第三節(jié)       細菌的代謝與培養(yǎng)基

新陳代謝( metabolism)足生物有機體基本的特征之一，是生命活動中一切生化反應的總稱,。它包括物質(zhì)的分解和物質(zhì)的合成過程,。細菌吸收了外界的營養(yǎng)，在酶的作用下將其分解,，再在酶的作用下臺成細菌菌體的成分,。分解與合成兩個過程伴同發(fā)生,，緊密相關(guān)，維持了細菌細胞的生命,，進行細菌的生長,。通過檢測細菌系統(tǒng)及代謝產(chǎn)物的生理，來鑒定細菌的

試驗稱生化試驗,。

生化試驗可分為糖代謝試驗,、蛋白質(zhì)代謝試驗、鹽利用試驗和呼吸酶類斌驗4種,。

l.代謝試驗

①氧化發(fā)酵試驗O-F,；②糖（醇）類發(fā)酵試驗；③VP和甲基紅試驗

2.蛋白質(zhì)代謝試驗

①蛋白水解試驗,；②硫化氫試驗,；③吲哚試驗；④脫羧酶試驗,；③脫氨試驗,；⑥尿素酶試驗。

3.鹽類代謝試驗

①枸櫞酸鹽試驗,；②丙二酸鹽利用試驗,；③硝酸鹽還原試驗

4．呼吸酶類試驗

①氧化酶試驗；②細胞色素氧化酶試驗

表   IMVIC試驗對腸桿菌屬的鑒別作用

 

表  硫化氫和尿素酶試驗對腸桿菌屬的鑒別

 

 

 

 

在培養(yǎng)基中加入指示劑或某種化學物質(zhì)抑制不需要的細菌生長,，利于需要的細菌分離,，這種培養(yǎng)基稱為選擇性培養(yǎng)基。常用的抑菌劑有膽鹽,、煌綠,、玫瑰紅鈉、亞硒酸鈉等,。常用的指示荊有溴甲酚紫,、溴麝香草酚藍等。美藍是氧化還原指示劑,。

    例如,，在培養(yǎng)基內(nèi)加入青霉素可抑制革蘭陽性細菌，而利于革蘭陰性細菌的生長,；如果加入鏈霉素,，則可獲得與加青霉素相反的選擇效果；加入制霉素可抑制真菌,，有利于細菌的分離,。又如亞硫酸鉍瓊脂，既能抑制革蘭陽性細菌生長,，又能抑制許多革蘭陰性細菌生長,，但傷寒沙門菌卻能在這個培養(yǎng)基上生長出具有棕色環(huán)的菌落,。SS瓊脂是臨床細菌檢驗中一種常用的選擇性培養(yǎng)基。大腸埃希菌在SS培養(yǎng)基上,，因發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸,，使指示劑中性紅變深，并使膽鹽沉淀,，所以菌落紅色而不透明。沙門菌分解含硫氨基酸而產(chǎn)生硫化氫,，硫化氫與枸櫞酸鐵形成硫化鐵,，所以菌落中心呈黑色。痢疾志賀菌,，既不發(fā)酵乳糖也不產(chǎn)生硫化氧,，所以菌落無色透明，中等大小,。糞鏈球菌可被枸櫞酸鈉抑制,。枸櫞酸鐵有中和中性紅的毒性的作用。硫代硫酸鈉可緩解膽鹽對志賀菌的毒害,，中和煌綠和中性紅的毒性,，還可使大腸埃希菌落顏色鮮艷。常用的選擇性培養(yǎng)基還有麥康凱( MacC)瓊脂,、伊紅美蘭(EMB)

瓊脂,、膽硫乳( DHL)瓊脂及堿性瓊脂等。