生物緩沖劑是一種化學(xué)物質(zhì),,可以穩(wěn)定所需要范圍的PH值,,它的種類很多,PH值范圍也各不一樣,,所以廣泛運用各大實驗當(dāng)中,,添加緩沖劑之后可以改變實驗中的酸堿性,這對實驗?zāi)芊癯晒ζ鹬陵P(guān)重要的作用,。其實生物緩沖劑在1996年之前,,還沒有被廣泛使用,傳統(tǒng)的緩沖液PH值不能有效緩沖高于PH7.5 因此設(shè)限于很多應(yīng)用之中,。 1996年Norman Good 博士研究出了兩性離子緩沖劑,,這些緩沖液可以有效地解決傳統(tǒng)緩沖液中遇到的一些問題,因為此次研發(fā)的一些列生物緩沖液都比較接近我們的生理PH值,,并且對細胞無毒,、不會通過細胞膜吸收,。其中HEPES和PBS是比較常用的兩種緩沖劑。
HEPES緩沖劑與PBS緩沖劑的對比: 有效PH值范圍 HEPES:6.8-8.2 PBS:5.8-8.0 對細胞的作用 HEPES:對細胞無毒性,,在使用HEPES緩沖系統(tǒng)時,,可以看到最大的細胞密度和活力。 PBS:對細胞無毒性,, PBS 中稀釋的細胞培養(yǎng)樣品可能會無意中降低細胞活力。 與金屬離子的關(guān)系 HEPES:不與金屬離子產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀物,。 PBS:會與某些金屬離子產(chǎn)生絡(luò)合物或沉淀物,。 冷凍條件下的變化 HEPES:溶液冷凍條件下不會對PH值產(chǎn)生變化。 PBS:溶液冷凍條件下會導(dǎo)致 pH 值發(fā)生明顯變化,。 基于上述幾點不難看出,,HEPES緩沖液對比PBS緩沖液,具有一定的優(yōu)勢,,HEPES也是細胞培養(yǎng)緩沖劑中的不二之選,。 |
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