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生化檢驗結(jié)果審核之項目不同方法學(xué)影響因素

 文進玲玉 2021-08-06

生化檢驗結(jié)果審核之

生化項目不同方法學(xué)的影響因素

上周我們其他同事就自動復(fù)查的內(nèi)容進行了分享,,對日立生化分析儀分析參數(shù)進行設(shè)置,可以根據(jù)不同醫(yī)院的自身需求,對某個或某幾個檢測項目,,個性化的設(shè)置自動復(fù)查規(guī)則,,減輕人工復(fù)查的壓力,提高自動化檢測的能力,。除了自動復(fù)查外,,其實檢驗結(jié)果的審核更多的是需要我們按照一定的流程和思路去分析和判斷,。本次日立課堂為大家?guī)砩Y(jié)果審核中不同方法學(xué)的影響因素

項目

方法

檢驗原理

注意事項

TP

雙縮脲法

樣品與雙縮脲試劑作用,,樣品中蛋白的肽鍵與銅離子形成藍紫色螯合物。通過測定藍紫色的吸光度求得樣品中總蛋白的含量,。

1,、血漿標本不適宜用血清的參考范圍(血漿含纖維蛋白)        

2、脂濁產(chǎn)生正干擾,,嚴重溶血及黃疸是有干擾

ALB

溴甲酚綠(紫)

樣品中的白蛋白與溴甲酚綠結(jié)合形成青色,。測定青色的吸光度可求得樣品中白蛋白的濃度。

1,、BCG為酸堿指示劑,,PH3.8-黃色,PH5.4-藍綠色,,保證試劑中緩沖體系準確的PH及足夠緩沖容量是本法的關(guān)鍵,。 

2、BCP較少使用,,且需要使用人源質(zhì)控品,,但它最低檢測限更低,靈敏度好,。

ALT

IFCC法,,速率

當樣本與底物酶液及a-KG溶液混合,L-丙氨酸和a-酮戊二酸通過樣本中ALT的催化反應(yīng),,生成丙酮酸和谷氨酸,,丙酮酸在乳酸脫氫酶和NADH的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)槿樗幔诖送瑫rNADH被氧化成NAD,,通過測定還原型的NADH在340nm處吸光度的下降速率,,即可求得樣本中的ALT活性。

1,、大多試劑不含磷酸吡哆醛(P5P),,含P5P結(jié)果偏高,但含P5P更合理,。

2,、 試劑1成分內(nèi)如無NADH,并不是真正的雙試劑,因為它無法避免體內(nèi)α-酮酸的干擾,,結(jié)果比對時可能會出現(xiàn)偏差,。  

3、紅細胞內(nèi)ALT含量時血清中3-5倍,,溶血有干擾

AST

IFCC法,,速率

L-天門冬氨酸 + a-酮戊二酸      ALT          谷氨酸 +  草酰乙酸                           草酰乙酸  +  NADH  +  H          LDH         蘋果酸  +  NAD

同ALT

T-BIL

重氮法,酶法,,釩酸氧化法

在PH=3附近時使樣品中的表面活性劑與釩酸相互作用(有加速劑),,則樣品中的總膽紅素會被氧化為膽綠素。這時膽紅素特有的黃色就會減少,,因此只要測定釩酸作用前后的吸光度差,,即可求得樣品中的總膽紅素的濃度

1、結(jié)合膽紅素包括(β/γ/δ),,δ一般體內(nèi)很少,,氧化法時無法氧化,CB比較復(fù)雜,,是很難標準化的主要原因   

2,、 非結(jié)合膽紅素是α膽紅素(未與葡萄糖醛酸結(jié)合)

D-BIL

釩酸氧化法

在PH=3附近時使樣品與釩酸相互作用,則樣品中的總膽紅素會被氧化為膽綠素,。這時膽紅素特有的黃色就會減少,,因此只要測定釩酸作用前后的吸光度差,即可求得樣品中的總膽紅素的濃度 

同上TBIL

 CK

IFCC法

樣品中加入含有CP,、ADP,、葡萄糖、HK,、G-6PDH等的酶液,,在樣本中CK的作用下生成腺苷-5-三磷酸(ATP)。生成的ATP與酶液中含有的葡萄糖及HK作用而生成的葡萄糖-6-磷酸又受到G-6-PDH的作用被氧化,,與此同時,,NADH被還原成NADPH,導(dǎo)致340nm處的吸光度增加。測定該NADPH的生成速度,,即可求得樣本中的CK活性,。。

1,、 MG離子作為激活劑,,Ca會抑制CK活性,所以很多試劑內(nèi)含有EDTA,,存在交叉污染時,,會使得CA低MG高,。但和光試劑的配方?jīng)]有EDTA,MG是有的

2,、 和光試劑DK模式,,使得溶血干擾很少。紅細胞本身是不含CK的,,輕度溶血干擾少,,但中重度溶血時因釋放AK,ATP,G6PD等會影響結(jié)果,和光試劑R1會將這些物質(zhì)中和,,減少干擾,。               

3、有資料顯示,,生理鹽水稀釋會導(dǎo)致CK活性增加,,建議用已知濃度的血清稀釋

AMY

IFCC法

在GOOD緩沖液(PH7.6)中,,BG5P在淀粉酶的作用下,,加水分解成BG3和ρ-硝基苯-α-麥芽糖。Ρ-硝基苯α-麥芽苷在葡萄糖淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的作用下,,游離出ρ-硝基苯酚的生成速度即可得到樣本中淀粉酶的活性值,。(五糖)

1、 試劑中鈣離子和氯離子是AMY的激活劑,,和光試劑不詳

2,、和光采用5糖,國內(nèi)一般采用的都是7糖,,結(jié)果無法比對的原因,。

以上就是本次日立小課堂的內(nèi)容,希望可以給各位老師在工作中帶來幫助,,也歡迎各位老師留言,,告訴我們您想了解的內(nèi)容。

日立診斷  未來可期

作者:權(quán) 國強 

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