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FlowJo 是美國斯坦福大學 Leonard Herzenberg 實驗室研發(fā)的一款流式數(shù)據(jù)分析軟件，它可以對所有流式細胞儀產(chǎn)生的數(shù)據(jù)進行分析,，在多種電腦操作系統(tǒng)上兼容性良好,。

由于功能強大，簡單易用,，已經(jīng)被生命科學領域內(nèi)的科學家,、實驗室廣泛使用；同時 FlowJo 也是各高影響力核心期刊最受歡迎的流式數(shù)據(jù)分析軟件,。

本文主要針對流式分析中常用的平均熒光強度 (MFI),，五個小步驟帶你快速分析出 MFI。

Ctrl A 將所有文件全選，鼠標將其直接拖到 All Samples 中，如圖：

1,、鼠標左鍵點擊 fcs 格式數(shù)據(jù)出現(xiàn)流式散點圖,，X 軸默認選擇 SSC（側(cè)向散射，其散射強度與細胞內(nèi)顆粒結(jié)構(gòu)的質(zhì)量正相關,，即細胞內(nèi)顆粒結(jié)構(gòu)越復雜,，質(zhì)量越大，SSC 越大,；反之越?。?/span>

Y 軸默認選擇 FSC（前向散射,，該值與細胞的直徑正相關,，即細胞越大，F(xiàn)SC 越大,；反之越?。?/span>

2,、圈門：根據(jù)實驗目的選擇合適的圈門工具（矩形門,、十字門、橢圓門,、多邊形門）進行圈門,，圈出需要進行分析的細胞后點 OK 確認。圈出的細胞默認為 Lymphocytes（當然也可以根據(jù)自己的需要重命名）,，下方的比例代表這群細胞占總細胞的百分比,。

3、對圈出細胞進行分析,，雙擊 Lymphocytes 選中這群細胞,，根據(jù)實驗目的、染料所需的熒光激發(fā) / 發(fā)射波長選擇合適的橫縱坐標,，完成后關閉處理界面回到軟件主界面,。

我選取的橫坐標是 PE-A，縱坐標是 Histogram,，點擊橫坐標邊上的 T 可將橫坐標數(shù)值改為 log 值,，將其變?yōu)檎担玫较聢D,。

4,、添加 MFI：選擇橫坐標下方的Σ Statistion，點擊下面的Σ 打開新界面,，單擊左邊框的 Mean,，選擇想要分析的 PE-A,，點擊 Add 添加可以使其 MFI 在Σ Statistion 框中顯示。

鼠標拖拽已處理文件到 All Samples 中,，即可實現(xiàn)對其他數(shù)據(jù)的批量處理,，簡單高效。

點 File 下方的 Save As 可導出到 Excel 表格,，通過篩選等命令對數(shù)據(jù)快速處理,，十分方便。

以上是本人對流式分析中常用到的 MFI 處理所了解的基本操作,，希望對大家有所幫助,。

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