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發(fā)酵工藝:大腸桿菌發(fā)酵過程中的噬菌體污染

 東營菌物科學 2023-03-17 發(fā)布于山東

1.噬菌體污染







在大腸桿菌的發(fā)酵過程中,可能會遇到噬菌體感染,。噬菌體是一種寄生于細菌體內(nèi)的病毒,,它能夠侵入細菌細胞內(nèi)部,利用細菌自身的代謝系統(tǒng)進一步復制自身的遺傳物質(zhì),,最終導致細菌破裂死亡,。 大腸桿菌是一種重要的發(fā)酵菌,它在釀造,、乳制品,、食品工業(yè)中廣泛應用。但是,,噬菌體感染可能會導致大腸桿菌發(fā)酵過程中的一系列問題,,例如菌種污染、發(fā)酵異常,、品質(zhì)下降等,,從而影響產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量。大腸桿菌發(fā)酵菌體感染了噬菌體,,必會導致發(fā)酵不正常進行,,甚至倒灌












其主要癥狀有:

(1) 菌體生長受到影響,,發(fā)酵液(OD值)光密度不上升或回降(2)pH逐漸上升,;

(3) 氨利用停止;

(4) 糖耗,、溫升緩慢或停止,;

(5) 產(chǎn)生大量泡沫,是發(fā)酵液呈黏膠狀,;

(6) 鏡檢時菌體數(shù)量顯著減少,,甚至找不到完整的菌體;

(7) 發(fā)酵周期延長、產(chǎn)物生成量減少或停止,;

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2.生產(chǎn)影響





若生產(chǎn)用的大腸桿菌菌株受到溶原性噬菌體污染,,可能會影響生產(chǎn)。這是因為溶原性噬菌體可以感染細菌并降解它們的細胞壁,,最終導致細胞破裂,,細胞內(nèi)物質(zhì)釋放這些釋放的物質(zhì)可能會嚴重影響生產(chǎn)中所需的產(chǎn)物的產(chǎn)量和品質(zhì),。

 另外,,噬菌體感染可能會引起發(fā)酵反應的異常,導致產(chǎn)物的成分和品質(zhì)出現(xiàn)變化,。此外,溶原性噬菌體還可能導致細菌菌種污染并繁殖,,從而影響生產(chǎn)質(zhì)量和產(chǎn)量,。

因此,在生產(chǎn)中應該采取措施預防噬菌體污染,??梢赃x擇高品質(zhì)培養(yǎng)基和菌種,加強衛(wèi)生管理,,定期檢測發(fā)酵液中的細菌情況,,及時發(fā)現(xiàn)異常狀況。在生產(chǎn)中注意使用適量的抗噬菌體劑,,以預防噬菌體污染,。如果發(fā)現(xiàn)噬菌體污染,需要立即采取清潔和消毒措施,,以最大限度地減少對生產(chǎn)過程和產(chǎn)品的影響,。

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3.防止措施





發(fā)酵生產(chǎn)時浸染噬菌體會嚴重的影響工作的正常開展,所以在工作中更要嚴加防范,,細節(jié)措施落實到位,。

1) 從菌種克隆及保存開始,克隆菌種的感受態(tài)菌體及其它物料要保證純凈沒有被污染,,保存菌種的環(huán)境要潔凈避免菌種保存過程中被污染(特別注意,,發(fā)生異常的菌種要立馬和其它菌種分開保存),且保存菌種的同時要保存質(zhì)粒以備菌種異常時立馬轉(zhuǎn)化新菌種,。

2) 發(fā)酵時的培養(yǎng)基要保證沒有被噬菌體浸,,特別是酵母浸膏可通過培養(yǎng)噬菌體的方式去檢測其沒有被浸染。

3) 發(fā)酵場所要保持清潔,,要定期進行消毒處理,。空氣系統(tǒng)要定期消毒并檢查,發(fā)酵種子制備的環(huán)境要保持潔凈,,地溝,,污水池等也要保持清潔,并定期消毒,,補料設施要嚴格進行消毒,,定期檢測發(fā)酵罐,避免消毒死角的存在,。

4) 發(fā)酵罐接種時要無菌操作,,避免接種時污染。

5) 發(fā)酵過程取樣后廢液要進行收集滅菌處理,,發(fā)酵過程的尾氣要處理后再排掉,。

6) 發(fā)酵液離心后的上清要進行滅菌處理,并和發(fā)酵空間隔開處理,,發(fā)酵場所灑落的培養(yǎng)基等要及時清洗干凈,。

發(fā)酵菌一旦浸染噬菌體后,就要從菌種,,培養(yǎng)基,,環(huán)境,發(fā)酵系統(tǒng)管路,,地溝,,污水池,排風口等進行全面的消毒排查,,物理消毒方式通常很難將噬菌體消除,,通常需要物理和化學方式相結(jié)合處理噬菌體污染。


4.檢測方法

在線近紅外分析儀,,型號:DA-7G

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大腸桿菌發(fā)酵菌種侵染噬菌體后,,必要時暫停發(fā)酵培養(yǎng)工作,對整個發(fā)酵環(huán)境,,管路,,器材進行消毒處理,可用紫外燈照射加過氧化氫干霧熏蒸的方式對整個發(fā)酵場所進行消毒,,在不影響生產(chǎn)的情況,,可以停止發(fā)酵一個月的時間,讓發(fā)酵環(huán)境的活大腸桿菌消除或減少到最低限度,。檢測大腸桿菌菌株中溶原性噬菌體污染的主要方法有以下幾種:

4.1.直接培養(yǎng)法

將檢測大腸桿菌菌株接入富含營養(yǎng)成分的寒天培養(yǎng)基中進行培養(yǎng),,在培養(yǎng)基表面均勻涂布含有大腸桿菌素的培養(yǎng)基,培養(yǎng)后在培養(yǎng)基表面觀察細菌生長狀態(tài),,若出現(xiàn)溶菌環(huán)即表示該菌株存在噬菌體污染,。

4.2.電子顯微鏡檢測法

該方法可以通過觀察大腸桿菌菌株的細胞結(jié)構(gòu),,直接判斷是否存在噬菌體污染。通過電子顯微鏡可以清晰地觀察到細菌細胞內(nèi),、表面以及周圍存在的各種病毒,、噬菌體等微生物。

4.3.基因檢測法

該方法是以PCR技術(shù)為基礎,,針對噬菌體的不同基因進行擴增和檢測,,通過比對結(jié)果判斷大腸桿菌菌株中是否存在噬菌體。該方法特異性高,,靈敏度較好,。

4.4.酶聯(lián)免疫吸附測定法

通過特異的抗體識別和測定檢測樣品中的噬菌體數(shù)量,從而判斷大腸桿菌菌株中是否存在噬菌體污染,。該方法操作簡便,,結(jié)果準確可靠。 

針對不同的檢測方法,,需要根據(jù)實際需要進行選擇,,以達到較好的檢測效果。 總之,,隨著科技的進步,人類對噬菌體研究的深入,,今后將會有更多有效的措施用于工業(yè)噬菌體的防治,,確保發(fā)酵生產(chǎn)的正常運行。







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