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HIV-抗體檢測方法

 好好愛我吧 2014-08-08

HIV-抗體檢測方法

目前作為診斷手段使用的檢測主要包括抗HIV病毒抗體檢測,、病毒培養(yǎng),、核酸檢測和抗原檢測。其中對病毒抗體的檢測是最常規(guī)使用的方法,,這不但是由于這類檢測特異性,、敏感性較高,方法相對簡便,、成熟,,更重要的原因是HIV抗體在病毒感染后除早期短暫的”窗口期”外的整個生命期間長期穩(wěn)定地存在并可被檢測到。在一些特殊情況下,,當抗體檢測無法滿足HIV感染診斷的需要時,,病毒分離及測定、核酸檢測,、抗原檢測可作為輔助手段使用,,這包括對非典型血清學反應樣品的診斷、HIV感染的窗口期診斷,、新生兒早期診斷和對特殊樣品的診斷,。

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1 檢測方法

  目前作為診斷手段使用的檢測主要包括抗HIV病毒抗體檢測,、病毒培養(yǎng)、核酸檢測和抗原檢測,。其中對病毒抗體的檢測是最常規(guī)使用的方法,,這不但是由于這類檢測特異性、敏感性較高,,方法相對簡便,、成熟,更重要的原因是HIV抗體在病毒感染后除早期短暫的”窗口期”外的整個生命期間長期穩(wěn)定地存在并可被檢測到,。在一些特殊情況下,,當抗體檢測無法滿足HIV感染診斷的需要時,病毒分離及測定,、核酸檢測,、抗原檢測可作為輔助手段使用,這包括對非典型血清學反應樣品的診斷,、HIV感染的窗口期診斷,、新生兒早期診斷和對特殊樣品的診斷,。

2 酶聯(lián)免疫

  目前應用的ELISA法有8種之多。它們的特異性和敏感性超過99%,。在一些特殊情況下,,當抗體檢測無法滿足HIV感染診斷的需要時,病毒分離及測定,、核酸檢測,、抗原檢測可作為輔助手段使用,這包括對非典型血清學反應樣品的診斷,、HIV感染的窗口期診斷,、新生兒早期診斷和對特殊樣品的診斷。HIV-抗體檢測方法HIV-抗體檢測方法

3 顆粒凝集

  PA為快速,、簡便的一種篩選方法,。如屬陽性,應經(jīng)WB證實,。PA不需任何特殊儀器,,其結(jié)果用肉眼可判別。全過程僅需5分鐘,。缺點有假陽性,,且價格昂貴。

4 快速試劑

  (一)人類免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗體診斷試劑(膠體硒法) 
  雅培人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑(膠體硒法)是用于體外,,肉眼觀察,,定性的免疫分析,檢測血清或血漿中的HIV-1和HIV-2抗體,,用于幫助受感染個體的HIV-1和HIV-2抗體,。本品僅用于無償獻血員現(xiàn)場初篩及臨床緊急情況的使用,本品檢測陽性者,,需進行進一步篩查確認,。 
  (二)InstantCHEKTM-HIVl+2金標快速診斷試劑 
  InstantCHEKTM-HIV1+2是一種快速、簡單,、靈敏的檢驗方法,, 用以檢測艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗體。該方法適用于初篩檢測,,凡由該試劑測定為陽性者,,需用另一種方法檢測如ELISA或用蛋白印記法確定。

5 確認實驗

  免疫印跡試驗(WB),、條帶免疫試驗(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA),。國內(nèi)常用的確認試驗方法是WB,。
  (一_免疫印跡實驗(westernblot,,WB)是廣泛用于許多傳染病診斷的實驗方法,就HIV的病原學診斷而言,,它是首選的用以確認HIV抗體的確認實驗方法,,WB的檢測結(jié)果常常被作為鑒別其他檢驗方法優(yōu)劣的“金標準”。 
  確認試驗流程:
  有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型,。先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測,,如果呈陰性反應,則報告HIV抗體陰性,;如果呈陽性反應,,則報告HIV-1抗體陽性;如果不滿足陽性標準,,則判為HIV抗體檢測結(jié)果不確定,。如果出現(xiàn)HIV-2型的特異性指示條帶,需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認試驗,,呈陰性反應,,報告HIV-2抗體陰性;呈陽性反應則報告HIV-2抗體血清學陽性,并將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析,,
  WB的敏感性一般不低于初篩實驗,,但它的特異性很高,這主要是基于HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化,,能夠檢測針對不同抗原成分的抗體,,因而能夠用WB方法鑒別初篩實驗的準確性。從WB確認試驗結(jié)果看出,,初篩試驗盡管選擇質(zhì)量較好的試劑,,如第三代ELISA,仍會有假陽性出現(xiàn),,必須通過確認試驗才能得出準確結(jié)果,。
  (二)免疫熒光實驗(IFA) 
  IFA法經(jīng)濟、簡便,、快速,,曾被FDA推薦用于WB不確定樣品的診斷。但需要昂貴的熒光顯微鏡,,需要受過良好訓練的技術人員,、觀察和解釋結(jié)果易受主觀因素的影響,結(jié)果不宜長期保存,,IFA不宜在一般的實驗室開展和應用,。

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