VhH 抗體的優(yōu)勢(shì)：

重組 VhH 抗體,，也稱為納米抗體,，是由超免疫駱駝產(chǎn)生的天然存在的僅重鏈抗體 (HCAb) 的抗原結(jié)合片段（VhH 結(jié)構(gòu)域，紅色）,。它們可以設(shè)計(jì)成單體或多聚體,、多特異性形式，具有高靶標(biāo)特異性,、納摩爾親和力和低聚集傾向,。它們也不太容易出現(xiàn)可能挑戰(zhàn)傳統(tǒng)抗體的空間位阻問(wèn)題，這使得重組 VhH 抗體非常適合一系列臨床前診斷和治療應(yīng)用,。

Rockland重組 VhH 抗體解決方案：

重組 VhH 抗體的生產(chǎn)通常需要 8 個(gè)月的時(shí)間,，包括抗原制備、駱駝免疫,、文庫(kù)構(gòu)建,、生物淘選和克隆分離、克隆驗(yàn)證和 VhH 抗體生產(chǎn),。

1.抗原制備

第 1 個(gè)月之前

Rockland使用一系列大分子作為抗原——只要它們可以在 BSL-2 條件下使用——例如蛋白質(zhì),、重組或純化的、合成肽,、修飾肽,、h aptens、全細(xì)胞裂解物,、核酸酸,、脂質(zhì)和碳水化合物復(fù)合物

2.駱駝免疫

第 1-2 個(gè)月

Rockland使用指定的免疫計(jì)劃和標(biāo)準(zhǔn)或定制佐劑在美洲駝和羊駝中產(chǎn)生 VhH 抗體。根據(jù)Rockland對(duì)抗體介導(dǎo)的免疫反應(yīng)（抗血清滴定）的監(jiān)測(cè),，可以在文庫(kù)構(gòu)建之前提供建議,。

3.VhH 圖書(shū)館建設(shè)

第 3 個(gè)月

在確認(rèn)滿意的免疫反應(yīng)后，Rockland生成了一個(gè)酵母展示庫(kù),，代表了自然循環(huán)的抗原結(jié)合 VhH 抗體的完整庫(kù),。為了確保可以在庫(kù)中找到所需的綁定屬性,，Rockland分析了大小和多樣性等關(guān)鍵參數(shù),。

4.生物淘選和克隆分離

第 4-5 個(gè)月

為了分離與感興趣的抗原結(jié)合的克隆，我們使用了我們?cè)跀?shù)十年的成功項(xiàng)目中開(kāi)發(fā)的專(zhuān)有親和選擇技術(shù),。

5.重組 VhH 抗體驗(yàn)證

第 6-7 個(gè)月

使用適合目的研究驗(yàn)證分離的單克隆,，包括在與感興趣的應(yīng)用相關(guān)的條件下表征特異性（與預(yù)期目標(biāo)結(jié)合）和交叉反應(yīng)性（與無(wú)關(guān)抗原結(jié)合）。Rockland還可以對(duì)親和力測(cè)定,、抗體對(duì)鑒定等進(jìn)行進(jìn)一步的定制驗(yàn)證,。

6.重組 VhH 抗體生產(chǎn)

第 8 個(gè)月

驗(yàn)證后,，克隆以所需規(guī)模在細(xì)菌系統(tǒng)中表達(dá),，然后以適合結(jié)合和功能研究的水平純化,。

Rockland還可以在真核系統(tǒng)中表達(dá)重組 VhH 抗體，用于定制抗體格式和/或應(yīng)用,，并在需要時(shí)使用定制信號(hào)序列或 N 端或 C 端標(biāo)簽,。

使用Rockland重組 VhH 抗體：

Rockland的重組 VhH 抗體可以很容易地設(shè)計(jì)成多特異性和多價(jià)形式，以及與效應(yīng)域（即 Fc）,、酶等的基因融合,。 

圖：結(jié)合 EGFR 陽(yáng)性 A431 細(xì)胞或 EGFR 陰性 HEK293T 細(xì)胞的重組 EGFR x DIG 雙特異性抗體（BsAb44 和 BsAb45）的流式細(xì)胞術(shù)分析。在與生物素化的 DIG 孵育或直接使用熒光偶聯(lián)的抗 His 抗體孵育后,，用熒光偶聯(lián)的鏈霉親和素檢測(cè) BsAb,。