|
在之前的PD-L1檢測(cè)系列文章中,，小衡和大家談了談腫瘤免疫治療，也大致介紹了現(xiàn)有的PD-1/L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物,。因?yàn)镻D-1/L1免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物在臨床試驗(yàn)中的良好表現(xiàn),，與之相關(guān)的伴隨診斷或補(bǔ)充診斷也迎來了捆綁式發(fā)展。作為PD-1/PD-L1 免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物的療效預(yù)測(cè)標(biāo)志,，PD-L1 檢測(cè)已經(jīng)獲FDA批準(zhǔn)作為免疫治療的伴隨診斷或補(bǔ)充診斷,。目前,，PD-L1免疫組化檢測(cè)試劑盒/抗體主要有五種：22C3、28-8,、SP263,、SP142和73-10，分別在兩個(gè)免疫組化平臺(tái)Dako和Ventana進(jìn)行檢測(cè),。FDA只批準(zhǔn)了Dako 22C3 pharmDx的PD-L1檢測(cè)作為K藥的伴隨診斷,，Dako 28-8和 Ventana SP142則分別為O藥和T藥（Atezolizumab）的補(bǔ)充診斷。Ventana SP263 被歐盟認(rèn)證作為三種免疫抑制劑的補(bǔ)充診斷,。五大PD-L1檢測(cè)試劑盒/抗體所針對(duì)的免疫抑制劑不同檢測(cè)試劑盒/抗體檢測(cè)的一致性研究 近幾年,，國際上對(duì)于不同抗體檢測(cè)的一致性研究已有不少報(bào)道。美國學(xué)者對(duì)90例NSCLC手術(shù)切除標(biāo)本分別用22C3,、28-8,、SP142和E1L3N檢測(cè)腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞的PD-L1表達(dá)情況，由13位病理學(xué)家評(píng)估染色百分比,。結(jié)果顯示,，采用SP142抗體在腫瘤細(xì)胞和免疫細(xì)胞中檢測(cè)到的PD-L1明顯減少，不同抗體檢測(cè)到的腫瘤細(xì)胞評(píng)分的一致性為0.813（95%CI: 0.815-0.839）,，而免疫細(xì)胞評(píng)分的一致性為0.277（95%CI: 0.222-0.334）,。2016年德國進(jìn)行了一項(xiàng)比較22C3、28-8,、SP142和SP263在肺腺癌和鱗癌的染色模式研究,。在15例手術(shù)切除標(biāo)本的染色中，采用28-8和22C3單抗染色的標(biāo)本中腫瘤細(xì)胞染色比例相似,；相比之下,，SP142在4例標(biāo)本中的腫瘤細(xì)胞染色較少，SP263在9例標(biāo)本中顯示了更多的腫瘤細(xì)胞染色比例,。2017年同樣評(píng)估這4種抗體一致性的藍(lán)印計(jì)劃（The Blueprint Project）開展,，39例NSCLC標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明了當(dāng)使用22C3、28-8和SP263分析時(shí),，染色的腫瘤細(xì)胞百分比是可比的,，而SP142的檢測(cè)結(jié)果顯示染色的腫瘤細(xì)胞整體較少。德國一致性研究和藍(lán)印計(jì)劃在SP263同22C3,、28-8單抗的可比性結(jié)論上有所出入,，可能是樣本量過少引起。同年,，Ratcliffe等用22C3,、28-8和SP263分別檢測(cè)500個(gè)NSCLC的存檔標(biāo)本，設(shè)定腫瘤細(xì)胞胞膜陽性染色百分比包括1%、10%,、25%和50%多個(gè)截?cái)嘀底鳛镻D-L1陽性標(biāo)準(zhǔn),，不同單抗之間的總體符合率均>90%。
綜合以上結(jié)果可以發(fā)現(xiàn),，22C3,、28-8和SP263的檢測(cè)結(jié)果具有相似的腫瘤細(xì)胞陽性百分比，一致性較高,，而SP142染色陽性的腫瘤細(xì)胞較少,。以K藥（帕博利珠單抗）為例,，目前獲批的適應(yīng)癥以及以22C3 作為伴隨診斷時(shí)的判讀標(biāo)準(zhǔn),。 | | | | | FDA批準(zhǔn)帕博利珠單抗單藥一線治療腫瘤細(xì)胞表達(dá)PD-L1（TPS≥1%）、無EGFR和ALK基因變異,，不適合手術(shù)切除或放化療的Ⅲ期或轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌患者 | | | FDA批準(zhǔn)帕博利珠單抗用于治療腫瘤細(xì)胞表達(dá)PD-L1（CPS≥1）的既往治療疾病進(jìn)展或化療后難治性或轉(zhuǎn)移性宮頸癌患者 | | | FDA批準(zhǔn)帕博利珠單抗用于治療腫瘤細(xì)胞表達(dá)PD-L1（CPS≥1）的經(jīng)過 2 種及以上治療方案（包括氟尿嘧啶,、含鉑化療）復(fù)發(fā)性局部晚期或轉(zhuǎn)移性的胃或胃食管結(jié)合部腺癌 | | | FDA批準(zhǔn)帕博利珠單抗單藥一線治療腫瘤細(xì)胞表達(dá) pd-L1（CPS≥ 1）的轉(zhuǎn)移性或不可切除復(fù)發(fā)性的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌患者 | | | FDA批準(zhǔn)帕博利珠單抗用于治療不適合含順鉑化療且腫瘤細(xì)胞表達(dá)PD-L1（CPS ≥10），或不適合任何含鉑類藥物化療的局部晚期或轉(zhuǎn)移性尿路上皮癌患者 | | | FDA批準(zhǔn)帕博利珠單抗用于治療復(fù)發(fā)性局部晚期或轉(zhuǎn)移性食管鱗狀細(xì)胞癌患者,，這些患者PD-L1 表達(dá)為陽性（CPS≥10）,，經(jīng)過一線或多線全身系統(tǒng)治療后疾病仍然進(jìn)展 |
**TPS：任何強(qiáng)度下顯示部分或完全膜染色的腫瘤細(xì)胞占所有腫瘤細(xì)胞的百分比。**CPS：PD-L1染色細(xì)胞(腫瘤細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、巨噬細(xì)胞)計(jì)數(shù)除以所有腫瘤細(xì)胞計(jì)數(shù)再乘以100。對(duì)PD-L1檢測(cè)準(zhǔn)確性的要求不言而喻,，然而同時(shí)也存在不同的方面對(duì)其檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響,。PD-L1表達(dá)的時(shí)空異質(zhì)性PD-L1表達(dá)的時(shí)空異質(zhì)性表現(xiàn)為空間和時(shí)間兩個(gè)方面。空間異質(zhì)性表現(xiàn)為PD-L1表達(dá)在同一腫瘤的不同位置可能不同,，這種位置的異質(zhì)性意味著穿刺部位不同導(dǎo)致PD-L1表達(dá)檢測(cè)結(jié)果的不同,。空間異質(zhì)性還表現(xiàn)為腫瘤轉(zhuǎn)移到不同部位后PD-L1表達(dá)也不盡相同，如腎上腺和肝臟轉(zhuǎn)移灶活檢組織PD-L1表達(dá)通常比較高,，轉(zhuǎn)移灶位于骨骼或頭顱時(shí)PD-L1表達(dá)比較低,。時(shí)間異質(zhì)性表現(xiàn)為隨著病程的延長，腫瘤PD-L1表達(dá)可能也會(huì)發(fā)生動(dòng)態(tài)變化,，這可能與先期治療以及腫瘤生物學(xué)行為的動(dòng)態(tài)演變有關(guān),。此外，臨床實(shí)踐中還發(fā)現(xiàn)基因改變,、組織學(xué)類型等因素也可能會(huì)影響PD-L1表達(dá),。總之,，PD-L1表達(dá)的時(shí)空異質(zhì)性較大,，受多種腫瘤自身因素和外在變化的影響。所有影響免疫組化結(jié)果的因素均可以影響PD-L1檢測(cè)結(jié)果。樣本固定時(shí)間不足或過長會(huì)導(dǎo)致組織中抗原自溶或丟失,，從而影響PD-L1表達(dá)結(jié)果,。因此，在檢測(cè)過程中做好陽性對(duì)照和陰性對(duì)照是很必要的,。目前PD-L1檢測(cè)中,，扁桃體和胎盤組織可分別作為陰性和陽性對(duì)照。PD-L1染色在扁桃體中呈現(xiàn)不同水平的染色：如在大多數(shù)生發(fā)中心巨噬細(xì)胞呈現(xiàn)弱到中等強(qiáng)度的點(diǎn)狀胞膜染色,，大多數(shù)上皮隱窩細(xì)胞呈現(xiàn)中等到強(qiáng)的染色,，而大多數(shù)淋巴細(xì)胞(外套層和生發(fā)中心B細(xì)胞)和淺表上皮細(xì)胞無染色。免疫組化指標(biāo)的判讀具有一定主觀性,，導(dǎo)致結(jié)果有所偏差,，因此一定要加強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)的建立與人員的培訓(xùn)，盡量減少主觀因素帶來的誤差,。
PD-L1表達(dá)判讀涉及到多個(gè)方面,，如腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞數(shù)量,、陽性強(qiáng)度以及數(shù)量等。根據(jù)臨床試驗(yàn),，不同腫瘤PD-L1判讀的細(xì)胞不同,。如肺癌僅判讀腫瘤細(xì)胞，而胃癌,、尿路上皮癌需要判讀腫瘤細(xì)胞和腫瘤周圍的免疫細(xì)胞,。一般來說，PD-L1判讀至少需要100個(gè)腫瘤細(xì)胞,。當(dāng)組織樣本中腫瘤細(xì)胞數(shù)量不足100時(shí),，應(yīng)在報(bào)告中注明檢測(cè)的腫瘤細(xì)胞數(shù)量，以供臨床醫(yī)生參考,。對(duì)于PD-L1的判讀,，只有細(xì)胞膜陽性才可以判讀為PD-L1陽性，不論表達(dá)強(qiáng)弱,。腫瘤組織內(nèi)的巨噬細(xì)胞可表達(dá)PD-L1,，不應(yīng)將其判讀為腫瘤細(xì)胞陽性。另外,，還要避免判讀壞死的腫瘤組織,，這些腫瘤細(xì)胞可能因?yàn)槟[瘤抗原彌散而造成假陽性。切片邊緣和擠壓處出現(xiàn)的陽性不能作為PD-L1陽性,。對(duì)于免疫細(xì)胞,，需要判讀淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等,，而纖維母細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等均不能計(jì)算在內(nèi),。PD-L1免疫組化結(jié)果判讀,，應(yīng)首先觀察HE染色切片，確定腫瘤細(xì)胞的數(shù)量及在切片中的位置,；然后低倍鏡下觀察PD-L1免疫組化切片,，確定PD-L1是否陽性以及陽性部位，最后高倍鏡下仔細(xì)觀察符合要求的PD-L1染色的腫瘤細(xì)胞及計(jì)算百分比,。對(duì)于手術(shù)切除標(biāo)本,，由于PD-L1表達(dá)存在異質(zhì)性，此時(shí)可將切片劃分為4個(gè)象限,，分別計(jì)算每個(gè)象限的PD-L1陽性表達(dá)率,，然后再平均即為該例腫瘤的PD-L1陽性表達(dá)率,。安捷倫首席科學(xué)家 Karsten Nielsen 先生曾對(duì)此表示：“對(duì)病理醫(yī)師相應(yīng)的培訓(xùn)是有必要的,，病理醫(yī)師或科研人員需要對(duì) PD-L1 評(píng)分非常了解，才能夠精準(zhǔn)地選出患者來,。有些細(xì)胞并非目標(biāo)檢測(cè)的腫瘤細(xì)胞,，同樣也會(huì)被染成陽性，醫(yī)師需要知道什么樣的細(xì)胞可能會(huì)有什么預(yù)期結(jié)果,。如果沒有對(duì)醫(yī)師進(jìn)行合適的培訓(xùn),，就會(huì)影響結(jié)果的判讀?！?/span>
對(duì)此,，衡道病理的優(yōu)勢(shì)便足以凸顯。衡道病理擁有經(jīng)驗(yàn)豐富的全職病理醫(yī)生團(tuán)隊(duì),，專職負(fù)責(zé)判讀,，全面保障穩(wěn)定的、高質(zhì)量的PD-L1檢測(cè)服務(wù),；至今,，已開展萬余例PD-L1伴隨診斷與補(bǔ)充診斷。
版權(quán)聲明：本公眾號(hào)發(fā)布所有內(nèi)容,，版權(quán)均屬衡道醫(yī)學(xué)病理診斷中心及相關(guān)版權(quán)方所有,，如需轉(zhuǎn)載請(qǐng)?zhí)崆奥?lián)系本公眾號(hào)，并在使用時(shí)注明「來源：衡道病理」,。 |
