作者 Ms.Modern

PMDA采用的溶出方法為日本藥典常用的方法：

溶出體積：900ml

溶出液溫度：37度±0.5度

溶出杯數(shù)：≧12

IR與DR制劑：pH1.2介質(zhì)中最長為2h,，其它介質(zhì)中最長可至6h；

ER制劑：一般持續(xù)24h,，但在pH1.2介質(zhì)中,，檢測至2h即可；當(dāng)參比制劑的平均溶出量達(dá)到80%即可停止試驗(yàn),。

在進(jìn)行仿制藥的研究時(shí),，考慮到原研藥可能的批間差異，需至少從市面上采購并檢測3批原研藥的溶出曲線,，然后選取溶出曲線處于中間狀態(tài)的一批作為參比制劑；同時(shí)評(píng)估參比制劑在各pH值溶出曲線的波動(dòng)范圍,，以更有效地評(píng)估參比制劑內(nèi)在質(zhì)量和自研產(chǎn)品的研發(fā)深度與程度,。

速釋制劑IR (Immediate-Release Drug)

溶出檢測條件

對(duì)于速釋制劑IR，鑒于胃排空時(shí)間,，pH1.2的介質(zhì)中檢測2h即可,，其它介質(zhì)條件可考察至6h；當(dāng)參比制劑的平均溶出量達(dá)到85%即可停止試驗(yàn),。根據(jù)產(chǎn)品類型的差異,，下圖1列出速釋制劑IR的常用檢測條件：

圖1：PMDA推薦的速釋制劑溶出方法

a. 在使用槳法50rpm檢測制劑產(chǎn)品的溶出時(shí)，如果制劑產(chǎn)品在溶出杯中崩解后聚集在溶出杯底部,，則可以使用槳法75rpm或者籃法100rpm進(jìn)行代替,；

b. 對(duì)于含有pH值范圍的，可分別按照0.5或1.0間隔測試,。最終選擇該pH范圍內(nèi)溶出速率最慢的一個(gè)介質(zhì),，并且能保證參比制劑的平均溶出釋放量在規(guī)定時(shí)間內(nèi)能達(dá)到85%；如果在任何pH介質(zhì)中均達(dá)不到,，則選擇溶出最快的那個(gè)介質(zhì),；

c. 如果使用槳法50rpm或者75rpm，參比制劑和自研制劑在30min內(nèi)溶出均能達(dá)到85%及以上，那么則無需使用槳法100rpm對(duì)其進(jìn)行檢測,。

d. 吐溫80的濃度應(yīng)先從低濃度開始考察,，如0.01%、0.1%,、0.5%和1.0%(w/v),，不建議采用3.0%以上的濃度；當(dāng)吐溫80的濃度能使參比制劑在至少一個(gè)溶出介質(zhì)中并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)平均溶出量達(dá)到85%即可,。如果參比制劑均不能達(dá)到85%,，則選擇溶出最快的一個(gè)溶出條件。如果吐溫80能對(duì)原料藥或輔料產(chǎn)生相互作用,，則可用十二烷基硫酸鈉代替,。需注意，不同來源的表面活性劑可能會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果帶來顯著的差異,。

e. 100rpm下的吐溫80的濃度與50rpm下的濃度保持一致,。相比于十二烷基硫酸鈉，PMDA更傾向于吐溫80,，因?yàn)槭榛蛩徕c更易與藥物發(fā)生相互作用,，而且不同來源的吐溫80對(duì)試驗(yàn)的影響比十二烷基硫酸鈉低。

溶出相似性可接受標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)于口服固體速釋制劑,，如若符合下圖2標(biāo)準(zhǔn),，則可判斷自研制劑與參比制劑之間溶出具有相似性：

圖2：口服固體速釋制劑&腸溶制劑溶出相似性判斷標(biāo)準(zhǔn)

AD：Average Dissolution，平均溶出速率,；

ST：SpecifiedTime,，規(guī)定時(shí)間；

R：Reference Product,，參比制劑,；

T：Test Product，自研產(chǎn)品,；

Ta：參比制劑溶出達(dá)到約85%的時(shí)間點(diǎn)

從上圖2中可看出,，主要是根據(jù)參比制劑的溶出情況制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)來判斷自研產(chǎn)品是否與之溶出相似：

(1) 如果參比制劑在15min內(nèi)的平均溶出量達(dá)到85%及以上，則以溶出15min點(diǎn)作為關(guān)鍵點(diǎn)：如果自研產(chǎn)品的平均溶出量也在15min內(nèi)達(dá)到85%及以上,，則可判斷兩者溶出相似,；但若自研產(chǎn)品的平均溶出量在15min內(nèi)沒有達(dá)到85%，則自研產(chǎn)品在15min處的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±15%,；否則判斷兩者溶出不相似,。

(2) 如果參比制劑在15min- 30min內(nèi)的平均溶出量才達(dá)到85%及以上，則以參比制劑溶出達(dá)到約60%和溶出達(dá)到約85%作為關(guān)鍵溶出時(shí)間點(diǎn),，而自研產(chǎn)品在這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±15%,；也可以通過計(jì)算參比制劑與自研產(chǎn)品之間的溶出相似因子f2(涵蓋15min,、30min和45min)，相似因子f2需大于等于42,。若上述兩條均不滿足,，則判斷兩者溶出不相似。

(3) 如果參比制劑在“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)的平均溶出量達(dá)到85%及以上,，則以參比制劑溶出達(dá)到約40%和溶出達(dá)到85%作為關(guān)鍵溶出點(diǎn),，而自研產(chǎn)品在這兩個(gè)點(diǎn)的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±15%；也可以通過計(jì)算參比制劑與自研產(chǎn)品之間的溶出相似因子f2(涵蓋Ta/4,、Ta/2,、3Ta/4、Ta),，相似因子f2需大于等于42,。若上述兩條均不滿足，則判斷兩者溶出不相似,。

(4) 如果參比制劑在“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)的平均溶出量達(dá)到50%及以上(但低于85%),，則以產(chǎn)品“規(guī)定時(shí)間”點(diǎn)和參比制劑平均溶出量達(dá)到“規(guī)定時(shí)間”溶出量的一半的時(shí)間點(diǎn)做為關(guān)鍵溶出時(shí)間點(diǎn)，而自研產(chǎn)品在這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±12%,；也可以通過計(jì)算參比制劑與自研產(chǎn)品之間的溶出相似因子f2(涵蓋Ta/4,、Ta/2、3Ta/4,、Ta),，相似因子f2需大于等于46。若上述兩條均不滿足,，則判斷兩者溶出不相似,。

(5) 如果參比制劑在“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)的平均溶出量低于50%，則以產(chǎn)品“規(guī)定時(shí)間”點(diǎn)和參比制劑平均溶出量達(dá)到“規(guī)定時(shí)間”溶出量的一半的時(shí)間點(diǎn)做為關(guān)鍵溶出時(shí)間點(diǎn),，而自研產(chǎn)品在這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±9%；也可以通過計(jì)算參比制劑與自研產(chǎn)品之間的溶出相似因子f2(涵蓋Ta/4,、Ta/2,、3Ta/4、Ta),，相似因子f2需大于等于53,。若上述兩條均不滿足，則判斷兩者溶出不相似,。

腸溶制劑DR (Delayed-Release Drug)

DR制劑的主要吸收部位在小腸,，不在胃中釋放，因此,，它應(yīng)具有耐酸性(pH1.2介質(zhì)),，然后能在中性環(huán)境(pH6 - 7)中釋放出來,。與速釋制劑IR類似，腸溶制劑DR在pH1.2的介質(zhì)中檢測2h即可,，其它介質(zhì)條件可考察至6h,；當(dāng)參比制劑的平均溶出量達(dá)到85%即可停止試驗(yàn)。

圖3：PMDA推薦的腸溶制劑溶出方法

注：a,、c的解釋參見速釋制劑部分

腸溶制劑DR溶出可接受標(biāo)準(zhǔn)與速釋制劑IR相似,。

緩釋制劑ER (Extended-Release Drug)

溶出檢測條件

緩釋制劑ER載藥量一般比速釋制劑IR大，且需保證其在體內(nèi)能緩慢釋放,，因此,，應(yīng)將ER制劑盡可能置于多的不同溶出介質(zhì)中考察其溶出速率。除了pH1.2條件溶出檢測2h外,，其余條件均應(yīng)檢測至24h,；當(dāng)參比制劑的平均溶出量達(dá)到80%即可停止試驗(yàn)。

圖4：PMDA推薦的緩釋制劑溶出方法

a：如果參比制劑的平均溶出量在24h內(nèi)達(dá)到80%,，則選擇溶出速率最慢的一條作為溶出介質(zhì),；如果參比制劑在任何介質(zhì)中的平均溶出量在24h內(nèi)仍未80%，則選擇溶出速率最快的一條作為溶出介質(zhì),。

從上圖4中可看出,，鑒于胃腸道蠕動(dòng)性的差異，在某些pH介質(zhì)中還應(yīng)考察不同的轉(zhuǎn)速(如50rpm,、100rpm,、200rpm)。膜控緩釋制劑或骨架緩釋制劑處方中通常含有一些疏水性輔料,，胃腸道中釋放的膽汁酸會(huì)影響這些產(chǎn)品中API的釋放,，因此可在溶出介質(zhì)中加入適量的吐溫80 (1.0%w/w)。運(yùn)用槳法試驗(yàn)時(shí),，也可結(jié)合籃法和崩解時(shí)限(加擋板或不擋板)來綜合考慮胃腸道中機(jī)械力的變化,。

溶出相似性可接受標(biāo)準(zhǔn)

對(duì)于口服固體緩釋制劑，如若符合下圖5標(biāo)準(zhǔn),，則可判斷自研制劑與參比制劑之間溶出具有相似性：

圖5：口服固體緩釋制劑溶出相似性判斷標(biāo)準(zhǔn)

從上圖2中可看出,，主要是根據(jù)參比制劑的溶出情況制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)來判斷自研產(chǎn)品是否與之溶出相似：

(1) 如果參比制劑在“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)的平均溶出量達(dá)到80%及以上，則以參比制劑溶出達(dá)到約30%,、50%和85%作為關(guān)鍵溶出時(shí)間點(diǎn),，而自研產(chǎn)品在這三個(gè)時(shí)間點(diǎn)的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±15%；也可以通過計(jì)算參比制劑與自研產(chǎn)品之間的溶出相似因子f2(涵蓋Ta/4,、Ta/2,、3Ta/4、Ta),，相似因子f2需大于等于42,。若上述兩條均不滿足,，則判斷兩者溶出不相似。

(2) 如果參比制劑在“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)的平均溶出量達(dá)到50%及以上(但低于80%),，則以產(chǎn)品“規(guī)定時(shí)間”點(diǎn)和參比制劑平均溶出量達(dá)到“規(guī)定時(shí)間”溶出量的一半的時(shí)間點(diǎn)做為關(guān)鍵溶出時(shí)間點(diǎn),，而自研產(chǎn)品在這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±12%；也可以通過計(jì)算參比制劑與自研產(chǎn)品之間的溶出相似因子f2(涵蓋Ta/4,、Ta/2,、3Ta/4、Ta),，相似因子f2需大于等于46,。若上述兩條均不滿足，則判斷兩者溶出不相似,。

(3) 如果參比制劑在“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)的平均溶出量低于50%,，則以產(chǎn)品“規(guī)定時(shí)間”點(diǎn)和參比制劑平均溶出量達(dá)到“規(guī)定時(shí)間”溶出量的一半的時(shí)間點(diǎn)做為關(guān)鍵溶出時(shí)間點(diǎn)，而自研產(chǎn)品在這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的溶出量可接受標(biāo)準(zhǔn)為參比制劑的±9%,；也可以通過計(jì)算參比制劑與自研產(chǎn)品之間的溶出相似因子f2(涵蓋Ta/4,、Ta/2、3Ta/4,、Ta),，相似因子f2需大于等于53。若上述兩條均不滿足,，則判斷兩者溶出不相似,。

對(duì)于緩釋制劑，在進(jìn)行BE研究之前,，仿制制劑與原研制劑必須滿足圖5中的溶出相似性要求,，以確保藥物進(jìn)入胃腸道中后，即使在不同的生理?xiàng)l件下,，藥物的運(yùn)動(dòng)軌跡與藥物釋放屬性仍保持一致,。緩釋制劑的溶出曲線要求之所以比速釋制劑要求更嚴(yán)格，因?yàn)镋R載藥量比IR大,，且給藥周期相對(duì)長,，在人體消化道內(nèi)滯留的時(shí)間也更長；另一方面，緩釋制劑需要控制藥物中API的釋放,，而有時(shí)制劑工藝的優(yōu)劣與“體內(nèi)釋藥特性”密切相關(guān),，所以對(duì)于緩釋制劑而言，應(yīng)制定更嚴(yán)格的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn),。

小結(jié)

在了解藥物的pka后，如果pka±1.0值未被涵蓋,，則也應(yīng)檢測pka±1.0值的溶出曲線。當(dāng)采用pH7.5以上溶出介質(zhì)進(jìn)行試驗(yàn)時(shí),，應(yīng)提供充分的依據(jù),。使用水作為溶出介質(zhì)時(shí)，應(yīng)考察其pH值和表面張力等因素對(duì)藥物及輔料的影響,。另外,，在試驗(yàn)前應(yīng)首先進(jìn)行原料藥在不同pH值溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性考察,，以確保試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確測定。

采用相似因子f2計(jì)算溶出相似性應(yīng)滿足以下三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)：

當(dāng)參比制劑在15min - 30min內(nèi)溶出達(dá)到85%及以上，則取三個(gè)溶出時(shí)間點(diǎn)計(jì)算f2：15min,、30min、45min,；

當(dāng)參比制劑在30min之后、“規(guī)定時(shí)間”點(diǎn)之前達(dá)到85%及以上(緩釋制劑為80%),，則取四個(gè)溶出時(shí)間點(diǎn)計(jì)算f2：Ta/4,、2Ta/4、3Ta/4,、Ta,，其中Ta表示參比制劑溶出達(dá)到或接近85%的溶出時(shí)間點(diǎn)(緩釋制劑為80%)；

如果參比制劑在“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)未達(dá)到85%(緩釋制劑為80%),，則取四個(gè)溶出時(shí)間點(diǎn)計(jì)算f2：Ta/4,、2Ta/4、3Ta/4,、Ta，其中Ta表示參比制劑溶出達(dá)到(或接近)在整個(gè)“規(guī)定時(shí)間”內(nèi)溶出量的85%的溶出時(shí)間點(diǎn)(緩釋制劑為80%),。

如果所有溶出條件均滿足這些標(biāo)準(zhǔn)要求，則可認(rèn)為參比制劑和自研制劑之間是溶出相似的,。至少在一種溶出條件下,，參比制劑在檢測時(shí)間下平均溶出量至少達(dá)到85%。對(duì)于緩釋制劑,，仿制藥的大小,、形狀、比重和釋放機(jī)制不應(yīng)與市售的原研藥有差異，應(yīng)保持一致,，因?yàn)樵谙乐羞@些差異可能會(huì)產(chǎn)生不同的生理差異從而引起生物利用度的差異。

參考文獻(xiàn)：

1. Regulatory Considerationsof Bioequivalence Studies for Oral Solid Dosage Forms in Japan

2. Guideline forBioequivalence Studies of Generic Products

3. 謝沐風(fēng),，No.4——溶出介質(zhì)的選用與配制

4. 謝沐風(fēng),，No.5——溶出曲線的測定

*聲明：本文由入駐新浪醫(yī)藥新聞作者撰寫，觀點(diǎn)僅代表作者本人,，不代表新浪醫(yī)藥新聞立場,。