二氧化硅）及細(xì)胞器——葉綠體，使葉綠體內(nèi)色素釋放出來,；③要用親脂性的有機(jī)溶劑無水乙醇（或丙酮）溶解色素,。

實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵之處！

①剪：葉片要新鮮,、顏色要深綠,，越細(xì)越好，盡量去除葉脈等部分,。
②加藥品：二氧化硅,、碳酸鈣和無水乙醇。前兩種是粉末狀藥品,，各加少許,，后者是有機(jī)溶劑，研磨時(shí)加約5ml,。二氧化硅的作用是使研磨更加充分,、迅速；碳酸鈣的作用是調(diào)節(jié)液體的pH,，防止葉綠素被破壞保護(hù)葉綠素不分解,；無水乙醇用來溶解提取葉綠體中的色素。
③磨：研磨要領(lǐng)是不能一下一下的砸,，而是要用力的壓,。研磨要迅速、充分,。這是因?yàn)橐皇且驗(yàn)闊o水乙醇容易揮發(fā),；二是為了使葉綠體完全破裂，從而能提取較多的色素；三是葉綠素極不穩(wěn)定,，能被活細(xì)胞中的葉綠素酶水解而破壞,。
④過濾：將研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一塊單層尼龍布）中進(jìn)行過濾,。將濾液收集到試管中,，及時(shí)用棉塞將試管口塞嚴(yán)。研磨液迅速倒入以及用棉塞是因?yàn)檠心ゼ拥谋苋菀讚]發(fā),。單層尼龍布是為了過濾充分,，因?yàn)槿~片的研磨有殘?jiān)?/span>

紙上的濾液細(xì)線不能浸沒到層析液中。

（ 2 ）分離

①制備濾紙條：將預(yù)備在試驗(yàn)桌上的濾紙條一端剪去兩個(gè)角使之呈梯形,。呈梯形,，根據(jù)小孔(邊緣)擴(kuò)散原理，物質(zhì)分子沿邊緣擴(kuò)散速度要大于里邊擴(kuò)散的速度,，因此要將濾紙條的一端剪去兩角,，主要是為了延長邊緣長度，這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均勻,，便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
②畫濾液細(xì)線：細(xì)，勻,，直,，濃。最好之前用鉛筆輕輕地畫一道線,，放置色素帶重疊,，用提取液反復(fù)劃好幾次，每次劃完盡量吹干,，不要弄破紙條,。用鉛筆可以劃得整齊，這樣讓每一種色素都有共同的起點(diǎn),。鉛筆而不用鋼筆是不易擴(kuò)散,。畫得越細(xì)越多次，就越濃,，越好跑,，分得開，越清楚
③層析分離葉綠體中的色素：將紙條畫有濾液細(xì)線的一端置于燒杯中的層析液中,，注意千萬不要將濾液細(xì)線浸沒在層析液中,，因?yàn)樯匾兹芙庥趯游鲆褐校瑢?dǎo)致色素帶不清晰,。層析液是揮發(fā)性較強(qiáng)的有機(jī)溶劑,，并且具有一定的毒性,，所以在操作中要盡量用培養(yǎng)皿蓋住燒杯口,。
④觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果：最后濾紙條上將分離出四條色素帶,，顏色從上往下分別是橙黃色、黃色,、藍(lán)綠色和黃綠色,，四種色素分別是胡蘿卜素、葉黃素,、葉綠素a和葉綠素b

疑難簡析

1 ,、制備濾紙條時(shí)，要將濾紙條的一端剪去兩角,，這樣可以使色素在濾紙條上擴(kuò)散均心,，便于觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2 ,、過濾時(shí)不用濾紙過濾而用單層尼龍布過濾是因?yàn)闉V紙對色素具有吸附作用,，若用其過濾，會導(dǎo)致收集到的濾液色素含量少,，使實(shí)驗(yàn)效果不明顯或失敗,。

3 、分離色素時(shí),，一定不要讓濾紙條上的濾液細(xì)線接觸到層析液,，這是因?yàn)樯匾兹芙庥趯游鲆褐校瑢?dǎo)致色素帶不清晰,，影響實(shí)驗(yàn)效果,。

4 、本實(shí)驗(yàn)要求在通風(fēng)條件下進(jìn)行,，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)及時(shí)用肥皂洗手,，因?yàn)閷游鲆褐斜哂卸拘浴?span lang=EN-US>