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【摘要】 目的制備蝎龍接骨散并建立質(zhì)量控制方法。方法配制蝎龍接骨散,，采用高效液相色譜（HPLC）法測定蝎龍接骨散中血竭素的含量,。結(jié)果該制劑各項檢查均符合蝎龍接骨散質(zhì)量標準的有關(guān)規(guī)定；血竭素在9.59～47.94 mg·L-1濃度范圍內(nèi),，峰面積與濃度線性關(guān)系良好,，相關(guān)系數(shù)r=0.999 6，加樣平均回收率為99.86%(RSD=0.96％),。結(jié)論蝎龍接骨散制備工藝簡單,，質(zhì)量穩(wěn)定，質(zhì)控方法可行,。 【關(guān)鍵詞】 蝎龍接骨散,；制備；質(zhì)量控制 蝎龍接骨散是廣西醫(yī)科大學第四附屬醫(yī)院在科研的基礎(chǔ)上自主研究開發(fā)的散劑,，該制劑已獲得自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局生產(chǎn)批準文號（桂藥制字：20060003）,，具有活血化瘀、消腫止痛、續(xù)筋接骨之功效,，臨床用于治療各種跌打損傷,、閉合性骨折等，療效確切?，F(xiàn)將其制備方法及質(zhì)量控制報道如下,。 1 儀器與材料 日本島津LC10Avp高效液相色譜儀（LC10AT泵，SPD10Avp檢測器,，CBM102數(shù)據(jù)處理機,，CSLight色譜數(shù)據(jù)工作站）；血竭素高氯酸鹽對照品（中國藥品生物制品檢定所,，批號：0811-200203,，20 mg/支，含量：100%）,；薄層層析用硅膠G(青島海浪硅膠干燥劑廠),；蝎龍接骨散（自制）；乙腈為色譜純,，其他試劑為分析純,。 2 處方及制備 2.1 處方 自然銅247 g，土鱉蟲66 g,，全蝎90 g,，血竭54 g，骨碎補66 g,，當歸54 g,，白及108 g，珍珠末54 g,，兒茶108 g,，三七27 g，大黃27 g,，桃仁54 g,，紅花18 g,。 2.2 制備工藝 將13味藥材于80℃下烘烤干燥,、消毒2 h；取自然銅,、全蝎分別粉碎成細粉,；將上述粉末與珍珠末配研，過篩,，備用,；另將當歸、骨碎補等10味粉碎成細粉，與上述粉末混勻,，以100 g的規(guī)格分裝于玻璃瓶中,，密封即得。 3 質(zhì)量控制 3.1 性狀本品為灰黃色至棕褐色粉末,。 3.2 鑒別 ①取本品約0.1 g,，加稀鹽酸1 ml ，加熱煮沸數(shù)分鐘,，濾過,，濾液顯鐵鹽的鑒別反應［1］。 ②取本品約1.0 g,，加氯仿100 ml,，超聲處理30 min，濾過,，濾液蒸干,，殘渣加甲醇2 ml使溶解，作為供試品溶液,。另取血竭對照藥材1.0 g,，加甲醇5 ml，振搖使溶解,，濾過,，濾液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法［1］,，吸取上述兩種溶液各10 μl,，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇(19∶1)為展開劑,，展開,，取出，晾干,。供試品色譜中,，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點,。見圖1,。 3.3 檢查應符合散劑項下有關(guān)的各項規(guī)定［1］。 3.4 穩(wěn)定性實驗 取按醫(yī)院制劑用包裝的接骨散3批,，在常溫下放置保存12個月,，并于放置期間監(jiān)測控制溫度與濕度。分別于第0,、3,、6,、9、12個月取樣一次,，按穩(wěn)定性重點考察項目檢測：對其性狀,、鑒別、均勻度,、水分,、微生物限度等項目，按擬定的蝎龍接骨散質(zhì)量標準,、《中國藥典》2005年版Ⅰ部檢驗,。將結(jié)果與0個月比較，各項考察指標基本無變化,。 3.5 含量測定 3.5.1 色譜條件和系統(tǒng)適應性 色譜柱：VP-ODS 柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,，流動相：乙腈-0.05 mol·L-1磷酸二氫鈉溶液(45∶55)（用磷酸調(diào)pH值為3.0～3.8），檢測波長為440 nm,；柱溫40℃,。流速：1.0 ml/min,靈敏度：1.0AUFS，進樣10 μl,。理論板數(shù)按血竭素峰計算應不低于3 000,。色譜圖見圖2。 3.5.2 對照品溶液的制備 精密稱取血竭素高氯酸鹽對照品33.01 mg,，置100 ml棕色量瓶中,，加3.5％磷酸甲醇溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻,，即得濃度為239.72 mg·L-1(以血竭素計算,，換算關(guān)系為：血竭素重量=血竭素高氯酸鹽重量/1.377)的對照品儲備液。 3.5.3 供試品溶液及陰性對照溶液的制備 精密稱取蝎龍接骨散約 0.4 g,，置具塞試管中,，精密加入甲醇-氯仿(3∶1)混合液5 ml，密塞,，振搖,，離心，取上清液蒸干,，精密加入3.5％磷酸甲醇溶液至10 ml,，密塞，振搖3 min,，濾過,，精密量取續(xù)濾液 1 ml,，置5 ml棕色量瓶中,，加甲醇至刻度,，搖勻，即得,。同法制備不含血竭的陰性對照溶液,。 3.5.4 線性關(guān)系考察 分別精密量取上述對照品儲備液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 ml，置25 ml棕色量瓶中,，加甲醇至刻度,，搖勻，濾過,，即得含血竭素9.59,，19.18，28.77,，38.36,，47.94 mg·L-1(以血竭素計算)的對照品溶液，分別取10 μl進樣,，測定峰面積,，以峰面積（Y）為縱坐標，濃度（X）為橫坐標,，進行線性回歸,，得回歸方程：Y=35 764X +53 107.6，相關(guān)系數(shù)r=0.999 6,，線性范圍為9.59～47.94 mg·L-1,。 3.5.5 精密度實驗 在上述色譜條件下，取濃度為28.77 mg·L-1的對照品溶液,重復進樣6次,，連續(xù)5 d測定,，RSD（日內(nèi)）為0.58%,RSD（日間）為0.69%，精密度良好,。 3.5.6 重現(xiàn)性實驗 取樣品5份,，按“樣品測定”項下方法測定含量，結(jié)果測得血竭素的平均含量為3.108 mg/g,，RSD為0.69％,。 3.5.7 加樣回收率實驗 精密稱取已知含量的蝎龍接骨散0.4 g (批號:071022，含量:3.101 mg·g-1),，共6份,，分別精密加入不同量的血竭素高氯酸鹽對照品(以血竭素計算)，照樣品測定方法操作,，計算回收率,。結(jié)果見表1。表1 回收率實驗結(jié)果（略） 3.5.8 樣品測定 精密稱取不同批號的樣品,，按“3.5.3”項下方法制備供試品溶液,，在“3.5.1” 項色譜條件下,，精取10 μl進樣測定，計算血竭素含量,，每批樣品重復測定5次,。結(jié)果見表2。表2 樣品含量測定結(jié)果（略） 4 討論 血竭素不穩(wěn)定,，在操作中盡量避光,。加少量磷酸成酸性為使其穩(wěn)定并加速溶解，血竭素即使制成鹽也不穩(wěn)定,，很容易在色譜中出現(xiàn)雙峰,，所以用棕色瓶保存，供試品溶液應及時測定,。 本制劑是具有自主知識產(chǎn)權(quán)并獲得制劑生產(chǎn)批準文號的產(chǎn)品,，不斷提高質(zhì)量控制標準對制劑的推廣使用有很好的促進作用。本研究用薄層色譜法和高效液相色譜法分別對主要活性成分血竭素進行了定性鑒別和含量測定,。并把它們作為制劑質(zhì)量控制的關(guān)鍵指標,。能很好地控制制劑的質(zhì)量，使制劑質(zhì)量穩(wěn)定可控,。 【參考文獻】 ?。?］國家藥典委員會.中國藥典，Ⅰ部［S］.北京：化學工業(yè)出版社,，2005：附錄Ⅳ,，附錄VIB，附錄IB. |
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