細(xì)胞培養(yǎng)中的馬血清 說起細(xì)胞培養(yǎng)用的血清,,大多數(shù)人都會想到胎牛血清,、新生牛血清,,對于馬血清卻知之甚少。今天就給大家介紹一下血清中“低調(diào)的高手”——馬血清,。 一,、馬血清作用 細(xì)胞培養(yǎng)級的馬血清,經(jīng)過多次過濾,,去除了許多大分子蛋白,但保留了血清中促細(xì)胞生長的活性因子,,表現(xiàn)出與胎牛血清和牛血清的類似的特性,,因而能用于細(xì)胞培養(yǎng)。 馬血清可以刺激成纖維細(xì)胞分化,,以及細(xì)胞外基質(zhì) (ECM) ,、細(xì)胞因子的合成。另外培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞,、誘導(dǎo)生成樹突狀細(xì)胞等實驗均可用馬血清替代胎牛血清,。 因此,馬血清通常適用于那些研究有絲分裂后,,細(xì)胞關(guān)于生長因子和激素等問題的實驗,。或許,,我們可以這樣說,,從現(xiàn)有研究來看,馬血清更適合用來研究特定種類細(xì)胞的分化,。 實際實驗應(yīng)用方面:馬血清已被用作腦皮質(zhì)神經(jīng)元-膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)的一種必添加物,;大鼠的 PC12 細(xì)胞,在培養(yǎng)過程中,,也需要在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加馬血清作為補(bǔ)充劑,。 1. 馬血清可用于細(xì)胞培養(yǎng)和干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化,例如: (1)RPMI-1640培養(yǎng)液加馬血清培養(yǎng)臍帶血單個核細(xì)胞,。 (參考文獻(xiàn):李春莉, 王建偉, 姜蓉, et al. 人參總皂苷誘導(dǎo)紅系血細(xì)胞增殖的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)[J]. 中國組織工程研究, 2009(23):4568-4572.) (2)原代培養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞,。有人用含10%馬血清的DMEM,分離培養(yǎng)BALB/c小鼠原代腦神經(jīng)細(xì)胞,。發(fā)現(xiàn)和添加2%神經(jīng)細(xì)胞生長劑B27的Neurobasal培養(yǎng)基相比,,含10%馬血清的DMEM培養(yǎng)基更節(jié)省成本,方便廉價,。 (參考文獻(xiàn):李丹, 呂耀中, 王微,等. 兩種培養(yǎng)基分離培養(yǎng)BALB/c小鼠原代神經(jīng)細(xì)胞方法的比較[C]// 中國北方實驗動物科技年會. 遼寧省實驗動物學(xué)會, 2015.) (3)誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞向成肌細(xì)胞分化 (文獻(xiàn)來源:劉杰,傅強(qiáng).馬血清在脂肪干細(xì)胞成肌誘導(dǎo)中的作用[J].中國組織工程研究, 15(14)) (4)培養(yǎng)骨髓基質(zhì)細(xì)胞,。與胎牛血清相比,馬血清對小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的促增殖作用更好,。 (文獻(xiàn)來源:王改琴. 當(dāng)歸多糖對小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞黏附分子表達(dá)及其黏附功能的影響[D]. 學(xué)位論文.重慶醫(yī)科大學(xué), 2008.) (5)添加20%馬血清的L-DMEM培養(yǎng)液可誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞,。 (文獻(xiàn)來源:趙文靜,陳亞潔,劉薇.人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究.中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志.2006.16(18):2744-2747) 2. 馬血清添加到微生物培養(yǎng)基中,,可用于培養(yǎng)微生物,,如: (1)馬血清添加到培養(yǎng)基中用于支原體的培養(yǎng)。在《獸藥典》中,,含馬血清的支原體培養(yǎng)基被用于獸用疫苗的支原體檢查,。用KM2培養(yǎng)基(含馬血清)還可培養(yǎng)豬肺炎支原體。 (文獻(xiàn)來源:胡茂志 焦新安,等.豬肺炎霉形體單克隆抗體的制備與鑒定.《中國獸醫(yī)科技》 2004年12期) (2)馬血清加入到固體和液體培養(yǎng)基中,,可用于培養(yǎng)幽門螺桿菌,。并且,和羊血清和牛血清比較,,添加馬血清的培養(yǎng)基更易于分裝和保存,。 (文獻(xiàn)來源:劉琳娜, 丁士剛, 張靜,等. 幾種培養(yǎng)幽門螺桿菌方法的比較[J]. 胃腸病學(xué), 2012, 017(004):240-241.) 3. 馬血清及激素可共同誘導(dǎo)建立家兔股骨頭缺血壞死的模型。 (文獻(xiàn)來源:洪嵩, 張?zhí)旌? 非創(chuàng)傷性股骨頭壞死模型的血液流變學(xué)及脂質(zhì)代謝[C]// 2009第一屆貴州骨科論壇.) 二,、注意事項 與胎牛血清一樣,,馬血清在使用過程中也應(yīng)注意幾個原則: 1、避免反復(fù)凍融,; 2,、三步法解凍,及時分裝,; 3,、配制好的完全培養(yǎng)基在4℃儲存不要超過7天。 還有一個大家比較關(guān)心的問題,,馬血清是否需要滅活,? 我們都知道,胎牛血清由于特殊的采血時間(5-8月胎齡),,牛胚胎體內(nèi)還沒有形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),,因而不需要采用熱滅活的手段對補(bǔ)體進(jìn)行滅活。 而馬血清,,在沒有特殊說明的情況下,,一般采自成年馬匹。作為脊椎動物,,成年馬也擁有完整的補(bǔ)體系統(tǒng),。 因而,如果所進(jìn)行的實驗中,,涉及補(bǔ)體相關(guān)內(nèi)容,,建議大家在使用前對馬血清進(jìn)行熱滅活,也可以直接購買商品化的滅活馬血清,。一些比較成功的實驗案例中,,所用到的馬血清,,也是經(jīng)過熱滅活的。 相關(guān)實驗請參考: https://www.ncbi.nlm./pmc/articles/PMC5111218/ |
|
來自: 小夢想在努力 > 《培養(yǎng)》