1 主題內(nèi)容與適用范圍

本文規(guī)定了食品平板菌落計數(shù)的方法。

本文適用于航空配餐的各種半成品,、成品及原料,，有專門規(guī)定的檢驗方法的除外。

2 設(shè)備和材料

超凈工作臺,、恒溫培養(yǎng)箱（36±1℃）,、均質(zhì)器、振蕩器,、吸管（1ml,、10ml）、平皿,、稀釋瓶,、天平等

3 培養(yǎng)基和試劑

平板計數(shù)瓊脂、75%乙醇,、磷酸鹽緩沖稀釋液

4 操作程序

4.1 樣品制備

4.1.1 以無菌操作取有代表性的樣品盛于滅菌容器內(nèi),。如有包裝，則用75%乙醇在包裝開口處擦拭后取樣,。

4.1.2 制備樣品勻液

以無菌操作取25g樣品,，放入裝有225ml稀釋劑的滅菌均質(zhì)杯內(nèi)，于8000r/min均質(zhì)1-2min,，制成1：10的樣品勻液,。如樣品均質(zhì)時間超過2min，應在均質(zhì)杯外加冰水冷卻,。

4.2 稀釋樣品勻液

4.2.1 用10ml滅菌吸管準確吸取1：10的樣品勻液10ml,，放入裝有90ml稀釋劑的150ml 稀釋瓶中。迅速振搖,，將樣品混勻,，制成1：100的樣品勻液。振搖時,，幅度為30cm,，7s內(nèi)振搖25次。從容器中吸取樣品勻液和以后的稀釋操作中,，吸管尖不要碰著瓶口,。吸入的液體應先高于所要求的刻度，然后提起吸管使其尖端離開液面并貼在容器內(nèi)壁將液體調(diào)至所要求的刻度,。

4.3 平板接種

4.3.1 對于每個樣品,，選用合適的三個連續(xù)稀釋度的樣品液進行平板計數(shù)。

4.3.2 分別用滅菌吸管吸取1ml樣品液放入作了適宜標志的平皿內(nèi),。每個稀釋度的樣品液用兩個平皿,。

4.3.3 分別加12-15ml平板計數(shù)瓊脂（約45℃左右）到平皿內(nèi),。立即將平皿內(nèi)的樣品液和瓊脂培養(yǎng)基充分混合。要防止把混合物濺到平皿壁和蓋上,。同時將平板計數(shù)瓊脂傾入加有1ml稀釋劑的另一滅菌平皿作空白對照,。將樣品液加入平皿后應立即傾注瓊脂培養(yǎng)基，每個樣品從開始稀釋到傾注最后一個平皿所用的時間不得超過20min,。

4.4 培養(yǎng)

待瓊脂凝固后將平皿翻轉(zhuǎn),，立即放進36±1℃的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)48±2h。培養(yǎng)箱應保持一定的濕度,，經(jīng)48h培養(yǎng)的瓊脂培養(yǎng)基的失重不得超過15%,。

4.5 菌落計數(shù)和記錄

4.5.1 培養(yǎng)后，立即計數(shù)每個平板上的菌落數(shù),。25-250個菌落為合適范圍,。如不能立即計數(shù)，應將平板存放于0-4℃,，但不得超過24h,。

4.5.2 操作者對同一平板復核自己的計數(shù)結(jié)果，其差異應在5%之內(nèi),，而其他人對這一平板重復計數(shù),，其差異應在10%這內(nèi)。否則,，應找出原因,，加以校正,。

4.6 計算和記錄數(shù)字

適宜稀釋度的兩個平板的菌落數(shù)平均值或兩個稀釋度的平板菌落數(shù)平均值乘以相應稀釋度倍數(shù)計算出每克（毫升）樣品中平板菌落數(shù),。

記錄時，只有在換算到每克（毫升）樣品中平板菌落數(shù)時,，才能定下兩位有效數(shù)字,，第三位數(shù)字采用四舍五入的方法記錄。也可將樣品的平板菌落數(shù)記錄為10的指數(shù)形式,。

5 結(jié)果報告

報告每克（毫升）樣品中平板菌落數(shù)或估計的平板菌落數(shù),。

注：本文參照SN0168-92《出口食品平板計數(shù)》