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這些抗凝原理你真的了解嗎,?

 yanrulu2004 2017-09-05


抗凝管為防止血液凝固,經(jīng)過抗凝劑處理過的試管,。用于醫(yī)療,,生物實(shí)驗(yàn)等方面。醫(yī)院用于抽血的抗凝管,,不同顏色代表不同的用途,,及所含不同的抗凝劑,但其中的抗凝原理你都知道嗎,?

通常長用的抗凝管中的抗凝劑有:

1.乙二胺四乙酸(EDTA)鹽 EDTA有二鈉,、二鉀和三鉀鹽。

2.肝素

3.枸櫞酸鈉

4.草酸鈉

1
肝素

肝素廣泛在肺,、肝,、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖,,是分散物質(zhì),,平均分子量為15000(2000-40000)。肝素可加強(qiáng)抗凝血酶III(AT-Ⅲ)滅活絲氨酸蛋白酶,,從而具有阻止凝血酶形成,,對抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用,。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5IU 。盡管肝素可以保持紅細(xì)胞的自然形態(tài),,但由于其??梢鸢准?xì)胞聚集在染色時(shí)產(chǎn)生藍(lán)色背景,因此肝素抗凝血不適全血液學(xué)一般檢查,。肝素是紅細(xì)胞透滲脆性試驗(yàn)理想的抗凝劑,。

抗凝機(jī)制:

        肝素是血液化學(xué)成分測定中最好的抗凝劑。肝素是一種含硫酸基團(tuán)的黏多糖,,分子量為1.5萬,,其抗凝機(jī)制是與抗凝酶Ⅱ一起,在低濃度能抑制因子Ⅸa,、Ⅷ和PF3之間的作用,,并能加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶,從而阻止凝血酶形成;還有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用,。


肝素的鹽類有鈉,、鋰、銨鹽,。通常用肝素抗凝的劑量是10.0~12.5IU/mL血液,。臨床常用肝素鋰,雖其價(jià)格較貴,,但抗凝效果較好,。某些生化成分在血清和肝素抗凝的血漿中有明顯的區(qū)別。在凝血過程中由于紅細(xì)胞的溶解破壞使血清鉀的含量比血漿為高,,由于血漿中含有Fg,,其含量比血清高。因此,,測定鉀離子時(shí),,注意血清與血漿之間的差異。


另外肝素過量可引起白細(xì)胞聚集和血小板減少,,故不適于白細(xì)胞分類和血小板計(jì)數(shù),,更不能用于止血學(xué)檢驗(yàn)。通過試驗(yàn)表明,,采血時(shí)加入肝素鈉抗凝劑后,,對測定血液中總蛋白質(zhì)含量結(jié)果有較明顯的影響。但加入了抗凝劑后,,阻斷了凝血活酶的生成,,阻止了血液凝固,導(dǎo)致纖維蛋白原不能水解轉(zhuǎn)化成纖維蛋白單體,,有效阻止了纖維蛋白單體的形成,,這些纖維蛋白原仍留在血漿中,。而血清是血液經(jīng)凝固后,纖維蛋白原水解轉(zhuǎn)化為纖維蛋白單體,,并因凝固而消耗,,離心后隨血細(xì)胞一并分離出去了。


2
乙二胺四乙酸鹽


乙二胺四乙酸(EDTA)鹽 EDTA有二鈉,、二鉀和三鉀鹽,。均可與鈣離子結(jié)全成螯合物,從而阻止血液凝固,。EDTA鹽對紅,、白細(xì)胞形態(tài)影響很小,血細(xì)胞計(jì)數(shù)用EDTA二鉀作抗凝劑,,用量為EDTA-K2,。EDTA-NA與EDTA-K2對血細(xì)胞計(jì)數(shù)影響均較小,,但二鈉溶解度明顯低于二鉀,,有時(shí)影響抗凝效果,其他抗凝劑不適合于血細(xì)胞計(jì)數(shù),。


抗凝機(jī)制:

EDTA是臨檢工作中最常用和最重要的抗凝劑和試劑之一,,其機(jī)制是通過與水相中的鈣離子形成穩(wěn)定的螯合物而阻止血液凝固。EDTA的鹽類有鉀,、鈉,、鋰鹽、均溶于水,,鉀鹽較鈉鹽的溶解度大,,全血胞計(jì)數(shù)最好使用EDTA的鉀鹽。

EDTA能影響某些酶的活性和抑制紅斑狼瘡因子,,故不適于制作組化染色和檢查紅斑狼瘡細(xì)胞的血涂片,。EDTA還會(huì)影響血小板聚集和白細(xì)胞吞噬功能,也不適于做止血學(xué)檢驗(yàn)和血小板功能檢驗(yàn),。

用EDTA抗凝血制備的涂片對粒細(xì)胞形態(tài)有影響,,其影響程度與抗凝血放置時(shí)間和抗凝劑濃度有關(guān)。按照ICSH建議EDTA的使用濃度為1.4~1.6g/L血液,,迅速制備涂片,,粒細(xì)胞形態(tài)特征有微小的改變,有時(shí)細(xì)胞核分葉不見,,細(xì)胞腫脹,。如果用放置時(shí)間較長的血液制備的涂片可出現(xiàn)細(xì)胞漿內(nèi)顆粒消失,胞漿和細(xì)胞核有空泡,,染色質(zhì)模糊不清,。用大于1.5g/L血液濃度制備的血涂片,,粒細(xì)胞可完全變性,對淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞也有影響,,尤其是血小板,,可出現(xiàn)腫脹、破裂而產(chǎn)生碎片,,影響其計(jì)數(shù),,造成結(jié)果偏高

3
枸櫞酸鈉:


枸櫞酸鈉(trisodium citrate)枸櫞酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物,從而阻止血液凝固,。枸櫞酸鈉有2Na3C6H5O7,。和2Na3C6H5。11H2O等多種晶體,。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l濃度),,與血液按1:9或1:4比例使用。枸椽鈉對凝血V因子有較好的保護(hù)作用,,使其活性減低緩,,故常用于凝血象的檢查,也用于紅細(xì)胞沉降率的測定,。因毒性小,,是輸積壓保養(yǎng)中的成分之一。


抗凝機(jī)制:



枸櫞酸鹽主要用于止血學(xué)檢驗(yàn)及血沉的測定,。因其毒性小,,也用于輸血保養(yǎng)液中。其抗凝機(jī)制是枸椽酸鹽與血中鈣離子形成可溶性螯合物,,從而阻止血液凝固,,其反應(yīng)式為Na3C6H5O7 Ca2 →CaC6H5 3Na 。

枸緣酸鈉與血液按1:9使用,。對于用于監(jiān)測口服華法令等抗凝劑治療的患者,,測定PT、APTT所用的枸緣酸鈉濃度不應(yīng)隨意改變,,因?yàn)榭赡苡绊懙絿H標(biāo)準(zhǔn)化比值(INR),。


4
草酸鈉:


草酸鹽是通過其草酸根與血液中的Ca離子形成草酸鈣沉淀,使其無凝血功能,。


草酸鉀常用于供檢驗(yàn)用血液樣品的抗凝,。在試管內(nèi)加飽和草酸鉀溶液2滴(或10%溶液0.2ml),輕輕敲擊試管,,使溶液分散到管壁四周,,置80℃以下的烘箱中烤干(烘烤溫度過高,可使草酸鉀分解為碳酸鉀而失效),,每管能使3~5ml血液不凝,。供鉀,、鈣含量測定的血樣不能用草酸鉀抗凝。


來源:huatongmed

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