梅毒,，是由梅毒螺旋體（TPA）引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病,，它是全球最常見(jiàn)的性傳播感染之一,，據(jù)估計(jì)每年約有630萬(wàn)人感染。

實(shí)際上,，感染梅毒后在早期發(fā)現(xiàn)就很容易治療,，但如果發(fā)展到晚期，會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的長(zhǎng)期健康問(wèn)題,，包括器官損傷甚至死亡,。在懷孕期間感染梅毒的孕婦可通過(guò)胎盤(pán)傳染給胎兒，引起胎兒宮內(nèi)感染,，導(dǎo)致先天梅毒,。這也是全球第二大死產(chǎn)原因，也可能會(huì)對(duì)足月新生兒產(chǎn)生嚴(yán)重的發(fā)育后果,。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)于梅毒診斷至關(guān)重要,，但現(xiàn)有的檢測(cè)方法難以兼顧靈敏性和特異性，沒(méi)有一種單一的診斷測(cè)試具有足夠的靈敏性和特異性來(lái)識(shí)別梅毒的各個(gè)階段,。

梅毒的發(fā)病率在上世紀(jì)80年代和90年代一度有所下降，部分原因是由于艾滋病的流行,，各國(guó)對(duì)安全性行為做了大量科普宣傳,。然而，自21世紀(jì)初以來(lái),，梅毒發(fā)病率大幅回升,，在一些國(guó)家激增了300%以上。據(jù)中國(guó)疾控中心的數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)2020年梅毒新發(fā)病例超過(guò)46萬(wàn)例,。因此,，開(kāi)發(fā)高靈敏度和特異性的梅毒檢測(cè)方法顯得尤為重要。

2017年,，張鋒開(kāi)發(fā)出了基于CRISPR-Cas13的高靈敏度和高特異性的病毒檢測(cè)技術(shù)——SHERLOCK,。此后，基于CRISPR-Cas系統(tǒng)的病原體檢測(cè)技術(shù)快速發(fā)展,，已被成功應(yīng)用于診斷多種病原體,，例如新冠病毒、寨卡病毒,、埃博拉病毒,、登革熱病毒、拉沙病毒,、人乳頭瘤病毒,，以及瘧原蟲(chóng)、銅綠假單胞菌等,，還可以通過(guò)通過(guò)區(qū)分單核苷酸突變（SNV）進(jìn)行基因分型和耐藥性監(jiān)測(cè),。

這為克服當(dāng)前梅毒檢測(cè)的局限性提供了令人興奮的新方法。

近日,，南方醫(yī)科大學(xué)皮膚病醫(yī)院鄭和平教授和楊斌教授團(tuán)隊(duì)在 Nature 子刊 Nature Communications 發(fā)表了題為：A suite of PCR-LwCas13a assays for detection and genotyping of Treponema pallidum in clinical samples 的研究論文,。

該研究開(kāi)發(fā)了一種將PCR和CRISPR-Cas13a結(jié)合的梅毒螺旋體的檢測(cè)方法，該方法性能強(qiáng)大,，與PCR相比,，靈敏度提高了一個(gè)數(shù)量級(jí)，此外,，該方法還可以用于梅毒螺旋體的譜系鑒定和耐藥基因分型鑒定,。這以基于CRISPR的檢測(cè)方法在改進(jìn)梅毒的診斷和流行病學(xué)監(jiān)測(cè)方面具有巨大潛力和應(yīng)用價(jià)值。

用于診斷梅毒的常用檢測(cè)方法的性能因感染階段和樣本類(lèi)型而有很大差異,。為了滿(mǎn)足改進(jìn)梅毒診斷的需要,，研究團(tuán)隊(duì)將PCR技術(shù)與CRISPR-LwCas13a技術(shù)結(jié)合，從而實(shí)現(xiàn)針對(duì)不同模板的具有高敏感性和特異性的體外檢測(cè)技術(shù),。

根據(jù)梅毒螺旋體的tpp47基因（用于診斷梅毒螺旋體）,、tp0548基因（用于譜系鑒定）、23S rRNA（用于大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗性基因識(shí)別）,，分別設(shè)計(jì)對(duì)應(yīng)的PCR擴(kuò)增引物與crRNA實(shí)現(xiàn)對(duì)梅毒螺旋體的檢測(cè),、譜系鑒定和抗性基因分型鑒定。

PCR-LwCas13a檢測(cè)的分析靈敏度比具有同等特異性的實(shí)時(shí)PCR高出一個(gè)數(shù)量級(jí),。當(dāng)應(yīng)用于一組216個(gè)生物樣本（包括135個(gè)臨床確認(rèn)的原發(fā)性和繼發(fā)性梅毒樣本）時(shí),，PCR-LwCas13a檢測(cè)顯示出93.3%的臨床敏感性和100%的特異性，這優(yōu)于針對(duì)tpp47基因的實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)和兔感染性檢測(cè)（這是當(dāng)前檢測(cè)梅毒螺旋體最敏感可靠的方法）。此外,，該方法還能夠進(jìn)一步區(qū)分梅毒螺旋體譜系并鑒定大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗性遺傳標(biāo)記,。

總的來(lái)說(shuō)，這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,，這一基于CRISPR-Cas13a的方法在改善梅毒診斷和流行病學(xué)監(jiān)測(cè)方面具有巨大潛力和應(yīng)用價(jià)值,。據(jù)悉，研究團(tuán)隊(duì)已針對(duì)這一檢測(cè)方法申請(qǐng)了專(zhuān)利,。