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生化檢測│腎功能,、肝功能、血糖,、血脂檢測臨床意義及科學(xué)研究應(yīng)用分享

 愛必信生物 2024-06-03 發(fā)布于上海

一,、背景介紹

1、腎功能檢測指標(biāo)及臨床意義

肌酐 abs580199-96T

臨床意義:血清肌酐濃度升高見于急慢性腎小球腎炎,、急性或慢性腎功能不全等,。血清肌酐濃度與肌肉量成比例,故肢端肥大癥巨人癥時(shí),,血清肌酊酐濃度升高,;相反,肌肉萎縮性疾病時(shí)血清肌酐濃度可降低。透析治療前后血清肌酐測定可用于選擇透析指標(biāo),,判斷透析治療效果,。

尿素氮(BUN) abs580197-96T

臨床意義:尿素氮是機(jī)體蛋白質(zhì)的代謝終末產(chǎn)物,是一項(xiàng)檢測腎小球的濾過功能的指標(biāo),,一般在腎功能不全的失代償期時(shí)或氮質(zhì)血癥時(shí),,血尿素氮會(huì)明顯升高。進(jìn)行該項(xiàng)指標(biāo)的測定,,主要用于診斷器質(zhì)性腎功能損害,,例如各種原發(fā)性和繼發(fā)性腎小球腎炎、多囊腎,、腎腫瘤等,,還可以作為腎衰竭時(shí)透析的評(píng)估指標(biāo)。

尿酸 abs580057-96T

臨床意義:尿酸是嘌呤代謝的終末產(chǎn)物,,人類大部分來自鳥嘌呤,,主要是經(jīng)腎小球?yàn)V過隨尿排出,腎功能減退時(shí)血清尿酸增高,。尿酸可由腎小球?yàn)V過和腎小管排泌,,但大部分被腎小管重吸收,最后僅排出濾過量的8%,。尿酸增高:嚴(yán)重腎衰竭時(shí)可有部分尿酸從腎小管排泌,,慢性尿毒癥時(shí)血清尿酸的增高程度不明顯。各種原因所致尿酸生成異常增多,,如原發(fā)性或繼發(fā)性痛風(fēng)者,,血清尿酸可顯著增高。尿酸降低常見于惡性貧血,、乳糜瀉及腎上腺皮質(zhì)激素等藥物治療后,。

2、肝功能檢測指標(biāo)及臨床意義

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT) abs580002-96T

臨床意義:人體中很多臟器都含有ALT,,其分布大致為肝>腎>心>肌肉,。肝內(nèi)ALT活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其它臟器的活性,主要存在于肝細(xì)胞質(zhì)的可溶性部分,,故測定ALT反映肝臟損害具有特殊意義,。血清ALT活性增高原因:急性病毒性肝炎,;骨骼肌,、腎臟及胰腺等組織壞死;伴有急性肝炎的傳染性單核細(xì)胞增多癥,;嚴(yán)重心肌梗塞,、心力衰竭時(shí)的肝郁血;膽道疾病、肝外癌性膽道梗阻性黃疸(如膽管癌,、胰頭癌),、膽石癥、膽管炎及膽囊炎,;應(yīng)用氯丙嗪,、異煙肼、銻劑,、奎林,、呋喃西林、利福平,、某些避孕藥,、苯巴妥、利眠寧等藥物,,以及酒精,、鉛、汞,、四氯化碳等中毒,;外科手術(shù)、麻醉,、劇烈運(yùn)動(dòng),、早期妊娠等。

谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST) abs580004-96T

臨床意義:臨床AST測定主要用于診斷急性心肌梗塞(AMI),、肝細(xì)胞及骨骼肌疾病,。AMI發(fā)作后6-8h開始升高,24h達(dá)高峰,,約3-5天恢復(fù)正常,。升高還見于肺栓塞,充血性心力衰竭,,病毒性肝炎,,中毒性肝炎,肝硬化,,肝癌(早期正常),,膽道阻塞,溶血性疾病,、骨骼肌疾病如進(jìn)行性肌營養(yǎng)不良,、皮肌炎(神經(jīng)性肌炎正常)、擠壓性肌肉損傷,,壞疽,,急性胰腺炎等,。肝炎發(fā)病早期,由于肝AST含量高,,往往血清AST/ALT>1,,但由于ALT清除較慢,所以不久ALT>AST,?;謴?fù)期一般也是ALT恢復(fù)較慢。ALT和AST持續(xù)升高,,往往是慢性肝炎的指標(biāo),。

不同類型的肝炎患者AST/ALT比值

肝臟疾病

血液AST來源形式

AST/ALT比值

急性肝炎和輕度慢性肝炎

肝細(xì)胞線粒體完整,AST主要從肝細(xì)胞胞漿內(nèi)釋放

<1

重癥肝炎,、中度和重度慢性肝炎

肝細(xì)胞線粒體遭到嚴(yán)重破壞,,AST從線粒體和胞漿內(nèi)釋放

≈1

肝硬化和肝癌患者

肝細(xì)胞的破壞程度更加嚴(yán)重,線粒體也受到嚴(yán)重的破壞

>1,,甚至>2

膽紅素  abs580147-96T

臨床意義:總膽紅素是直接膽紅素和間接膽紅素的總和,。血清總膽紅素的測定是肝、膽功能檢查中的一項(xiàng)重要檢測項(xiàng)目,。血清直接膽紅素的升高,,說明經(jīng)肝細(xì)胞處理后膽紅素從膽道的排泄發(fā)生障礙。直接膽紅素的測定有助于黃疸類型的診斷和鑒別診斷,。直接膽紅素增高:主要見于阻塞性黃疸,、肝細(xì)胞性黃疸、肝癌,、胰頭癌,、膽石癥、膽管癌等,。間接膽紅素主要是由紅細(xì)胞破壞而來,,未在肝內(nèi)經(jīng)過葡萄糖醛酸化。間接膽紅素經(jīng)過肝臟代謝又可變?yōu)橹苯幽懠t素,,隨膽汁排入膽道,,最后經(jīng)大便排出。一般情況下間接膽紅素偏高往往預(yù)示著肝臟的病變,。

白蛋白  abs580137-96T & abs580138-96T

臨床意義:白蛋白升高偶見于脫水所致的血液濃縮,。白蛋白降低與總蛋白原因大致相同。急性降低見于大量出血與嚴(yán)重?zé)齻?。慢性降低見于腎病蛋白尿,、肝功能受損、腹水形成,、腸道腫瘤與結(jié)核慢性失血,、營養(yǎng)不良和消耗性疾病等,。白蛋白如低于20g/L,,臨床可出現(xiàn)水腫,。

3、血糖檢測指標(biāo)及臨床意義

葡萄糖 abs580025-96T

臨床意義:空腹血糖升高/降低分為生理性增高和病理性增高,。生理性血糖升高:多見于飽食或高糖飲食及劇烈運(yùn)動(dòng)后或情緒緊張等,。

病理性升高:

a.糖尿病,;

b.其它內(nèi)分泌疾病如甲亢,、巨人癥或肢端肥大癥、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn),、嗜鉻細(xì)胞瘤等,;

c.肝硬化病人。生理性低血糖多見于饑餓和劇烈運(yùn)動(dòng),。

病理性低血糖:

a.對(duì)抗胰島素的激素分泌不足,,如垂體前葉功能減退、腎上腺皮質(zhì)功能減退和甲狀腺功能減退而使生長素,、腎上腺皮質(zhì)激素分泌減少,;

b.嚴(yán)重肝病患者,由于肝臟儲(chǔ)存糖原及糖異生等功能低下,,肝臟不能有效地調(diào)節(jié)血糖,。

4、血脂檢測指標(biāo)及臨床意義

甘油三酯(TG) abs580085-96T

臨床意義:現(xiàn)在認(rèn)為甘油三酯也是冠心病發(fā)病的一個(gè)危險(xiǎn)因素,,當(dāng)其升高時(shí),,也應(yīng)該給予飲食控制或藥物治療。其升高可見于各種高脂蛋白血癥,、糖尿病,、痛風(fēng)、梗阻,、黃疸,、甲狀腺功能低下、胰腺炎等,。降低:見于低脂蛋白血癥,、營養(yǎng)吸收不良、甲狀腺功能亢進(jìn),、甲狀旁腺功能亢進(jìn),,還可見于過度饑餓、運(yùn)動(dòng)等,。

總膽固醇(TC)  abs580114-96T

臨床意義:膽固醇升高容易引起動(dòng)脈粥樣硬化性心,、腦血管疾病如冠心病,、心肌梗死,腦卒中等,。但如果作為一個(gè)診斷指標(biāo)來說,,它既不夠特異,也不夠敏感,,所以不能作為診斷指標(biāo),,只能作為評(píng)價(jià)動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素,而最常用做動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防,、發(fā)病估計(jì),、治療觀察等的參考指標(biāo)。膽固醇升高:可見于各種高脂蛋白血癥,、梗阻性黃疸,、腎病綜合征、甲狀腺功能低下,、慢性腎功能衰竭,、糖尿病等時(shí)。此外,,吸煙,、飲酒、緊張,、血液濃縮等也都可使血液膽固醇升高,。妊娠末三個(gè)月時(shí),可能明顯升高,,產(chǎn)后恢復(fù)原有水平,。膽固醇降低:可見于各種脂蛋白缺陷狀態(tài)、肝硬化,、惡性腫瘤,、營養(yǎng)吸收不良、巨細(xì)胞性貧血等,。此外,,女性月經(jīng)期也可降低。

低密度脂蛋白 abs580113-96T

臨床意義:低密度脂蛋白(LDL)升高可見于家族性高膽固醇血癥,、家族性apoB缺陷癥,、混合性高脂血癥、糖尿病,、甲狀腺機(jī)能低下,、腎病綜合征、梗阻性黃疸,、慢性腎功能衰竭,、妊娠,、多發(fā)性肌瘤、某些藥物的使用等,。遺傳性高脂蛋白血癥,、甲狀腺功能低下、腎病綜合征,、梗阻性黃疸,、慢性腎功能衰竭,、Cushing綜合征等,。LDL升高是發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素之一,用于判斷是否存在患冠心病的危險(xiǎn)性,,也是血脂異常防治的首要指標(biāo),。低密度脂蛋白降低:可見于家族性無β和低β-脂蛋白血癥、營養(yǎng)不良,、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn),、消化吸收不良、肝硬化,、慢性消耗疾病,、惡性腫瘤、apoB合成減少等,。

高密度脂蛋白 abs580112-96T

臨床意義:高密度脂蛋白(HDL)主要功能是將膽固醇從周圍組織細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟,,代謝及排泄過多的膽固醇,以維持血漿正常膽固醇水平,。其被譽(yù)為抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,,是冠心病的保護(hù)因子。所以HDL水平低的個(gè)體患冠心病的危險(xiǎn)性增加,,其水平高者患冠心病的可能性小,。降低:見于急、慢性肝病,、急性應(yīng)激反應(yīng)(心肌梗塞,、外科手術(shù)、損傷),、糖尿病,、甲狀腺功能亢進(jìn)或減低、慢性貧血等,。

注:來源搜狐,,侵刪!

二,、常規(guī)腎,、肝功能檢測在科學(xué)研究中的應(yīng)用案例

2023年6月17日,,上海市第一婦嬰保健院生殖免疫科周倩主任醫(yī)生、中國科學(xué)院重慶綠色智能技術(shù)研究院于永生副研究員聯(lián)合重慶大學(xué)生物工程學(xué)院生物流變學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室馮茜副教授團(tuán)隊(duì),,在Acta Biomaterialia雜志上發(fā)表了題為“Functionalized human umbilical cord mesenchymal stem cells andinjectable HA/Gel hydrogel synergy in endometrial repair and fertility recovery”的研究論文,。他們的研究表明,負(fù)載 hUCMSCs 的可注射水凝膠具有作為促進(jìn)子宮內(nèi)膜損傷快速恢復(fù)的有效治療策略的潛力,,并且這種水凝膠是再生醫(yī)學(xué)應(yīng)用的有前途的生物材料,。

圖1 功能化人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞與可注射HA/Gel水凝膠在子宮內(nèi)膜修復(fù)和生育能力恢復(fù)中的協(xié)同作用概述

研究亮點(diǎn):

a.氧化透明質(zhì)酸(HA-CHO)/酰肼接枝明膠(Gel-ADH)水凝膠聯(lián)合人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUCMSCs)可有效改善子宮內(nèi)膜損傷大鼠模型的子宮內(nèi)膜再生;

b.hUCMSCs負(fù)載水凝膠治療通過MEK/ERK1/2信號(hào)通路促進(jìn)子宮內(nèi)膜VEGF的表達(dá),,調(diào)節(jié)炎癥因子的平衡,;

c.子宮內(nèi)膜損傷大鼠模型胚胎著床率和活產(chǎn)率均恢復(fù)至正常水平,且水凝膠治療后對(duì)母鼠,、胎兒及子代發(fā)育無不良影響,。

圖2  母鼠血清肌酐(abs580199-96T)、尿素氮,、谷丙轉(zhuǎn)氨酶,、谷草轉(zhuǎn)氨酶含量檢測評(píng)估腎和肝功能損傷情況

接下來,小愛就以腎功能檢查指標(biāo)肌酐檢測試劑盒為例,,給大家詳細(xì)介紹使用方法,。

肌酐檢測試劑盒使用方法介紹

一、試劑盒組分

組分

規(guī)格

儲(chǔ)存條件

96-Well Microplate

1 plate

Reaction Buffer

20mL×1

4℃

Enzyme

Powder×1

-20℃,,避光保存

Dye Reagent

Powder×1

-20℃,,避光保存

Standard

Powder×1

4℃

Plate Adhesive Strips

3 Strips

Technical Manual

1 Manual

二、操作步驟:

1,、材料和試劑準(zhǔn)備

自備材料:酶標(biāo)儀(可在546nm處讀取吸光值),、蒸餾水、移液器與槍頭,、研缽,、離心機(jī)、計(jì)時(shí)器等,。

Enzyme:使用前加入9 mL Reaction Buffer 充分溶解,。

Dye Reagent:使用前加入10 mL Reaction Buffer充分溶解。

Standard:使用前加入1mL蒸餾水溶解,,然后取50 μL加入到950 μL蒸餾水中,,獲得濃度為5 mmol/L的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2,、樣本處理

尿液,、血清或血漿樣本:直接檢測。

3、上樣及檢測

使用前將所有試劑加熱至室溫,,然后按照如下表格加樣,。

試劑

標(biāo)準(zhǔn)品孔

對(duì)照孔

樣品孔

Standard

10μL

-

-

Distilled water

-

10μL

-

Sample

-

-

10μL

Enzyme

90μL

90μL

90μL

Dye Reagent

100μL

100μL

100μL

混合均勻,放入37℃恒溫箱中孵育15min后,,在546nm處測定吸光值,。

注:a.對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)品,可進(jìn)行2倍連續(xù)稀釋,,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線,;

       b.對(duì)于未知的樣品,我們建議挑選幾個(gè)樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),,以確定樣品濃度和稀釋倍數(shù),。

4、標(biāo)準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)曲線僅用于參考,,每次實(shí)驗(yàn)都必須做一條新的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。

檢測范圍:0.05mmol/L-5mmol/L

溫馨提示:本公司提供的試劑盒僅作科學(xué)研究使用,,不支持臨床檢測,。

常見問題解答

Q1:試劑盒中的96-Well Microplate只有一個(gè),不夠?qū)嶒?yàn)使用怎么辦,?

A1:該試劑盒中的96孔板是免費(fèi)送的,,后續(xù)實(shí)驗(yàn)可以用常規(guī)的96孔酶標(biāo)板代替。

Q2:試劑盒操作說明書中既有標(biāo)準(zhǔn)曲線法又有公式法,,我應(yīng)該選擇哪種計(jì)算方式,?

A2:兩種方式任選一種就可以,公式是簡便算法,,建議按照標(biāo)曲計(jì)算,,會(huì)更加準(zhǔn)確。需要注意的是,,使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法,,每次實(shí)驗(yàn)必須重新繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

Q3:試劑盒一次用不完,,最長能保存多久,?

A3:試劑盒中染料(Dye)溶解后易氧化變質(zhì),需要現(xiàn)配現(xiàn)用,,不建議儲(chǔ)存,。長期儲(chǔ)存可能影響顯色讀數(shù)進(jìn)而影響檢測;如果樣本需要分批檢測,,建議分批收樣儲(chǔ)存,,待樣本收齊后統(tǒng)一檢測。此外,如因儲(chǔ)存時(shí)間過久或其他人為原因?qū)е陆M分不夠使用,,可與我司聯(lián)系單獨(dú)購買試劑盒組分,。

參考文獻(xiàn)

[1] 楊柳易,王琛.有氧糖酵解對(duì)腎臟疾病影響的研究進(jìn)展[J].中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志, 2022,23(8):744-746.

[2] Chang L, Li G, Jiang S, et al. 1-Pyrroline-5-carboxylate inhibit T cell glycolysis in prostate cancer microenvironment by SHP1/PKM2/LDHB axis[J]. Cell Commun Signal. 2024;22(1):101. Published 2024 Feb 8. doi:10.1186/s12964-024-01493-1

常規(guī)生化功能檢測試劑盒推薦:

檢測項(xiàng)目

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測范圍

肝功能

abs580002

谷丙轉(zhuǎn)氨酶 (ALT)檢測試劑盒

96T

0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

abs580004

谷草轉(zhuǎn)氨酶 (AST)檢測試劑盒

96T

0.625 μmol/mL - 20 μmol/mL

abs580137

白蛋白(BCG)檢測試劑盒

96T

1 mg/mL - 100 mg/mL

abs580138

白蛋白(BCP)檢測試劑盒

96T

0.5 mg/mL - 50 mg/mL

abs580147

膽紅素檢測試劑盒

96T

1 μmol/L - 200 μmol/L

腎功能

abs580057

尿酸檢測試劑盒

96T

0.04 mmol/L - 4 mmol/L

abs580197

尿素氮(BUN)檢測試劑盒

96T

0.05 mmol/L - 1 mmol/L

abs580199

肌酐檢測試劑盒

96T

0.02 mmol/L - 2 mmol/L

血糖

abs580025

葡萄糖檢測試劑盒

96T

0.1 mmol/L - 10 mmol/L

血脂

abs580085

甘油三酯(TG)檢測試劑盒

96T

4 μmol/L - 400 μmol/L

abs580114

總膽固醇(TC)檢測試劑盒

96T

0.05 mmol/L - 5 mmol/L

abs580113

低密度脂蛋白檢測試劑盒

96T

0.1 mmol/L - 10 mmol/L

abs580112

高密度脂蛋白檢測試劑盒

96T

0.1 mmol/L - 10 mmol/L

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