1,、在產品質量穩(wěn)定的條件下，均能滿足121℃,，8分鐘和115℃,，30分鐘，哪個條件應該優(yōu)先選擇呢,？

【答】在不考慮產品理化質量穩(wěn)定性情況下,，理論上述兩種條件達到的F0值幾乎相等，無所謂優(yōu)選哪個,。但實際生產中,，還要考慮滅菌器內產品中熱穿透的情況，滅菌器內不同部位的產品實際獲得的F0值的差異,，不同滅菌批次間產品的F0的差異等,。應該選擇熱分布差異小，產品F0值差異較小的滅菌工藝,。

2,、10ml、20ml注射劑,，采取相同的滅菌方式是否合適,？

【答】同品種10ml、20ml注射劑，可以采取相同的滅菌方式,，但應進行熱穿透試驗,，考察不同體積樣品的熱穿透是否有一致，同時考慮采用的滅菌方式應能保證大體積產品的無菌保證水平,。

3,、同品種按照歐盟決策樹的要求，不能達到121℃,，15分鐘滅菌,，可選擇F0≥8的殘存概率法。請問,，若產品能達到121℃,，12分鐘滅菌，是否就不能選擇121℃,，10分鐘,，同樣，能達到10分鐘,，就不能選擇8分鐘,，都是F0≥8的情況。

【答】從微生物殺滅的數(shù)學模型可知,，在初始污染相同的情況下,，滅菌F0值越大，無菌保證水平越高,。因此,，顯然為降低產品殘留微生物的風險，盡量選擇高的F0值是順理成章的,。

4,、決策樹中殘存概率法是否亦優(yōu)先選擇121℃的溫度條件？

【答】不一定,，要根據(jù)產品的穩(wěn)定性確定,，如果采用更高溫度和更短的時間能滿足殘存概率法時，可能比較低溫度,，更長時間的滅菌條件對產品更有利,。如果產品不能耐受121℃的高溫，則可以降低溫度,，并保證微生物的殘存概率小于10^-6,。

5、選擇最高無菌保證水平的滅菌工藝,，可能會與產品的質量，如有關物質、穩(wěn)定性等方面有沖突,，如何平衡這一矛盾,？另外，國外上市的是粉針劑,，國內申報時是否還需要進行滅菌工藝的選擇研究,？

【答】實際上，在進行滅菌工藝選擇研究過程中就應該進行不同滅菌條件下樣品質量變化的研究,，選擇滅菌工藝的過程也是平衡無菌保證水平和（樣品質量）理化指標的過程,，在產品有臨床需求的情況下，滅菌工藝的選擇應以其自身能達到的最高無菌保證水平為原則,。對國外上市的粉針劑,，國內申報時也應對其采用粉針劑型進行研究，如主藥確系對熱,、對水分不穩(wěn)定,，則可以采用與國外相同的粉針劑；如果主藥不是對熱,、對水分不穩(wěn)定,，則應根據(jù)主藥的性質選擇無菌保證水平高的劑型。

6,、對熱不穩(wěn)定藥品（如蛋白質類,、生物制品等），應該直接進行無菌生產工藝的驗證,。

【答】對熱不穩(wěn)定藥品（如蛋白質類,、生物制品等），首先應對采用的無菌工藝進行研究,，是采用除菌過濾 無菌生產工藝,，還是采用無菌組裝工藝；然后再對無菌工藝進行驗證,。

7,、是否在產品注冊申報時就已形成本產品的完整的工藝規(guī)程中規(guī)定的各項參數(shù)的驗證？

【答】藥品注冊管理辦法規(guī)定,，申請人在申報“藥品注冊申請表”后,，經藥品審評中心審評符合規(guī)定的，通知申請人向藥品認證管理中心申請生產現(xiàn)場檢查,，現(xiàn)場檢查目的是確認核定生產工藝的可行性,，同時抽取1批樣品，并規(guī)定樣品的生產應當符合GMP要求,。由此可見,，申報產品注冊時，應對用于正式上市產品生產的工藝有足夠的認識。這種認識是建立在產品和工藝開發(fā),，擴產,、設備和系統(tǒng)的驗證以及驗證批的生產整個過程上的。驗證批的目的是要證明在規(guī)定的工藝參數(shù)的范圍內,，工藝過程能始終生產出合格的產品來,。因此，在進行驗證批生產前,，應已充分了解并能控制工藝中各種關鍵的可變因素,。

8、在進行滅菌工藝驗證時,，一般會放置一個校驗的探頭在滅菌柜控制探頭旁邊,，這兩者之間的溫度差異有什么要求？是否應按校樣標準,，只允許±0.5℃的偏差,？

【答】滅菌器自帶的獨立的記錄探頭與監(jiān)控探頭就應完成足夠的驗證數(shù)據(jù)，然后對存在的偏差作修正,；驗證所用的測溫探頭的精度應優(yōu)于滅菌器自帶的記錄探頭和監(jiān)控探頭,；驗證本身的作用之一是對滅菌器自帶的監(jiān)控探頭和記錄探頭進行修正，以便正常使用時達到較為準確的溫度值,。

注：目前沒有找到“只允許±0.5℃的偏差”的說法,。

9、在同一條大容量注射劑生產線上,，如果有一臺滅菌柜,，需要進行多個規(guī)格產品（如250ml,100ml）以及不同滅菌參數(shù)產品（比如滅菌溫度和時間不同）的滅菌，那么在進行驗證和再驗證的過程中,，如何進行熱分布以及熱穿透的驗證設計,？是否各種規(guī)格、各種滅菌條件均需分別進行驗證,？

【答】一般來說,，各種規(guī)格、各種滅菌條件均需分別進行驗證,。不同規(guī)格混合裝載的滅菌,，除非能夠確認很多的相關內容，否則不推薦應用,。

10,、在對濕熱滅菌器進行驗證或再驗證過程中，進行熱分布,、熱穿透的驗證時,，如果柜內設置12個或16個熱電偶進行溫度測試時,，找到的冷點在3次驗證中可能不同，如果出現(xiàn)這種情況該如何處理,？

【答】一般來說,，空載熱分布的冷點應該是在確定的位置周圍,，否則就可能是設備,、壓力、空氣置換不完全,、蒸汽質量等原因引起,。對于裝載熱穿透，大容量注射劑（LVP,，>100ml）冷點位于產品的幾何中心和沿縱軸位于產品的底部,，但需要驗證確認。冷點的定位在小容量注射劑中并不典型,，因為溶液加熱的速率幾乎與滅菌器相同,。還有，容器的方向也會影響冷點的位置,，當容器旋轉或翻轉時,，可能不存在可辨別的冷點。如果裝載不變,，容量相同,，蒸汽穿透不存在阻隔等，冷點仍然無法重現(xiàn),，則應檢查設備,、工藝、壓力,、蒸汽質量等方面可能存在的不確定性,。

11、滿載熱分布和空載熱分布對于滅菌效果上體現(xiàn)出的意義有何不同,？

【答】兩項試驗都是測量滅菌腔室的溫度分布情況,，還不能反映產品內的溫度和熱效益的情況，還不能直接反映產品的滅菌效果,。但腔室情況顯然會影響產品內的情況,。驗證中依次進行空載熱分布、滿載熱分布,、產品熱穿透試驗,。采用這種試驗的主要目的是用盡量少的試驗次數(shù)，盡可能地揭示客觀情況,。前道試驗的結果為后道試驗提供信息,。

12,、滿載熱分布試驗是用空瓶進行還是用裝注射用水的輸液瓶進行

【答】滿載熱分布試驗是用模擬樣品進行。

13,、如驗證時的裝載方式為半載或滿載,，在以后生產中處于滿載和半載之間的是否需要驗證？

【答】對于處于滿載和半載之間的裝載方式,，建議使用模擬產品填充使其達到滿載,，從而確保生產時的裝載方式與驗證時一致。

14,、熱穿透試驗怎么做,？

【答】熱穿透試驗的目的是確定滅菌室裝載中的“最冷點”，并確認該點在預定的滅菌程序中獲得充分的無菌保證值,，即菌種殘余量≤10^-6及各檢測點溫度與滅菌室內平均溫度的差值≤2.5℃,。對于可能影響滅菌效果的操作情況的變更應做相應的驗證，確認操作方法,。例如：當在每個滅菌盤上增加不銹鋼蓋后,，實際產品（溶液）內部的升溫時間要比不加蓋時慢2分鐘，因此要在滅菌程序設定時增加2分鐘的時間,。熱電偶的放置與滿載熱分布試驗規(guī)程一致,，將標準熱電偶放在滅菌溶液中心部位。

15,、熱穿透試驗中的模擬樣品是什么概念,，是指實驗室小批量樣品嗎？

【答】熱穿透試驗中的模擬樣品是指熱穿透性能與真實樣品一致的樣品,，不是實驗室小批量樣品,。

16、滅菌前微生物污染水平的測定方法,？

【答】濾膜過濾法是最常用的方法,，使用前應通過驗證。

17,、對于選擇殘存概率法最終滅菌的產品,，如果滅菌前每批檢測微生物限度，而微生物限度檢測時間為72小時,，而實際連續(xù)生產的生產周期遠遠短于72小時,，其檢測結果僅是對滅菌后產品無菌保證水平的參考嗎？

【答】顯然滅菌前微生物含量檢查的結果遠遠滯后于生產過程,，其目的不是用于對當批產品的中間控制,。該檢查的意義主要有兩項：第一，用于評價該批產品的無菌保證水平,；第二,，長期積累了多批滅菌前微生物含量的數(shù)據(jù)后,，可以對生產系統(tǒng)在滅菌前的各工藝步驟的微生物污染狀況作整體的評估，從而指示該生產體系是否有效地將微生物污染控制在很好的水平,，是否需要進行改進等,。

18、過度殺滅法是否確定不需進行微生物挑戰(zhàn)試驗,？

【答】過度殺滅法的內涵是產品中的微生物下降12個對數(shù),，微生物挑戰(zhàn)試驗是證明微生物的殘存概率不大于10^-6，故過度殺滅法可以不進行微生物挑戰(zhàn)試驗,。

19,、最終滅菌產品是否每個申請注冊的品種都要單獨進行設備驗證,？是否可以只進行一次設備驗證,，其它品種可以通用？設備驗證資料是否可不附在品種驗證資料中,，只作為存檔備查,？

【答】最終滅菌產品不一定每個申請注冊的品種都要單獨進行設備驗證，如果注冊品種采用相同的或更低的滅菌條件,，可以只進行較高溫度滅菌條件下的設備驗證,；針對品種滅菌條件的設備驗證資料也應附在品種的驗證資料中。

20,、培養(yǎng)基灌裝試驗中,，培養(yǎng)基滅菌后、灌裝前,，再經濾膜除菌過濾,，以觀察濾器在消毒安裝過程中的無菌效果，是否可行,？

【答】培養(yǎng)基灌裝試驗是對包括無菌過濾在內的所有步驟的無菌性保證程度的考察,，推薦配制培養(yǎng)基后直接用于無菌過濾及隨后的灌裝過程，實際操作中要注意防止不溶性顆粒堵塞濾器,。

21,、培養(yǎng)基灌裝試驗年度再驗證每年兩次，每次幾批,？

【答】對于某個產品的年度再驗證,，通常的做法是每年進行兩次培養(yǎng)基灌裝試驗，每次一批,。

22,、在采用微生物浸泡法進行容器密封性驗證時，為什么要事先去除鋁蓋,，請問除去鋁蓋后,，是不是只剩膠塞,，那么在試驗過程中會不會發(fā)生藥液泄露而影響驗證結果？

【答】去除鋁蓋是為了造成一個更為嚴格的條件,，講課中以凍干粉針劑為例,，通常容器內有較高的真空，不會造成漏液,，試驗者可根據(jù)自己產品的特點判斷去除鋁蓋是否適用,。

23、密封性驗證中,，如鋁桶的驗證,，用培養(yǎng)基驗證無法觀察結果，是否有其他方法,？

【答】對于無菌原料的容器,，建議嘗試物理的方法，如鹽水滲入法,。

24,、密封性驗證一般每次取樣量是多少，再驗證的周期是多少,？

【答】可以從壓蓋線上從開始,、中間、結束各取至少10瓶進行試驗,，起始驗證應考察有效期內不同時間的密閉性,，再驗證一般一年可進行一次。

25,、驗證指南中對大輸液產品的密封性驗證有相關的要求,，但對分裝及凍干產品無要求，是否不需進行密封性驗證,？

【答】對大容量注射劑,、小容量注射劑、粉針劑均應進行容器密封性驗證,。

26,、容器密封性測試是否在安瓿、西林瓶等所有注射劑型中都必須完成,？

【答】容器密封性測試在安瓿,、西林瓶等所有注射劑型中都必須進行。但采用的方法不盡相同,，安瓿一般采用物理測試方法,，西林瓶則采用物理和微生物學檢測方法。

27,、請問如何建立警戒限或糾偏限,？有無相關的計算公式或技術要求,？

 【答】應根據(jù)歷史的數(shù)據(jù)，結合不同潔凈區(qū)域的標準制訂,。如采用數(shù)理統(tǒng)計的方法,，一般可以將平均值加上2倍的標準差作為警戒限度，加上3倍的標準差作為行動限度,，限度設定以后,，應定期回顧評價，如每年一次,。

28,、無菌檢查不合格時，如有真菌不合格的情況,，可能有哪些原因,？最有可能的原因是什么？

【答】無菌檢查出現(xiàn)不合格時,，應首先進行無菌試驗過程的調查,，考慮的因素可包括培養(yǎng)基、試驗器材,、試驗環(huán)境、人員操作等,，并結合當批產品生產的環(huán)境監(jiān)測結果作出綜合的分析判斷,。

29、凍干機的濕熱滅菌怎么進行,？臭氧或甲醛熏蒸不行嗎,？

【答】如果凍干機帶有在線滅菌系統(tǒng)的，就可以在每次凍干結束后對冷凍干燥腔室進行濕熱滅菌,。如果采用臭氧或甲醛熏蒸,，應證明這兩種方法能達到滅菌的要求，而且其殘留量不會對產品質量有不利影響,，也不會影響到產品的安全性,。此外，采用臭氧有可能加速設備的老化,，而采用甲醛熏蒸時,，應考慮甲醛的殘留以及對人體健康的影響。

30,、請問,，可靠的除熱原方法有哪些？一般情況下,，采用哪種除熱原方法較好,？

【答】活性炭吸附,、超濾等方法都對除熱源有效果。效果取決于實際條件和產品特性,，應通過試驗比較,、確定。

31,、大輸液產品現(xiàn)采用殘存概率法,，以后是否要提高到過度殺滅法？殘存概率法是否每批樣品都要對滅菌前藥液進行微生物檢查,，并制定相應的標準進行相應的驗證,？

【答】大輸液產品采用殘存概率法，是否要提高到過度殺滅法,，主要還是根據(jù)主藥的性質和企業(yè)付出的生產成本,，如果大輸液產品質量穩(wěn)定，可以耐受過度殺滅的滅菌條件,，最好還是提高到過度殺滅法,，這樣既不影響產品的質量，同時又降低了生產成本,；因為殘存概率法要對每批樣品滅菌前藥液進行微生物監(jiān)測及控制,。

32、在遵循注射劑研發(fā)技術指導原則的前提下,，創(chuàng)新藥申報臨床和申報生產階段對滅菌工藝的驗證的要求是否不同,？

【答】創(chuàng)新藥申報臨床和申報生產階段對滅菌工藝驗證的要求是不同的。在申報臨床階段不需進行滅菌工藝驗證,，但需進行滅菌工藝研究,，并在GMP車間試制臨床研究用樣品，其滅菌工藝應能評價樣品可以達到無菌要求,；在申報生產時要求進行滅菌工藝驗證,，提交相應的驗證資料。

33,、如整個生產系統(tǒng)的無菌驗證已通過GMP認證,，這部分詳細內容是否需體現(xiàn)在注冊申報資料中？例如,，生產設備,、滅菌柜、濾器等驗證是否需體現(xiàn)在申報資料中,？

【答】生產系統(tǒng)的GMP認證資料,，一般不需體現(xiàn)在注冊申報資料中。但當生產系統(tǒng)的認證與注冊品種同時進行時，則應將這部分資料作為注冊申報資料進行申報,。也就是說,，滅菌工藝驗證資料主要是與品種驗證有關的內容。

34,、申報資料中未提供無菌工藝驗證資料,，是否一定要在補充資料中體現(xiàn)？粉針劑需要進行哪些驗證工作,，申報資料必須體現(xiàn)哪幾點,？

【答】申報資料中未提供無菌工藝驗證資料，如果進行了無菌保證工藝驗證,，可以在提交補充資料時一并提供,；粉針劑的驗證內容包括：培養(yǎng)基模擬灌裝試驗、除菌過濾系統(tǒng)適應性試驗（過濾系統(tǒng)相容性測試,、過濾前后濾膜完整性測試,、濾膜的微生物截留量測試），以及容器系統(tǒng)密封性驗證等,。

35,、采用無菌生產工藝的品種，申報臨床前的樣品,，其無菌工藝研發(fā)及驗證資料是否必須在實際生產設備及環(huán)境下進行,？

【答】無菌工藝研究應在符合GMP要求的車間中進行，但無菌工藝驗證則必須在實際生產設備及環(huán)境下進行,。