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注射劑變更滅菌工藝為較常見的補(bǔ)充申請(qǐng)，當(dāng)前的申報(bào)資料顯示存在如下幾種最常見的變更形式：1,、由除菌過濾工藝變更為終端滅菌工藝,；2、將殘存概率法滅菌工藝變更為過度殺滅法滅菌工藝,；3,、由流通蒸汽滅菌變更為殘存概率法或過度殺滅法滅菌工藝。按照《已上市化學(xué)藥品變更研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》,，上述變更可能對(duì)藥品安全性、有效性和質(zhì)量可控性產(chǎn)生較顯著的影響,，屬于Ⅲ類變更,，需進(jìn)行全面的研究和驗(yàn)證工作。 本文分析了近期滅菌工藝變更申請(qǐng)中的常見問題,，并提出了相應(yīng)建議,，供研究者參考,。 問題1：未結(jié)合藥物的理化性質(zhì)對(duì)滅菌工藝進(jìn)行全面的研究 如：對(duì)某些穩(wěn)定性較好，能夠耐受過度殺滅法滅菌的品種,，申請(qǐng)人仍采用殘存概率滅菌工藝,。某些對(duì)溫度比較敏感的品種，部分申報(bào)資料僅按照變更后的滅菌條件提供了工藝驗(yàn)證資料,，未提供滅菌條件的篩選信息,，包括確定F0值的控制范圍、降解雜質(zhì)的控制情況,。另外在工藝篩選時(shí),，未結(jié)合滅菌柜驗(yàn)證的情況考察熱點(diǎn)溫度對(duì)樣品的影響。 建議：目前較多申請(qǐng)人根據(jù)《關(guān)于發(fā)布化學(xué)藥品注射劑和多組分生化藥注射劑基本技術(shù)要求的通知》（國食藥監(jiān)注[2008]7號(hào)）的要求,，對(duì)注射劑提出滅菌工藝變更申請(qǐng),。 申請(qǐng)人可參考?xì)W盟液體產(chǎn)品滅菌決策樹，并結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)設(shè)計(jì)滅菌條件,。選擇何種滅菌工藝,，首先應(yīng)取決于被滅菌產(chǎn)品無菌保證水平以及藥物的熱穩(wěn)定性，而非其他因素,，如包裝材料等,。只要條件允許，應(yīng)首選過度殺滅滅菌工藝,，主要是因?yàn)樵摴に嚨臒o菌保證安全性非常高,，對(duì)工藝全過程的控制要求相對(duì)較低，只要該藥品是嚴(yán)格按照GMP的要求組織生產(chǎn),，即可確保無菌保證值達(dá)到≤10-6,，而不必?fù)?dān)心裝載的生物負(fù)荷和耐熱性。殘存概率滅菌工藝則是從滅菌前微生物污染控制和滅菌過程控制兩方面入手,，使得滅菌F0值較低的情況下也能確保達(dá)到藥典規(guī)定的無菌保證水平,。 通常情況下，當(dāng)產(chǎn)品的熱穩(wěn)定無法耐受過度殺滅工藝時(shí),，可選擇殘存概率滅菌工藝,，并且通過對(duì)處方工藝（包括滅菌工藝）的優(yōu)化（某些產(chǎn)品可采用加入抗氧劑、工藝中充氮等方式）,，最大限度地提高產(chǎn)品滅菌F0值,，確保無菌保證水平，同時(shí)也最大限度地降低藥物的熱降解,。當(dāng)然,，也需注意到，某些產(chǎn)品在提高滅菌溫度但縮短滅菌時(shí)間后，產(chǎn)生的雜質(zhì)可能會(huì)有所降低,。所以,，需結(jié)合藥物的具體情況，考察和評(píng)價(jià)所選滅菌程序?qū)λ幬镔|(zhì)量的實(shí)際影響,。 另外,，應(yīng)該注意到，滅菌柜內(nèi)不同位置的溫度并非完全一致,，而是存在一定差異,，在對(duì)滅菌柜進(jìn)行驗(yàn)證時(shí)需要對(duì)冷熱點(diǎn)的溫差進(jìn)行控制，如：控制腔室平均溫度與冷點(diǎn)溫度不超過2.5℃或者最高溫度與冷點(diǎn)溫度不超過2.5℃等,。因此,，滅菌柜內(nèi)不同位置處的F0值存在波動(dòng)范圍。例如：如果選擇滅菌條件為121℃,，8分鐘,，腔室最高溫度與冷點(diǎn)溫度差異2.5℃，在保證冷點(diǎn)F0值為8時(shí),，按最大溫差計(jì)算,，熱點(diǎn)溫度為123.5℃，則熱點(diǎn)處的F0值則會(huì)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出8,。在無菌保證滿足要求的前提下,，上述溫差對(duì)熱穩(wěn)定產(chǎn)品影響不大，但對(duì)熱敏感品種則可能產(chǎn)生顯著影響,。因此,，在進(jìn)行工藝研究時(shí)則需關(guān)注熱點(diǎn)滅菌條件對(duì)藥物的影響程度，并研究篩選得到產(chǎn)品的F0值適應(yīng)范圍（即,，設(shè)計(jì)空間）,；在進(jìn)行熱分布和熱穿透等滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，需注意熱點(diǎn)的F0值應(yīng)在上述適應(yīng)范圍之內(nèi),。同時(shí)在工藝驗(yàn)證或者抽樣檢驗(yàn)時(shí),，對(duì)熱敏感產(chǎn)品，也應(yīng)注意對(duì)熱點(diǎn)樣品進(jìn)行取樣檢驗(yàn),。上述研究實(shí)際上也體現(xiàn)了質(zhì)量源于設(shè)計(jì)（QBD）的理念,。 當(dāng)前申報(bào)資料顯示申請(qǐng)人在對(duì)某些熱敏感藥物進(jìn)行滅菌工藝篩選時(shí)，僅針對(duì)最終選擇的滅菌溫度進(jìn)行了考察,，未考察其他溫度條件下對(duì)產(chǎn)品的影響,。 案例1：某葡萄糖輸液，采用115℃30min滅菌條件,，文獻(xiàn)資料顯示滅菌柜內(nèi)不同部位樣品的5-羥甲基糠醛存在較大差異,，其中熱點(diǎn)處樣品的5-羥甲基糠醛超標(biāo),，提示其滅菌條件篩選或者滅菌柜控制存在缺陷。某申報(bào)資料未考察熱點(diǎn)對(duì)該產(chǎn)品的影響,，也未說明工藝驗(yàn)證抽樣檢驗(yàn)時(shí)的取樣位置，不清楚是否對(duì)熱點(diǎn)處樣品進(jìn)行了檢驗(yàn),。 問題2：滅菌工藝驗(yàn)證與工藝研究信息不一致 如：變更后的滅菌工藝參數(shù)（如F0值范圍或熱穿透試驗(yàn)冷點(diǎn)的F0值）超出滅菌工藝篩選研究的最大F0值,，而工藝篩選時(shí)顯示該最大F0值對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性影響顯著，無法采用,。某些申報(bào)資料顯示采用殘存概率滅菌工藝,，但熱穿透試驗(yàn)F0值有時(shí)能夠大于18、19,，而穩(wěn)定性試驗(yàn)樣品取樣均未說明取樣點(diǎn)的F0值情況,，所提供資料不能反映滅菌工藝變更的合理性。 建議：F0值隨著時(shí)間和溫度而累積,，而藥物的降解也隨著時(shí)間和溫度而累積,，這意味著升溫和冷卻程序的變化可影響殺滅時(shí)間，影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性,，不當(dāng)?shù)纳郎睾?或冷卻可能會(huì)對(duì)F0值存在較明顯的影響,。因此，對(duì)于某些熱敏感產(chǎn)品,，應(yīng)將升溫與降溫速率作為重要參數(shù)進(jìn)行控制,，使滅菌工藝始終符合設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)。 案例2：某維生素類注射劑,，原為流通蒸汽滅菌工藝,，現(xiàn)申請(qǐng)將滅菌工藝變更為121℃，10分鐘,，屬于殘存概率滅菌工藝,，工藝研究顯示不耐受過度殺滅法。滅菌工藝驗(yàn)證資料顯示存在如下問題：1,、熱點(diǎn)F0值最高大于40,，冷點(diǎn)的F0值也大于12，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出殘存概率的滅菌范圍,，未考察產(chǎn)品是否可耐受該滅菌條件,。2、未抽取熱點(diǎn)樣品,，進(jìn)行檢驗(yàn),。 問題3：提交的滅菌工藝驗(yàn)證資料不全面 如：未提供空載熱分布的試驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果，或僅提供了最小裝載條件的驗(yàn)證數(shù)據(jù)和結(jié)果,，未提供滿載條件下的試驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果,；僅提供一批樣品的數(shù)據(jù),，未提供三次驗(yàn)證的數(shù)據(jù)以及圖譜；驗(yàn)證試驗(yàn)所用熱電偶只提供了試驗(yàn)前校驗(yàn)結(jié)果,，未提供試驗(yàn)后的比對(duì)結(jié)果,；滿載熱分布試驗(yàn)未提供試驗(yàn)用樣品的信息，多規(guī)格品種驗(yàn)證不全面,，只提供個(gè)別規(guī)格的試驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果,；未說明生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗(yàn)運(yùn)行的次數(shù)，生物指示劑是否放置冷點(diǎn)處,等,。 建議：空載熱分布試驗(yàn)是滅菌設(shè)備驗(yàn)證的基礎(chǔ)性試驗(yàn),主要考察設(shè)備性能參數(shù),，考察滅菌過程中滅菌柜各個(gè)不同位置的溫差狀況，最高溫度和最低溫度的最大波動(dòng)數(shù)據(jù),，冷點(diǎn),、次冷點(diǎn)和熱點(diǎn)、次熱點(diǎn)的位置,，為下一步的滿載熱試驗(yàn)提供數(shù)據(jù)支持,。同一個(gè)滅菌工藝應(yīng)至少完整地連續(xù)運(yùn)行三次，以證明滅菌設(shè)備的均勻性和重現(xiàn)性,。 裝載熱分布試驗(yàn)方案需根據(jù)空載熱分布試驗(yàn)的結(jié)果制定,，考察和確定裝載情況下滅菌腔室內(nèi)溫度分布的均勻性，即裝載物是否對(duì)腔室熱分布產(chǎn)生特別影響,，導(dǎo)致出現(xiàn)冷點(diǎn)和熱點(diǎn),。應(yīng)至少進(jìn)行滿載條件下的熱分布試驗(yàn)。對(duì)熱分布產(chǎn)生影響的主要原因是產(chǎn)品的數(shù)量和物理形狀,，采用純水代替某些真實(shí)的水溶液產(chǎn)品從風(fēng)險(xiǎn)管理角度是可以接受的,，但包裝形式應(yīng)與驗(yàn)證品種包裝形式相同，多個(gè)規(guī)格的品種可采用括號(hào)法以合理減少試驗(yàn)運(yùn)行次數(shù),，即選擇最小規(guī)格和最大規(guī)格的產(chǎn)品進(jìn)行試驗(yàn),。應(yīng)至少連續(xù)運(yùn)行三次完整的滅菌程序。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)的冷點(diǎn)或熱點(diǎn)為熱穿透試驗(yàn)需要重點(diǎn)考察的位置,。 案例3：某產(chǎn)品的提交的滅菌工藝驗(yàn)證資料不全面,，未提供空載熱分布試驗(yàn)資料。本品熱分布和熱穿透試驗(yàn)為最小裝載,，未提供滅菌釜的生產(chǎn)能力,，未進(jìn)行滿載條件下熱分布和熱穿透試驗(yàn)，未進(jìn)行冷點(diǎn)和熱點(diǎn)的考察和確定,。 問題4：熱穿透試驗(yàn) 如：熱穿透試驗(yàn)未考慮品種,、規(guī)格、裝載方式和數(shù)量,，或用其他品種,、規(guī)格,、包裝形式代替所申報(bào)品種，未提供數(shù)據(jù)支持替代樣品與申報(bào)品種熱穿透無差異性,。熱穿透試驗(yàn)的溫度探頭放置位置不符合要求,，未進(jìn)行容器冷點(diǎn)的確定。 建議：應(yīng)根據(jù)滿載熱分布試驗(yàn)的結(jié)果制定熱穿透試驗(yàn)方案,。熱穿透試驗(yàn)的目的是獲取滅菌柜內(nèi)不同位置的樣品在滅菌過程中實(shí)際達(dá)到的溫度和F0值,，從而獲取不同位置的樣品之間的溫度和F0值數(shù)據(jù)，并且掌握樣品內(nèi)的溫度和F0值與日常生產(chǎn)運(yùn)行時(shí)滅菌設(shè)備記錄的溫度和F0值之間的差異,。 由于不同品種以及包裝容器的熱穿透性存在差異，熱穿透試驗(yàn)一般應(yīng)采用擬申報(bào)的品種進(jìn)行,，并明確樣品的批號(hào),、批量和裝載方式。如滿載熱分布試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)有冷點(diǎn)或熱點(diǎn),，通常應(yīng)重點(diǎn)采集該位置的熱穿透數(shù)據(jù),。 在熱穿透試驗(yàn)中，溫度探頭應(yīng)插入待滅菌產(chǎn)品中,，插有溫度探頭的樣品的放置位置應(yīng)包括熱分布試驗(yàn)確定的冷點(diǎn)和熱點(diǎn),。熱穿透試驗(yàn)還需關(guān)注溫度探頭的安放方式，滅菌過程的最大F0值,、最小F0值,、平均F0值等。 容器中冷點(diǎn)的確定,，容器的冷點(diǎn)是滅菌過程中灌封液體容器中最低F0 的部位,。采用冷點(diǎn)建立滅菌程序的方法是一個(gè)比較保守的方法，因?yàn)樗僭O(shè)容器中所有的微生物都聚集在冷點(diǎn),，且冷點(diǎn)位置的溫度下滅菌,。在熱穿透試驗(yàn)之前，首先需要進(jìn)行容器的測繪,，目的是測定灌入液體的容器中最冷點(diǎn),。對(duì)于大容量注射劑，冷點(diǎn)位于產(chǎn)品幾何中心和縱軸的底部,，此冷點(diǎn)需要確認(rèn),。在小容量注射劑，冷點(diǎn)的定位并不典型,，因?yàn)槿芤荷郎氐乃俾蕩缀跖c滅菌器相同,。冷點(diǎn)的位置也受容器方位的影響。當(dāng)容器旋轉(zhuǎn)或搖擺時(shí),，可能找不到可辨別的冷點(diǎn),。 作為小容量注射液,，如有充分的依據(jù)，其熱分布和熱穿透可同時(shí)進(jìn)行,。 案例4：某申請(qǐng)人同時(shí)申報(bào)了十來個(gè)不同產(chǎn)品的注射劑變更滅菌工藝,，但申報(bào)資料均采用了其中一個(gè)產(chǎn)品的熱穿透試驗(yàn)，未提供數(shù)據(jù)證實(shí)替代樣品與申報(bào)品種的熱穿透性無差異,。 問題5：滅菌前藥液的微生物限度控制要求 采用殘存概率滅菌工藝時(shí),，未對(duì)滅菌前藥液進(jìn)行微生物限度控制，未考察污染微生物的耐熱性,?；蚪⒘宋⑸锵薅瓤刂茦?biāo)準(zhǔn)，但檢查的方法不規(guī)范,，或者未將此標(biāo)準(zhǔn)作為最差條件進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn),。 建議：對(duì)殘存概率滅菌工藝而言，產(chǎn)品滅菌前污染微生物量及污染微生物的耐熱性是確定滅菌工藝是否保證足夠無菌保證水平的關(guān)鍵因素,。應(yīng)制定微生物中間控制標(biāo)準(zhǔn),，包括滅菌前微生物的污染量和污染菌耐熱性標(biāo)準(zhǔn)，滅菌前樣品的取樣應(yīng)涵蓋整個(gè)生產(chǎn)灌裝的過程,，包括灌裝開始,、中間和結(jié)束階段，同時(shí)應(yīng)注意所抽樣品應(yīng)與待滅菌樣品在同樣的條件下進(jìn)行存放,。 按照目前的技術(shù)要求,，對(duì)于采用終端滅菌工藝的產(chǎn)品，如采用過度殺滅滅菌法,，在驗(yàn)證工作中應(yīng)該重點(diǎn)關(guān)注熱分布和熱穿透的考察,，如采用殘存概率滅菌法，除了考察熱分布和熱穿透以外,，還應(yīng)該關(guān)注微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)和滅菌前微生物負(fù)荷的控制,。 問題6：微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn) 如：抗生素、含抑菌劑的品種未考慮品種的抑菌性而直接接種于品種中進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)性試驗(yàn),。 建議：微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)的形式通常為將生物指示劑定量加入產(chǎn)品中,，制備成帶有確定數(shù)量微生物孢子的受試產(chǎn)品，將產(chǎn)品安放在滅菌設(shè)備內(nèi)的特定位置,，以盡可能低的滅菌參數(shù)（接近擬定的滅菌參數(shù)的低限）運(yùn)行滅菌程序,，對(duì)受試產(chǎn)品進(jìn)行無菌檢查，通過計(jì)算確定受一定程度微生物污染的產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物的殘存概率,。為了對(duì)液體裝載的生物指示劑進(jìn)行確認(rèn),，在密封的、灌封液體的容器和密封件上要接種適當(dāng)?shù)纳镏甘緞˙I）,。液體介質(zhì)可以是產(chǎn)品或適當(dāng)?shù)拇闷?。如果液體產(chǎn)品含有防腐劑或其他抗生素成分,，它們有抑制微生物生長的作用，可能有必要用液體替代品作為懸浮劑,。使用何種產(chǎn)品作為懸浮劑需要有試驗(yàn)數(shù)據(jù)的支持,，證明它們不抑制微生物的生長。 應(yīng)明確微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)所采用的生物指示劑的來源,、種類,、規(guī)格（D值與菌數(shù)量）、試驗(yàn)結(jié)果,，應(yīng)說明試驗(yàn)中所采用的生物指示劑的耐熱性及數(shù)量對(duì)滅菌工藝是否構(gòu)成必要的挑戰(zhàn),。生物指示劑的耐熱性應(yīng)大于生產(chǎn)環(huán)境和產(chǎn)品中常見污染菌的耐熱性。應(yīng)根據(jù)熱穿透試驗(yàn)的結(jié)果設(shè)計(jì)試驗(yàn)方案,。若熱穿透試驗(yàn)證明不同位置的產(chǎn)品間,、不同裝載量間、不同裝量規(guī)格間的熱穿透特性有顯著差異,，應(yīng)至少選擇滅菌F0值最低的位置、裝載量和裝量規(guī)格（即最差條件）進(jìn)行微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn),。 案例5：某復(fù)方電解質(zhì)葡萄糖注射液變更滅菌條件,，工藝驗(yàn)證時(shí)未說明生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗(yàn)運(yùn)行的次數(shù)，生物指示劑是否放置冷點(diǎn)處,。 問題7：質(zhì)量研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 如：未關(guān)注同品種或同類品種國內(nèi)外質(zhì)控要求的進(jìn)展,。 建議：變更滅菌條件多數(shù)情況下使藥物面臨更苛刻的環(huán)境，可能導(dǎo)致雜質(zhì)增加,、顏色加深等,。另一方面，隨著生產(chǎn)條件以及質(zhì)控要求的提高,，國內(nèi)外藥典對(duì)某些產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也有所提高,，需關(guān)注同品種或同類品種國內(nèi)外質(zhì)控要求的進(jìn)展，同時(shí)應(yīng)結(jié)合相關(guān)指導(dǎo)原則,，完善對(duì)產(chǎn)品的質(zhì)控要求,。 案例6：某乳酸左氧氟沙星注射液補(bǔ)充申請(qǐng)變更滅菌工藝，由于上市較早,，原注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)有關(guān)物質(zhì)控制相對(duì)簡單,。國內(nèi)外現(xiàn)行版藥典中與氧氟沙星以及左氧氟沙星相關(guān)的品種對(duì)雜質(zhì)控制要求進(jìn)行了提高，制訂了多種已知雜質(zhì),、其他雜質(zhì)和總雜質(zhì)的限度,。應(yīng)對(duì)國內(nèi)外藥典中左氧氟沙星有關(guān)物質(zhì)方法進(jìn)行比較，并按雜質(zhì)指導(dǎo)原則的要求,，在有關(guān)物質(zhì)檢查項(xiàng)對(duì)結(jié)構(gòu)已知的特定雜質(zhì),、結(jié)構(gòu)未知的特定雜質(zhì),、非特定雜質(zhì)以及總雜質(zhì)進(jìn)行分別控制。 問題8：穩(wěn)定性試驗(yàn) 如：穩(wěn)定性試驗(yàn)未對(duì)關(guān)鍵指標(biāo),，如有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行考察,，或在申報(bào)資料中未提供具體數(shù)據(jù)，不能充分反映變更前后樣品的質(zhì)量和穩(wěn)定性變化情況,，不能支持工藝變更的合理性以及滅菌工藝控制的可靠性,。 建議：作為提高滅菌溫度的補(bǔ)充申請(qǐng)，建議選取在熱點(diǎn)滅菌的產(chǎn)品進(jìn)行穩(wěn)定性考察,。設(shè)置穩(wěn)定性研究考察項(xiàng)目時(shí),，需選擇能靈敏反應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量變化的檢查項(xiàng)目，如：含量,、pH值,、顏色、有關(guān)物質(zhì),、無菌等檢查項(xiàng)目,。 問題9：未關(guān)注滅菌溫度對(duì)包裝容器的影響 如：變更滅菌條件后未關(guān)注塑料包裝是否可耐受新的滅菌條件。 建議：應(yīng)該注意到,，對(duì)藥品來說,，包裝應(yīng)具備以下四種特性：保護(hù)作用、相容性,、安全性與功能性,。當(dāng)前申請(qǐng)人多僅關(guān)注了相容性，而忽視了其他特性,。某些塑料包裝無法耐受115℃或121℃的滅菌條件,，在變更滅菌條件后，需關(guān)注包裝材料是否可滿足新的滅菌條件,。 案例7：某碳酸氫鈉注射液,，變更滅菌條件，采用玻璃包裝,，未進(jìn)行相容性試驗(yàn),。美國藥典同品種已明確優(yōu)先選擇中性玻璃，且美國同品種的玻璃容器均為中性玻璃,，但是近期也因玻璃質(zhì)量問題出現(xiàn)兩起召回事件,，均為部分藥瓶內(nèi)含有顆粒物。因此即使采用中性玻璃,，仍應(yīng)進(jìn)行藥液與玻璃的相容性試驗(yàn),。 案例8：某注射液變更滅菌條件后采用121℃±1℃、15分鐘滅菌，但所用塑料包材的適應(yīng)性溫度為115℃30分鐘,，二者不相吻合,。 問題10：其他 應(yīng)該注意到，《已上市化學(xué)藥品變更研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》還列舉了其他幾種Ⅲ類變更形式：包括：①用不同操作原理的滅菌柜替代原滅菌柜,。②變更滅菌柜的藥品裝載量和裝載方式,，且超出原驗(yàn)證的范疇。③變更除菌過濾過程的濾材種類或孔徑,。④使用不同容量的凍干設(shè)備替代原凍干設(shè)備,，或增加不同容量的凍干設(shè)備，新的凍干設(shè)備與原凍干設(shè)備的操作參數(shù)和總的生產(chǎn)時(shí)間有改變,。上述變更同樣可能對(duì)藥品安全性,、有效性和質(zhì)量可控性產(chǎn)生較顯著的影響，需進(jìn)行全面的研究和驗(yàn)證工作,。 |
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