CO₂培養(yǎng)箱消毒

CO₂培養(yǎng)箱是實驗室必備的儀器，但因其中需放置盛水容器而濕度較高，從而導(dǎo)致霉斑（經(jīng)培養(yǎng)鑒定為絲狀真菌）快速生長而影響工作,，有礙觀瞻和可能導(dǎo)致試驗樣本污染或院內(nèi)感染擴(kuò)散,。雖使用了硫酸銅溶液,、75％乙醇溶液或紫外線照射等多種消毒措施,，仍然沒有顯著的效果,。我們從文獻(xiàn)和實踐中發(fā)現(xiàn),，一般認(rèn)為不適合在這種情況下使用的市售高氯消毒片當(dāng)加大劑量和使用中和劑時,，具有安全和徹底的去除這類霉斑的效果。如果是隔水式培養(yǎng)箱可以采用甲酸熏蒸（甲醛與高錳酸鉀反應(yīng)生成甲酸）,，然后再用75％酒精擦培養(yǎng)箱內(nèi)壁即可,，效果比較好。如果是氣套式的培養(yǎng)箱用75％酒精直接擦培養(yǎng)箱內(nèi)壁即可,，或采用隔水式熏蒸,，但熏蒸前要先將二氧化碳和溫度探頭封閉好，防止甲酸腐蝕,。

超凈臺無菌操作注意事項

(1)實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70% 酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風(fēng)機運轉(zhuǎn)10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細(xì)胞,以免造成細(xì)胞交叉污染.實驗結(jié)束后,將實驗物品帶出工作臺.如需要繼續(xù)進(jìn)行下一個實驗,則用70% 酒精擦拭無菌操作臺面,再讓無菌操作臺風(fēng)機運轉(zhuǎn)10分鐘后,才可進(jìn)行下一個實驗操作.

(2)無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔與寬敞,必要物品,如試管架,移液器或吸管頭等可以暫時放置,其它實驗用品用完后應(yīng)及時移出,以利氣體流通.實驗用品要用70%酒精擦拭后才能帶入無菌操作臺內(nèi).實驗操作應(yīng)在操作臺中央無菌區(qū)域內(nèi)進(jìn)行,勿在邊緣非無菌區(qū)域操作.

(3)小心取出無菌實驗用品,避免造成污染.切勿碰觸吸管與吸頭頭部或容器瓶口,不要在打開的容器正上方操作實驗.容器打開后,用手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放在臺面上.

(4)工作人員應(yīng)注意自身的安全,必須穿戴實驗衣與手套后才進(jìn)行實驗.對于來自人源性或病毒感染的細(xì)胞株應(yīng)特別小心,并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺(至少兩級).操作過程中,應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,小心有毒性試劑,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳物品傷人等.

(5)定期檢查下列項目:CO2鋼瓶內(nèi)的CO2壓力;CO2培養(yǎng)箱內(nèi)的CO2濃度,溫度,及水盤是否有污染;無菌操作臺內(nèi)氣流壓力是否正常,定期更換紫外燈管及HEPA過濾器濾膜,預(yù)濾網(wǎng)（300小時/預(yù)濾網(wǎng),3000小時/HEPA).