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拮抗劑（antagonist）與受體結合后本身不引起生物學效應,，但阻斷該受體激動劑介導的作用,。根據(jù)是否可逆性地與結合到受體的激動劑發(fā)生競爭，拮抗劑可以分為兩類,。 拮抗劑分類 從區(qū)別競爭性拮抗和非競爭性拮抗角度看,，競爭性拮抗劑的效應可以被增加激動劑濃度所對抗,，而非競爭性拮抗劑的效應不能被增加激動劑對抗；競爭性拮抗劑能提高ED50值,，而非競爭性拮抗劑不能,。 競爭性拮抗劑 藥物與受體有親和力但不產(chǎn)生受體激動效應，可以阻止激動劑與該受體的結合,。在激動劑濃度固定時,，提高可逆性競爭性拮抗劑的濃度可以逐漸抑制激動劑產(chǎn)生的反應。在達到一個高濃度時,，拮抗劑可以完全阻止反應的發(fā)生,。反之，足夠高濃度的激動劑能夠移去一定濃度的拮抗劑的作用,，仍然可以達到最大效應Emax,。因為拮抗作用是競爭性的，拮抗劑的存在使得激動劑要達到一個特定的反應高度時,，需要提高濃度，這就使激動劑濃度-效應曲線平行右移,。還有一些拮抗劑除了具有阻止激動劑與受體的結合以外,，還能夠抑制受體的固有活性。從治療學角度看,，這種競爭性拮抗具有的意義為：①競爭性拮抗劑的抑制程度依賴于拮抗劑的濃度,。根據(jù)進入體內(nèi)的藥物濃度調(diào)節(jié)用藥量，對產(chǎn)生需要的治療效應是有意義的,。②對一種拮抗劑的臨床反應取決于與受體結合的激動劑的濃度,。 非競爭性拮抗劑 結合到受體蛋白上與激動劑結合位點不同的部位，阻止激動劑引起受體激動的藥物,。在量效關系曲線圖上,，非競爭性拮抗通常降低反應曲線的坡度和高度，也引起一定程度的反應曲線右移,。能夠結合到受體蛋白有別于激動劑結合部位的藥物,，通常被稱為變構調(diào)節(jié)劑變。構調(diào)節(jié)劑能夠改變受體功能,，但不激動受體,，苯二氮卓類藥物是一個典型例子 。 腫瘤壞死因子（TNF）超家族蛋白是一系列免疫細胞互相協(xié)調(diào)的關鍵蛋白,。這個家族中的許多成員都成為了腫瘤免疫治療的標靶,。今天我們要說的TNFR2也是其中之一。 TNFR2的表達與結構TNFR2,，也叫CD120b或者p75,，全名為 Tumor necrosis factor receptor 2,，是腫瘤壞死因子（TNF）受體超家族成員，能夠通過富含細胞半胱氨酸的結構域結合腫瘤壞死因子（TNF）,。 TNFR2是單程跨膜糖蛋白,，由439個氨基酸組成，其中前235個氨基酸形成包含四個富含半胱氨酸基序的胞外結構,，30個氨基酸形成跨膜結構域,，后174個氨基酸形成具有TRAF2結合位點的胞內(nèi)結構[1]。 TNFR2蛋白由TNFRSF1B基因編碼,。人TNFRSF1B基因位于1號染色體1p36.22,。小鼠同源基因Tnfrsf1b位于小鼠4號染色體。 TNFR2的表達僅限于抑制性免疫細胞,，尤其是調(diào)節(jié)性T細胞（Tregs）,，髓系抑制性細胞(MDSCs)，內(nèi)皮細胞和生長過程中的選擇神經(jīng)元,。此外,，TNFR2也在腫瘤細胞中表達[2-4]。 TNFR2/TNF信號TNFR2是TNF的受體之一,。TNF有兩種結構相關但功能不同的受體,，TNFR1（p55）和TNFR2（p75）。與TNFR1主要負責TNF介導的細胞凋亡和死亡,、誘發(fā)促炎反應不同,，TNFR2雖然也能與可溶性sTNF結合，但與跨膜mTNF親和力更高,，且僅被mTNF完全激活并觸發(fā)有效的信號轉(zhuǎn)導,，行使細胞存活和免疫抑制相關功能[5]。 在癌細胞和免疫抑制細胞中,，當mTNF與TNFR2結合激活信號時,，TNFR2通過激活NFκB誘導激酶（NIK）誘導NFκB的非規(guī)范性激活，進一步導致IKKα磷酸化和p100的加工,，也是p52/RelB的核易位的關鍵步驟,。TNFR2還招募TRAF2-cIAP1-cIAP2復合物。cIAP具有泛素連接酶活性,，可以抑制caspases和其他凋亡誘導因子,，從而激活規(guī)范性和非規(guī)范性NF-κB/Rel和MAPK信號通路。TNFR2信號分別通過RIPK1和Etk進行信號傳導,。RIPK1通過IkB激酶（IKK）復合物觸發(fā)NF-κB,，這使IL-2的表達被激活，以及與細胞存活和增殖正相關的幾個基因的轉(zhuǎn)錄增加,。TNFR2介導的Etk磷酸化能部分激活VEGFR2,，進而激活了PI3K/Akt信號途徑,，不僅維持細胞存活并增強增殖，還招募Etk形成參與細胞粘附,、遷移,、存活和增殖的TNFR2-Etk-VEGFR2復合物。此外,，它還會增強STAT5的磷酸化,，這對免疫抑制具有關鍵作用[2,6,7]。
TNFR2與TregTreg是一種典型的免疫抑制細胞,，通過抑制效應T細胞增殖和細胞因子生成,，從而抑制過度的免疫反應并維持免疫穩(wěn)態(tài)。與人類Treg一樣,，小鼠胸腺CD4 + CD25 + Treg和外周CD4 + CD25 + Treg相對于CD4 + CD25 – Teff效應細胞均具有高水平的TNFR2表達,，而TNFR1幾乎檢測不到[7]。研究表明,，TNF/TNFR2信號對于在炎性環(huán)境中維持FOXP3表達以及小鼠Treg的穩(wěn)定性至關重要,。當TNFR2信號被激活時，會增強Treg的穩(wěn)定性,、對TCR刺激的響應,、擴增以及功能。能促進Treg和效應T細胞產(chǎn)生IL-2,，并提高Treg對IL-2的敏感性。 IL-2可以抑制Th17細胞分化以及TNFR2信號轉(zhuǎn)導對Treg的作用,。 在炎性條件下,，膜結合型受體mTNFR2可能脫落為可溶型受體sTNFR2，sTNFR2中和TNF并阻礙IL-6的表達[3],。
TNFR2與自身免疫性疾病Treg的功能缺陷以及數(shù)量低下是各種自身免疫性疾病的主要特征,。因此，恢復適當?shù)墓δ苄訲reg利于誘導免疫耐受已成為治療自身免疫性疾病的主要目標,。如上文所述,，TNFR2激動劑具有增強Treg增殖和活化的作用。在包括T1D,、SLE,、IBD和MS在內(nèi)的多種人自身免疫性疾病中都發(fā)現(xiàn)了TNF-TNFR信號通路的受損。如T1D患者的TNFR2+ Treg更高,。 在使用TNFR2激動型抗體治療T1D的研究中發(fā)現(xiàn)了TNFR2激動劑可以殺死致病性自身反應性CD8 T細胞,，這表明誘導TNF-TNFR2途徑是選擇性殺死自身反應性T細胞的有效方法[8]。
TNFR2與腫瘤免疫治療TNFR2除了維持Treg增殖和穩(wěn)定的作用以外,，還起著癌基因的作用,。目前已在至少25種腫瘤中確定了TNFR2的表達，如人類腎細胞癌,、多發(fā)性骨髓瘤,、結腸癌、卵巢癌,、皮膚T細胞淋巴瘤（CTCL）等[4,7],。腫瘤微環(huán)境會狡猾地招募具有高免疫抑制力的TNFR2+ Treg細胞，從而促進腫瘤免疫逃逸,。轉(zhuǎn)移性黑素瘤患者中的Treg細胞TNFR2基因表達上升與CD8細胞毒性T細胞耗盡有關,。TNFR2基因敲除小鼠對腫瘤表現(xiàn)出增強的免疫應答，腫瘤生長放緩,。這可能是由于缺乏TNFR2+ Treg,，或未能發(fā)展出全身性自身免疫，或MDSC數(shù)量減少和功能受損[4],。因此,，利用TNFR2拮抗劑抑制Tregs，恢復腫瘤免疫應答并消除腫瘤,，成為了腫瘤免疫治療的又一策略,。
體外研究表明，TNFR2拮抗型抗體可以抑制卵巢癌細胞以及與腫瘤相關的Treg的增殖[9],；晚期Sézary綜合征中表達TNFR2的腫瘤細胞可以被TNFR2拮抗型抗體消除,，同時TNFR2拮抗型抗體還殺死了TNFR2+ Treg，通過抑制Treg擴增Teff將Treg/Teff比調(diào)節(jié)至正常水平[4],。
 TNFR2人源化小鼠模型（TNFRSF1B-HU）的建立、驗證與應用品系全名 C57BL/6J-Tnfrsf1bem2(hTNFRSF1B)Smoc 目錄號 NM-HU-190010 基因名 Tnfrsf1b 品系描述 利用CRISPR/Cas9基因編輯技術,，自主研發(fā)TNFR2人源化小鼠模型,，將小鼠Tnfrsf1b基因替換為人源TNFRSF1B基因，從而表達人TNFR2蛋白,，取代小鼠內(nèi)源Tnfr2蛋白的表達,。 TNFR2人源化小鼠模型（TNFRSF1B-HU）的表達驗證
TNFR2人源化小鼠模型（TNFRSF1B-HU）在藥效評價中的應用
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