“胡,,starbase是干嘛的?” “不就是預(yù)測miRNA與mRNA結(jié)合的數(shù)據(jù)庫嘛,?!?/p> “還有呢?” “,。。。,。,。?!?/p> 相信大家都聽說過starbase,,很火,是的,,連實驗外包公司都用它,,能不火嘛!但是你對它真正了解多少呢,?好啦,,下面我們就來系統(tǒng)的介紹一下它。首先,,官網(wǎng)地址要知道:http://starbase./ starbase是從高通量的CLIP-Seq實驗數(shù)據(jù)和降解組實驗數(shù)據(jù)中搜尋micorRNA靶標,,提供了各式各樣的可視化界面去探討microRNA的靶標,包含了miRNA-mRNA,、miRNA-lncRNA,、miRNA-circRNA、miRNA-ceRNA和RNA-protein等的調(diào)控關(guān)系,??偠灾摂?shù)據(jù)庫從多維測序數(shù)據(jù)中識別出超過110萬個miRNA-ncRNA,,250萬個miRNA-mRNA,,210萬個RBP-RNA和150萬個RNA-RNA相互作用,它還提供了進行miRNA,,lncRNA,,假基因和mRNA的存活和差異表達分析的平臺。 根據(jù)官網(wǎng)地址,,打開后主頁面如下: 根據(jù)其菜單欄模塊多少就能知道該數(shù)據(jù)庫內(nèi)容極其豐富,,下面小編就幾個常用的模塊來簡單介紹一下該數(shù)據(jù)庫的用法。 1. miRNA-Target 預(yù)測miRNA的靶基因,。該模塊提供miRNA-mRNA,、miRNA-lncRNA、miRNA-pseudogene,、miRNA-circRNA和miRNA-sncRNA的相互作用網(wǎng)絡(luò),,這里我們以miRNA-mRNA為例,展示如何根據(jù)特定的miRNA預(yù)測與其結(jié)合的mRNA,,具體操作如下圖所示,。 以hsa-let-7a-5p為例,,通過左側(cè)面板進行具體設(shè)置。比如我們搜索人體內(nèi)該miRNA的結(jié)合靶標時,,進行如下設(shè)置即可,。其中mammal代表哺乳動物,CLIP Data可以調(diào)整支持CLIP-seq實驗的次數(shù)以控制預(yù)測的嚴格性,,Program Number選擇實驗數(shù)目,,Predicted Program可以選擇使用哪些預(yù)測軟件來進行預(yù)測: 提交后結(jié)果如下: 點擊上圖基因NAP1L1所在行TargetScan列的,可以看到TargetScan預(yù)測的hsa-let-7a-5p與基因NAP1L1的具體結(jié)合位點,。 點擊AgoExpNum處的52,,可以看到測序類型、來源及參考等信息,。 接下來我們可以點擊基因GNG5所在行的Pan-Cancer所在列的數(shù)字6 可以發(fā)現(xiàn)has-let-7a-5p與靶基因GNG5在6個腫瘤疾病中呈負相關(guān)性,。 當我們想知道某一miRNA是否和某一具體mRNA是否有結(jié)合時,可以同時輸入miRNA和mRNA信息,,如下圖,,提交即可 下圖可以看到hsa-let-7a-5p與ACTB存在結(jié)合位點,但只有軟件microT證實,。 當然,,我們也可以根據(jù)某一特定mRNA來預(yù)測與其結(jié)合的miRNA,如圖所示,,輸入過程同上,,只是microRNA一欄空置不要輸入,結(jié)果如下,,紅色方框即為與目的基因ACTB結(jié)合的所有miRNA,。 2. Degradome-RNA 提供了一種分析RNA降解模式的綜合方法,針對miRNA介導的降解片段進行測序,,篩選鑒定miRNA調(diào)控的靶基因,,準確性更高。包含2個子模塊,,即miRNA-mRNA和miRNA-ncRNA,。這里我們以miRNA-mRNA為例,分析miRNA定向切割的靶標,。 具體操作方法如1,,這里我們以hsa-let-7a-2-3p為例,進行后續(xù)分析,。提交后結(jié)果如下: 以基因PTMA所在行為例,,點擊GeneID列的 ENSG00000187514,可以鏈接至基因PTMA的ENSEMBL數(shù)據(jù)庫,。點擊CleaveEventNum列的數(shù)字2,,可以顯示hsa-let-7a-2-3p切割PTMA的2個具體位點,。 點擊CleaveExpNum的數(shù)字4,,發(fā)現(xiàn)有4項證據(jù)證明hsa-let-7a-2-3p在chr2:232576622-232576622[+]處切割,,圖中可以看到該結(jié)論在同一項研究內(nèi)的HeLa細胞和K562細胞均被證實。 3. RNA-RNA 可全面預(yù)測候選ncRNA及其靶標之間的RNA-RNA相互作用。主要包括sncRNA-RNA ,、lncRNA-RNA、mRNA-RNA,、pseudogene-RNA及miRNA-RNA5個模塊,。具體方法如1,按需輸入即可,。 4. ceRNA-Network 該模塊提供3個子模塊,,即mRNA-ceRNA、lncRNA-ceRNA和pseudogene-ceRNA,。分別用于通過競爭性結(jié)合microRNA來可視化mRNA,,lncRNA,轉(zhuǎn)錄的假基因及其親本基因之間的串擾,。 5. RBP-Target 該模塊為目前可用的各種細胞類型提供了最完整的RBP-ncRNA相互作用,。該模塊有5個子模塊,包括RBP-mRNA,、RBP-lncRNA,、RBP-pseudogene、RBP-circRNA 及RBP-sncRNA,。結(jié)合shRNA篩選數(shù)據(jù)和確切的RBP-RNA相互作用,,我們系統(tǒng)地探索了K562和HepG2細胞系中敲除RBP時RBP靶標的反應(yīng)。以RBP-mRNA相互作用為例,,探索一下有多少RBP可以調(diào)節(jié)mRNA-TP53,。具體操作同上,均是點點點,,只不過我們這里“RBP” 參數(shù)下輸入“all”,,“target”參數(shù)下輸入“TP53”,然后提交即可,。具體結(jié)果解釋同上,。 好啦,今天就先介紹到這里,。其實這個數(shù)據(jù)庫整體操作起來并不難,,當我們不明白具體什么意思時盡可以點點點,放心,,電腦不會壞,。 |
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