重點：轉(zhuǎn)基因陽性小鼠與野生型小鼠交配 TG × WT

這里說的轉(zhuǎn)基因,，并非廣義上的所有的基因修飾，而是特指外源基因隨機(jī)地整合到小鼠染色體上獲得的隨機(jī)插入轉(zhuǎn)基因小鼠,。

通過受精卵顯微注射的方式,，通常我們會獲得很多個帶有外源基因插入的首建鼠（Founder）。每一個首建鼠,，外源基因插入的位置或次數(shù)都是不同的,。所以每個首建鼠都應(yīng)該自成一系，也就是我們說的建系。

每一個 Founder 鼠分別與野生型（WT）小鼠（比如,，常用的C57BL/6J）交配,，獲得的 F1子代；經(jīng)過鼠尾基因型鑒定后,，F(xiàn)1代中的陽性小鼠保留并再與野生型小鼠交配,，獲得 F2子代；F2代陽性小鼠保留再與野生型小鼠交配,，獲得 F3子代,；以此類推。一個 Founder 鼠產(chǎn)生的子代,，稱為一個系,。一般以 Founder 鼠的編號命名，比如：3號 Founder 獲得的后代陽性小鼠,，稱為 3系,。

F1代中可能出現(xiàn)一窩小鼠沒有一只是陽性的情況。這是由于外源基因的整合可能發(fā)生在多細(xì)胞期,，導(dǎo)致 Founder 小鼠中并不是所有細(xì)胞（包括生殖細(xì)胞）都有外源基因的整合,，而是呈嵌合狀態(tài)。先別急著扔掉這個 Founder 鼠,，因為它仍然有可能是個陽性的 Founder,，可以再試著多配幾窩。除非你的 Founder 鼠多到用不完... Lucky you,！

還有幾點需要引起注意,！

Founder 鼠之間不能相互交配。

通常轉(zhuǎn)基因小鼠的基因型鑒定方法只能判斷有無外源基因的整合（即陽性或陰性）,，并不能判斷某特定位點的純合或雜合,。

陽性子代小鼠之間也不建議相互交配。

基因型陽性并不等于表達(dá)陽性,，所以交配到F2代以上,，還需要對每個系中的部分小鼠進(jìn)行外源基因表達(dá)的檢測，篩選到符合實驗要求的轉(zhuǎn)基因系,。