細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率受多種因素影響,，主要因素有下面幾個(gè)：
1．轉(zhuǎn)染試劑
      不同細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率通常不同,，但細(xì)胞系的選擇通常是根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要,，因此在轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)前應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求和細(xì)胞特性選擇適合的轉(zhuǎn)染試劑。每種轉(zhuǎn)染試劑都會提供一些已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株列表和文獻(xiàn),，通過這些資料可選擇最適合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的轉(zhuǎn)染試劑,。當(dāng)然，最適合的是高效,、低毒的轉(zhuǎn)染試劑,，如Entranster試劑。

2．細(xì)胞狀態(tài)
      一般低的細(xì)胞代數(shù)（<50）能確?；蛐筒蛔?。最適合轉(zhuǎn)染的細(xì)胞是經(jīng)過幾次傳代后達(dá)到指數(shù)生長期的細(xì)胞，細(xì)胞生長旺盛,，最容易轉(zhuǎn)染,。細(xì)胞培養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室中保存數(shù)月和數(shù)年后會經(jīng)歷突變，總?cè)旧w重組或基因調(diào)控變化等而演化,。這會導(dǎo)致和轉(zhuǎn)染相關(guān)的細(xì)胞行為的變化,。也就是說同一種系的細(xì)胞株,，在各實(shí)驗(yàn)室不同培養(yǎng)條件下，其生物學(xué)性狀發(fā)生不同程度的改變,，導(dǎo)致其轉(zhuǎn)染特性也發(fā)生變化,。因此，如果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染效率降低,，可以試著轉(zhuǎn)染新鮮培養(yǎng)的細(xì)胞以恢復(fù)最佳結(jié)果,。

3．轉(zhuǎn)染方法
      不同轉(zhuǎn)染試劑有不同的轉(zhuǎn)染方法，但大多大同小異,。轉(zhuǎn)染時(shí)應(yīng)跟據(jù)具體轉(zhuǎn)染試劑推薦的方法,，但也要注意，因不同實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的細(xì)胞性質(zhì)不同,，質(zhì)粒定量差異,，操作手法上的差異等，其轉(zhuǎn)染效果可能不同,，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體條件來確定最佳轉(zhuǎn)染條件,。

4．載體構(gòu)建
      轉(zhuǎn)染載體的構(gòu)建（病毒載體，質(zhì)粒DNA,，RNA,，PCR產(chǎn)物，寡核苷酸等）也影響轉(zhuǎn)染結(jié)果,。病毒載體對特定宿主細(xì)胞感染效率較高,，但不同病毒載體有其特定的宿主，有的還要求特定的細(xì)胞周期,，如逆轉(zhuǎn)錄病毒需侵染分裂期的宿主細(xì)胞,，此外還需考慮一些安全問題（如基因污染）。除載體構(gòu)建外,，載體的形態(tài)及大小對轉(zhuǎn)染效率也有不同的影響,，如前面提到的超螺旋及線性DNA對瞬時(shí)和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的影響。如果基因產(chǎn)物對細(xì)胞有毒性作用,，轉(zhuǎn)染也很難進(jìn)行,，因此選擇組成或可調(diào)控，強(qiáng)度合適的啟動(dòng)子也很重要,，同時(shí)做空載體及其它基因的相同載體構(gòu)建的轉(zhuǎn)染正對照可排除毒性影響的干擾,。