PD-1/PD-L1背景,，PD-1/PD-L1藥物與檢測方法的現(xiàn)狀的內(nèi)容請見：
PD-L1判讀
TPS評分是最直接且可重復(fù)的PD-L1評分方法,，定義為總陽性腫瘤細胞數(shù)除以腫瘤細胞總數(shù)乘以100,，分母通常近似于載玻片的整個腫瘤區(qū)域。 對于22C3，TPS PD-L1陽性染色需要任何膜狀腫瘤細胞染色,，無論其強度如何（線性或顆粒狀,、完整或不完整、有無細胞漿染色）（圖4）,。與炎癥細胞,、正常上皮細胞和壞死細胞的染色一樣，腫瘤細胞的純細胞漿染色也被排除在外,。 
H&E的初始評估和PD-L1染色在低倍鏡下評估允許對包含腫瘤的區(qū)域和PD-L1陽性區(qū)域進行概覽,。隨后，高倍鏡評估（100-400X）允許識別弱或部分膜染色區(qū)域,，這些區(qū)域在低倍鏡評估下可能不明顯,。然后對PD-L1染色的腫瘤細胞面積進行估計（圖5）。如果有多個區(qū)域染色,，則可將載玻片分為多個象限/部分,，每個部分進行評分，然后平均得出最終TPS（圖6）,。TPS判讀模式圖如下圖（圖7）,。 
到目前為止，免疫細胞的評分僅限于克隆SP142在阿替利珠單抗治療三陰性乳腺癌和尿路上皮癌,。值得注意的是,，羅氏公司于2021年8月27日撤銷了美國加速批準使用PD-L1表達治療不可切除的局部晚期或轉(zhuǎn)移性TNBC（SP142）。（https://www./media/releases/med-cor-2021-08-27.htm). 免疫細胞（淋巴細胞,、巨噬細胞,、樹突狀細胞或粒細胞）的染色，無論染色模式如何（點狀,、線狀,、膜狀），均視為陽性,。評分包括腫瘤內(nèi)或瘤周IC細胞（相鄰的瘤周基質(zhì)包括直接圍繞腫瘤前緣的組織）,。壞死、血管或血清中的中性粒細胞染色不應(yīng)包括在評分中,。PD-L1陽性可見于腫瘤細胞,，但需排除。此外,，DCIS/LCIS內(nèi)的免疫細胞需排除在計數(shù)范圍之外,。評分定義為任何強度的PD-L1染色免疫細胞占據(jù)的腫瘤面積（瘤內(nèi)和相鄰瘤周基質(zhì)，不包括壞死）的比例（圖8）,。
SP142解釋手冊建議,，腫瘤面積在20-40X倍鏡下評估,，IC染色應(yīng)在100–200X倍鏡下進行評估。PD-L1陽性的TNBC的閾值是IC評分≥1%腫瘤面積,，在尿路上皮癌中,，IC評分≥5%。當評估淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中TNBC的IC評分時,，在低倍鏡下觀察腫瘤和周圍淋巴結(jié)進行評分,，該區(qū)域內(nèi)任何PD-L1陽性IC細胞納入計算（圖9）。尿路上皮癌的SP142 IC評分相似,。纖維血管核心內(nèi)的炎癥細胞和鄰近乳頭柄基部的淋巴聚集體被認為是腫瘤區(qū)域內(nèi)的炎癥細胞,。IC評分不包括壞死、血管內(nèi)炎性細胞和治療相關(guān)肉芽腫,。
通過測定腫瘤細胞和腫瘤相關(guān)免疫細胞（淋巴細胞,、組織細胞）的PD-L1染色，除以腫瘤細胞總數(shù),，然后乘以100,，計算出綜合陽性分數(shù)。（圖10,、11）,。 
要被認為是陽性的腫瘤細胞染色，應(yīng)該有部分或完全膜染色（可以包含或不包含細胞漿染色）,。原位癌和良性上皮應(yīng)排除在分子之外,。單核細胞（淋巴細胞、組織細胞）的任何染色（細胞膜或細胞漿）也被視為陽性,。待評估的炎性細胞包括腫瘤巢內(nèi),、腫瘤巢周圍的基質(zhì)內(nèi)，以及距離腫瘤邊緣200X放大范圍（0.5 mm）內(nèi)的相鄰基質(zhì)內(nèi)的炎性細胞,。CPS計算是以估計PD-L1染色的腫瘤細胞和炎癥細胞（分子）的數(shù)量,。然后估算所有活腫瘤細胞總數(shù)（分母）。22C3 CPS判讀手冊建議,，不應(yīng)在高于20X倍鏡（物鏡）下進行判讀,，以確保腫瘤周圍包含PD-L1+免疫細胞,。推薦的方案是在低倍鏡識別腫瘤周圍的免疫細胞染色區(qū)域,。然后在200倍放大時，將腫瘤細胞的邊緣定位于視野的中心,。該區(qū)域內(nèi)的任何單核PD-L1+免疫細胞都應(yīng)包括內(nèi),。當評估淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的PD-L1陽性時，CPS分子包括淋巴結(jié)在20X倍鏡（物鏡）下所有PD-L1+單核炎性細胞,。潰瘍（或其他炎癥過程）相關(guān)的中性粒細胞,、嗜酸性粒細胞和炎性細胞應(yīng)排除在分子之外,。值得注意的是，胃食管交界癌PD-L1染色有兩種不同的模式：腫瘤細胞的類晶格結(jié)構(gòu)染色或腫瘤結(jié)節(jié)周圍的界面染色,；這兩種模式都很重要,，需要識別并納入CPS評分。對于食管鱗狀細胞癌,，多核巨細胞應(yīng)計入炎性細胞評分,。使用SP142染色進行聯(lián)合腫瘤細胞（TC）和免疫細胞（IC）評分用于阿替利珠單抗治療非小細胞肺癌，或,，SP263染色用于度伐利尤單抗治療尿路上皮癌（2021年2月22日,，阿斯利康主動撤回度伐利尤單抗治療晚期尿路上皮癌獲批適應(yīng)癥。https://www./content/astraz/media-centre/press-releases/2021/voluntarywithdrawal-imfinzi-us-bladder-indication.html). 用SP142評估非小細胞肺癌的阿替利珠單抗治療： 2.腫瘤浸潤性IC染色≥10%的腫瘤面積，包括相鄰的瘤周基質(zhì) 與度伐利尤單抗治療尿路上皮癌相關(guān)的SP263需要TC和IC評分,，但與SP142不同,，SP263已經(jīng)確定了陽性閾值，或者： I. 腫瘤細胞PD-L1陽性≥25%,。 II. 腫瘤相關(guān)IC占腫瘤面積的百分比>1%（根據(jù)H&E染色評估）,，且IC中PD-L1+≥25%. III. 腫瘤相關(guān)IC占腫瘤面積的百分比為1%（根據(jù)H&E染色評估），且IC中PD-L1+=100%,。 對于這種染色,，如果免疫細胞位于腫瘤區(qū)域內(nèi)或與腫瘤結(jié)節(jié)周圍直接相關(guān)（包括中性粒細胞、漿細胞和樹突狀細胞）,，則將其納入計數(shù),。通過低倍鏡在腫瘤結(jié)節(jié)周圍畫一條線，IC圍繞在腫瘤結(jié)節(jié)周圍,。如果腫瘤是單個癌巢,，則在單個100倍鏡視野范圍內(nèi)，間質(zhì)內(nèi)兩側(cè)都有腫瘤的任何IC都包括在腫瘤區(qū)域內(nèi)（圖12）,。腫瘤結(jié)節(jié)之間的間質(zhì)（在單個100倍鏡視野內(nèi),，間質(zhì)組織兩側(cè)均未與腫瘤接壤，則不計算在該腫瘤之內(nèi),。在評估淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的腫瘤時,，腫瘤區(qū)域內(nèi)的IC包括在評分中。然而,，周圍未受累淋巴結(jié)中的淋巴細胞不包括在評分中,。
SP263評分也適用于非侵襲性乳頭狀尿路上皮癌，包括纖維血管核心內(nèi)和臨近柄基部的免疫細胞,。對于SP263,，陽性免疫細胞的百分比四舍五入到最接近的百分位（0,、1、5,、10,、20、25,、30,，然后是最接近的第10個百分位）。然而,，當免疫細胞占腫瘤面積的1%（前面情況 III）時,，PD-L1陽性IC百分比僅報告為0%，<100%或100%,。 
關(guān)于PD-L1免疫組化性能評價等內(nèi)容,，請看“PD-L1免疫組化:克隆、閾值和爭議(3)” [1]PD-L1 immunohistochemistry: Clones, cutoffs, and controversies,，2022 Scandinavian Societies for Medical Microbiology and Pathology.DOI 10.1111/apm.13223
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