隨著第一波疫情高峰的褪去,,很多陽(yáng)康的同學(xué)也陸續(xù)恢復(fù)正常的學(xué)習(xí)和生活,。在此期間為了確定自己是否中招,同學(xué)們大多進(jìn)行了抗原和核酸檢測(cè),。那么核酸和抗原檢測(cè)的原理是什么樣呢,?新冠病毒感染與感冒、流感又有哪些區(qū)別呢,?下面我們做個(gè)簡(jiǎn)單介紹,。 1.致病的病原體不同 在癥狀表現(xiàn)上,感冒,、流感和新冠病毒感染可能都會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱,、咳嗽、頭痛等癥狀,,但這三種疾病是由不同病毒引起的: 感冒:一般由細(xì)菌,、病毒、支原體,、衣原體,、立克次氏體等病原微生物所引起,其中病毒大多為鼻病毒,、副流感病毒,、呼吸道合胞病毒、腺病毒等,。 流感:由流感病毒引起,。流感病毒屬正粘病毒科,為單股,、負(fù)鏈,、分節(jié)段RNA病毒。根據(jù)核蛋白和基質(zhì)蛋白不同,,分為甲,、乙,、丙、丁四型,。目前感染人的主要是甲型流感病毒中的H1N1,、H3N2亞型及乙型流感病毒中的Victoria和Yamagata系。 新冠病毒感染:由“2019新型冠狀病毒(2019-nCoV)”引起,。2019-nCoV是已知的第7種可以感染人的冠狀病毒,,其余6種分別是HCoV-229E、HCoV-OC43,、HCoV-NL63,、HCoV-HKU1、SARS-CoV(引發(fā)重癥急性呼吸綜合征)和MERS-CoV(引發(fā)中東呼吸綜合征),。 2.核酸,、抗原檢測(cè)是針對(duì)病毒進(jìn)行的 ⑴核酸檢測(cè):核酸是脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的總稱,廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞,、微生物體內(nèi),。而病毒核酸檢測(cè)也正是依據(jù)這一原理進(jìn)行的,利用每種病毒的核酸是不一樣的原理,,來(lái)對(duì)病毒獨(dú)特的基因序列進(jìn)行檢測(cè),。 檢測(cè)病毒特異序列的方法最常見(jiàn)的是熒光定量PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))。因PCR反應(yīng)模板僅為DNA,,因此在進(jìn)行PCR反應(yīng)前,,應(yīng)將病毒核酸(RNA)逆轉(zhuǎn)錄為DNA,。在PCR反應(yīng)體系中,,包含一對(duì)特異性引物以及一個(gè)Taqman探針,該探針為一段特異性寡核苷酸序列,,兩端分別標(biāo)記了報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán),。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收,;如反應(yīng)體系存在靶序列,,PCR反應(yīng)時(shí)探針與模板結(jié)合,DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解,,報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,,發(fā)出熒光。每擴(kuò)增一條DNA鏈,,就有一個(gè)熒光分子產(chǎn)生,。熒光定量PCR儀能夠監(jiān)測(cè)出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)(Ct值)與病毒核酸濃度有關(guān),病毒核酸濃度越高,, Ct值越小,。不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品會(huì)依據(jù)自身產(chǎn)品的性能確定本產(chǎn)品的陽(yáng)性判斷值,。 原理:在做核酸檢測(cè)時(shí),檢測(cè)儀器需要把病毒樣本基因放大到一定程度才能偵測(cè)到病毒,。如咽拭子鼻拭子取樣,,只要樣品中含有RNA(如低到10-12的摩爾濃度),然后用PCR儀器體外擴(kuò)增就行了,。 第n輪擴(kuò)增就是2的n次方,,這兒的n其實(shí)就是所謂的Ct值,全名叫Cycle threshold,,即循環(huán)數(shù)閾值,,在核酸檢測(cè)中是個(gè)很重要的概念,n的大小,,決定了擴(kuò)增多好輪病毒RNA,,擴(kuò)增的的次數(shù)也多,RNA的量越大越能引起熒光反應(yīng)(在PCR反應(yīng)體系中加入熒光物質(zhì)),。即病毒核酸濃度越高,,熒光強(qiáng)度越高,循環(huán)閾值ct越小,。 新型冠狀病毒核酸檢測(cè)時(shí),,Ct值是判斷核酸檢測(cè)陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn),可稱為循環(huán)閾值(如圖),。 檢測(cè)儀器對(duì)采集的標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測(cè)時(shí),,需要讓核酸翻倍(即擴(kuò)增,通過(guò)PCR技術(shù)),Ct值表示的就是翻了多少倍,。一般情況下,,新型冠狀病毒核酸檢測(cè)Ct值越大,說(shuō)明需要較多的循環(huán)數(shù)才能擴(kuò)增出新型冠狀病毒,,意味著病毒的含量越少,。新型冠狀病毒核酸檢測(cè)Ct值越小,需要擴(kuò)增的循環(huán)數(shù)越少,,說(shuō)明病毒的含量越高,。 新型冠狀病毒核酸檢測(cè)Ct值≥35(原先規(guī)定是>40),說(shuō)明體內(nèi)病毒含量較少或者沒(méi)有病毒存在,,基本沒(méi)有傳染性,。無(wú)Ct值或者Ct值≥35,當(dāng)然無(wú)Ct值很好理解,,就是我無(wú)論怎么擴(kuò)增都沒(méi)有病毒,,因?yàn)檫@個(gè)人壓根沒(méi)感染病毒,對(duì)于Ct值≥35,,就是說(shuō)如果核酸檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)了熒光陽(yáng)性,,但是此時(shí)是循環(huán)擴(kuò)增了35代以上,,那其實(shí)也可以歸位陰性,因?yàn)榇丝滩《据d量太小,,熒光原因是由于體外擴(kuò)增太多而引起的,。如果新型冠狀病毒核酸檢測(cè)Ct值<35,說(shuō)明體內(nèi)病毒的含量較多,,通常為陽(yáng)性,,具有較強(qiáng)的傳染性,需要進(jìn)行隔離,,以減少疾病的傳播,。 但有些時(shí)候,會(huì)出現(xiàn)假陰性,,如: 病毒入侵人體初期,,人體內(nèi)病毒量尚未達(dá)到可檢測(cè)的程度。在病毒潛伏期,、輕度癥狀,、嚴(yán)重癥狀的不同時(shí)期,人體的不同部位(如鼻咽部,、口咽部,、氣管、支氣管和肺泡)的病毒載量會(huì)存在差異,。所以,,采樣時(shí)機(jī)和采樣部位的不同,可能導(dǎo)致所采集的標(biāo)本中沒(méi)有足夠量的病毒,; 任何檢測(cè)試劑都有其檢測(cè)下限(即敏感性),,如果患者標(biāo)本內(nèi)的病毒達(dá)不到所使用試劑的檢測(cè)下限,則會(huì)出現(xiàn)假陰性,; 實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備性能和人員檢測(cè)能力差,、質(zhì)量管理落實(shí)不到位等也會(huì)產(chǎn)生假陰性,; 采樣不規(guī)范,、采集部位不當(dāng)、采集標(biāo)本不典型,,導(dǎo)致標(biāo)本中被病毒感染的細(xì)胞太少或沒(méi)有,。即可能造成假陰性。 ⑵抗原檢測(cè):抗原檢測(cè)是對(duì)標(biāo)本里是否有病毒的蛋白成分進(jìn)行檢測(cè),,通過(guò)抗原和抗體結(jié)合反應(yīng)在試紙條上檢測(cè),,一般檢測(cè)的是N蛋白,N蛋白是病毒的核衣殼蛋白,,如果標(biāo)本中有新冠病毒N蛋白,,就會(huì)和檢測(cè)板里的特異性抗體結(jié)合,,然后讓檢測(cè)線顯色。 通過(guò)以上我們可以得知,,無(wú)論是核酸檢測(cè)還是抗原檢測(cè),,針對(duì)的都是新冠病毒的基因特性。二者的主要區(qū)別是: 檢測(cè)原理不同:抗原檢測(cè)是利用帶有抗體,,并且可以發(fā)生獨(dú)特生化反應(yīng)的試紙進(jìn)行檢測(cè),,主要是通過(guò)鼻腔采集標(biāo)本。而核酸檢測(cè)則是通過(guò)熒光定量PCR,,對(duì)病毒的獨(dú)特序列RNA進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè),,可以通過(guò)鼻拭子、咽拭子等方式采集標(biāo)本,; 檢測(cè)地點(diǎn)不同:抗原檢測(cè)一般是可自行在家操作檢測(cè),,而核酸檢測(cè)則需要到當(dāng)?shù)刂付ㄡt(yī)療機(jī)構(gòu),由專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行標(biāo)本采集,; 檢測(cè)速度不同:抗原檢測(cè)一般速度較快 ,,一般15分鐘便可以明確檢測(cè)結(jié)果。而核酸檢測(cè)方法比較復(fù)雜,,出檢測(cè)結(jié)果的速度較慢,,最快可能也需要3-4個(gè)小時(shí); 結(jié)果準(zhǔn)確性不同:抗原檢測(cè)一般比較容易受外界因素影響,,而出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng),。而核酸檢測(cè)的靈敏度較高,因此其準(zhǔn)確性較抗原檢測(cè)高,。 陽(yáng)性結(jié)果:“C”和“T”處均顯示出紅色或紫色條帶,, “T”處條帶顏色可深可淺,均為陽(yáng)性結(jié)果,。 陰性結(jié)果:“C” 處顯示出紅色或紫色條帶,,“T” 處未顯示條帶。 無(wú)效結(jié)果:“C” 處未顯示出紅色或紫色條帶,,無(wú)論“T”處是否顯示條帶,。結(jié)果無(wú)效,需重新取試紙條重測(cè),。 結(jié)束語(yǔ):同學(xué)們,!即使您“陽(yáng)康”了,也不要掉以輕心,,學(xué)以致用,!請(qǐng)做好日常防護(hù),守護(hù)好自己及家人,!預(yù)防二次感染,! |
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來(lái)自: 學(xué)思踐悟必有成 > 《50~生物》