［摘要］  目的  建立反相高效液相法測定增光片中五味子醇甲含量的方法。方法  采用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱,，流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（60∶5∶32）,；檢測波長為250nm。結(jié)果  五味子醇甲在0.0672～0.672μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系;平均回收率為97.64%,，RSD=1.21%,。結(jié)論  該方法不僅操作簡單、準(zhǔn)確,，且重復(fù)性好,，可用于增光片的質(zhì)量控制。
   
　　［關(guān)鍵詞］  反相高效液相法,；增光片,；五味子醇甲；含量測定
   
　　Content determination of schizandrol A in Zengguang tablets

　?。跘bstract］  Objective  To study RP-HPLC methods that determined the schizandrol A content in Zengguang tablets.Methods  Schizandrol A was separated completely on an C18 column,，using a mixture of methanol，acetonitrile and water（60∶5∶32）as mobile phase,，with UV detection at 250nm.Results  Schizandrol A has better linear correlation between 0.0672μg and 0.672μg,，the results also have shown the recovery rate was 97.64%，RSD 1.21%.Conclusion  The methods is very stable and accurate,，and has good reappearance.It can be used for quality control of Zengguang tablets.

　?。跭ey words］  RP-HPLC;Zengguang tablets;schizandrol A;content determination

　　增光片是由枸杞子、當(dāng)歸,、黨參,、茯苓、五味子等10味中藥組成的中藥復(fù)方制劑,。具有補(bǔ)益氣血,、滋養(yǎng)肝腎、明目安神,、增加視力的功效,，臨床上用于治療近視眼［1］。本品收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑第十一冊,，原標(biāo)準(zhǔn)中只有顯微鑒別和通用的理化鑒別,，無含量測定項(xiàng)目，為了更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量,，本文建立反相高效液相色譜法（RP-HPLC）測定增光片中五味子醇甲的含量,，抑制增光片的質(zhì)量，以確保臨床療效［2～5］,。

　　1  儀器與試劑

　　1.1  儀器  日本島津LC-10A高效液相色譜儀,，SPD-10AV紫外檢測器,；CT-100恒溫箱。LC2002數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),。上海必能信CQ-250型超聲波清洗器,。BP211DAG電子天平（德國Sartorius）。

　　1.2  試劑  甲醇為色譜醇,；甲醇,、天水乙醇,、乙腈均為分析純,；水為重蒸水。五味子醇甲（中國藥品生物制品檢定所,，批號(hào)：110857-200304）,；增光片（湖南德海制藥有限公司,，批號(hào)：030426）。

　　2  方法與結(jié)果

　　2.1  色譜條件  （1）色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱Diamonsil（TM）C18（250×4.6mm）,，5μm（迪馬公司）,；（2）流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水（60∶5∶32）；（3）檢測波長：254nm,；（4）流速：1.0ml/min,；（5）柱溫：40℃。

　　2.2  對照品溶液的制備  精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥12h的五味子醇甲對照品,，加甲醇制成每1ml含0.0336mg的溶液,，即得。

　　2.3  供試品溶液的制備  取增光片20片,，除去糖衣,，精密稱定，研細(xì),，取細(xì)粉約2g，精密稱定,，置錐形瓶中,，精密加入甲醇25ml，稱定重量,，超聲處理45min,，放冷，再稱定重量,，以甲醇補(bǔ)足減失的重量,，搖勻，濾過,，即得,。

　　2.4  陰性對照溶液的制備  按處方比例稱取除五味子的其他藥材適量,，依照增光片的制備工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。2.5  線性關(guān)系的考察  分別精密吸取五味子醇甲對照品溶液（濃度0.0336mg/ml）2μl,、4μl,、8μl、12μl,、20μl,，注入液相色譜儀，測定,，以五味子醇甲的進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo),，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,?；貧w方程為Y=8E+06X+23682（r=0.9997）。結(jié)果表明五味子醇甲在0.0672～0.672μg范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系,。

　　2.6  精密度試驗(yàn)  精密吸取五味子醇甲對照品溶液（0.0336mg/ml）10μl,，重復(fù)進(jìn)樣6次，峰面積積分值分別為2395570,、2440616,、2396849、2394535,、2467203,、2425933，RSD=1.24%,。表明本方法精密度良好,。

　　2.7  重復(fù)性試驗(yàn)  取同一批增光片（批號(hào)：030426），除去糖衣,，研細(xì),，取細(xì)粉5份，每份約2g,，精密稱定,，按2.3項(xiàng)下的方法制備樣品，進(jìn)行含量測定,。結(jié)果分別為0.1026mg/片,、0.0999mg/片、0.0992mg/片,、0.0986mg/片,、0.0982mg/片，平均為0.0997mg/片,，RSD為1.75%,。表明本方法具有較好的重復(fù)性,。

　　2.8  穩(wěn)定性試驗(yàn)  取重復(fù)性試驗(yàn)項(xiàng)下試驗(yàn)號(hào)4的供試品溶液，每2h進(jìn)樣1次,，每次10μl,，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果表明在10h內(nèi)峰面積積分值基本穩(wěn)定,，RSD為1.58%,。結(jié)果平均回收率為97.64%，RSD為1.21%,。見表1,。

　　2.9  回收率試驗(yàn)  貯備溶液：精密稱取五味子醇甲對照品3.7mg，置10ml量瓶中,，加甲醇至刻度,，搖勻，制成每1ml中含五味子醇甲0.37mg的溶液,。

　　取已知含量（批號(hào)：030426,，含量為0.0997mg/片）的增光片，除去糖衣,，研細(xì),，取1.0g（6份），精密稱定,，置錐形瓶中,，分別精密加入貯備溶液0.8ml、1ml,、1.2ml,，置水浴上揮發(fā)至干，按供試品溶液制備方法進(jìn)行制備并測定含量,，計(jì)算回收率,，結(jié)果平均回收率為97.64%，RSD為1.21%,。見表1,。

　　表1  回收率試驗(yàn)結(jié)果（略）

　　2.10  樣品測定  按擬定的含量測定方法測定10批增光片中五味醇甲的含量，結(jié)果見表2,。

　　表2  含量測定結(jié)果（略）

　　3  討論

　　筆者曾對提取溶媒,、提取時(shí)間進(jìn)行了考察,，結(jié)果以加入甲醇,、超聲處理45min為佳。干擾試驗(yàn)結(jié)果表明：五味子的陰性對照樣品無干擾,。方法學(xué)考察結(jié)果表明：五味子醇甲在0.0672～0.672μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,；該方法精密度良好,，具有較好的重復(fù)性和穩(wěn)定性，平均回收率為97.64%,。因此該方法可用于增光片的質(zhì)量控制,。根據(jù)測定的結(jié)果，并考慮到藥材的產(chǎn)地,、采收,、加工等因素，暫定每片增光片含五味子以五味子醇甲（C24H32O7）計(jì),，不得少于0.05mg,。

　　［參考文獻(xiàn)］

　　1  中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，1996,，207.

　　2  趙陸華.高效液相色譜法分析中藥成分手冊.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,，1994，216.

　　3  楊云.中藥化學(xué)成分提取分離手冊.北京：中國中醫(yī)藥出版社,，1998,，73.

　　4  陳德昌.中藥化學(xué)對照品工作手冊.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2000,，18.

　　5  譚生建.肝復(fù)康中五味子醇甲和五味子乙素含量測定方法的研究.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào),，2000，16（5）：270.