實(shí)驗(yàn)診斷-血栓與止血檢測(cè) 第四節(jié) 抗凝系統(tǒng)監(jiān)測(cè)第六節(jié) 血液流變學(xué)檢測(cè)第八節(jié) 檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用血管壁、血小板,、凝血因子,、抗凝系統(tǒng)和纖溶活性檢測(cè)的篩檢試驗(yàn)以及篩檢試驗(yàn)的選擇和應(yīng)用;DIC的實(shí)驗(yàn)診斷指標(biāo)以及肝素(uFH,、LMWH),、口服抗凝劑(華法林)的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo),。vWF∶Ag、PAgT,、P-選擇素,、FⅧ∶C、FⅨ∶C,、Fg,、AT∶A、3P試驗(yàn),、FDP和D-D定量測(cè)定等的檢測(cè)原理和臨床意義,;一期和二期止血缺陷的實(shí)驗(yàn)診斷程序以及ITP、血友病,、肝病出血和血栓前狀態(tài)的實(shí)驗(yàn)診斷方法 ,。TM∶Ag、TxB2,、sFMC,、PC和PS測(cè)定,MAIPA測(cè)定,,t-PA和PAI-1測(cè)定,,TAT和PAP測(cè)定等的檢測(cè)原理和臨床意義;易栓癥和動(dòng)靜脈血栓的實(shí)驗(yàn)檢測(cè),;血栓彈力圖的檢測(cè)原理和臨床意義,。? 將皮膚刺破后,,讓血液自然流出到血流自然停止所需的時(shí)間稱為出血時(shí)間(BT),。? WHO推薦用模板法或出血時(shí)間測(cè)定器法? BT延長(zhǎng)見于:血小板明顯減少;血小板功能異常,;嚴(yán)重缺乏血漿某些凝血因子,;血管異常。通過(guò)給手臂局部加壓(標(biāo)準(zhǔn)壓力)使靜脈血流受阻,,給予毛細(xì)血管壁額外負(fù)荷,,檢查一定范圍內(nèi)皮膚出現(xiàn)出血點(diǎn)的數(shù)目來(lái)估計(jì)血管壁的通透性和脆性。減低見于血管性血友?。╲WD),是診斷vWD及其分型的指標(biāo)之一,。vWF:Ag,、vWF:A和FⅧ:C均正常,基本可以排除血友病A和vWDvWF:Ag、vWF:A和FⅧ:C三項(xiàng)中有一項(xiàng)降低,,則應(yīng)計(jì)算:vWF:A/vWF:Ag比值和FⅧ:C/vWF:Ag比值是血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗凝指標(biāo)之一4.血漿凝血酶調(diào)節(jié)蛋白抗原測(cè)定是血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗凝指標(biāo)之一TM:Ag水平增高反映血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗凝作用增強(qiáng),,見于血栓性疾病? 減低(<40%):見于特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP),、血小板增多癥,、血小板無(wú)力癥、紅細(xì)胞增多癥,、低(無(wú))纖維蛋白原血癥,、多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥等,。(一)單克隆抗體血小板抗原固定試驗(yàn)(MAIPA)? 作為免疫學(xué)診斷及鑒別診斷的依據(jù)? PAgT增高見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病? PAgT減低見于血小板無(wú)力癥,、尿毒癥、肝硬化,、骨髓增生性疾病,、原發(fā)性血小板減少性紫癜、急性白血病,、服用抗血小板藥,、低(無(wú))纖維蛋白原血癥等 血小板膜上的磷脂酰絲氨酸為FⅩa、FⅤa,、Ca2+結(jié)合形成凝血酶原酶提供催化表面,,后者使凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟福瑥亩寡獫{發(fā)生凝固,。 TXB2是花生四烯酸代謝的較TXA2更穩(wěn)定的產(chǎn)物之一,,有促血管收縮和促血小板聚集的作用。TXA2與PGI2具有平衡作用,。(一)活化的部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定(APTT)? APTT延長(zhǎng) 見于多種因子缺乏,以及抗凝物質(zhì)增多? APTT是監(jiān)測(cè)普通肝素和診斷狼瘡抗凝物質(zhì)的常用試驗(yàn) 本試驗(yàn)是反映由因子Ⅻ被負(fù)電荷表面(玻璃等)激活到纖維蛋白形成,,即反映內(nèi)源凝血系統(tǒng)的凝血過(guò)程,。 CT延長(zhǎng)見于:因子Ⅷ、Ⅸ,、Ⅺ明顯減少,,即依次分別為血友病A、B和因子Ⅺ缺乏癥,;凝血酶原,、因子V、X等重度減少,,如嚴(yán)重的肝損傷等,;纖維蛋白原嚴(yán)重減少,,如纖維蛋白(原)減少癥、DIC等,;應(yīng)用肝素,、口服抗凝藥時(shí);纖溶亢進(jìn)使纖維蛋白原降解增加時(shí),;循環(huán)抗凝物質(zhì)增加,,如肝素和類肝素物質(zhì)增多等;DIC,,尤其在失代償期或顯性DIC時(shí)CT延長(zhǎng),。(三)血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定(PT) PTR及INR是監(jiān)測(cè)口服抗凝劑的首選指標(biāo)? 血漿凝血因子Ⅷ,、Ⅸ,、Ⅺ、Ⅻ促凝活性測(cè)定? 血漿因子Ⅱ,、Ⅴ,、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測(cè)定第四節(jié) 抗凝系統(tǒng)檢測(cè)1.血漿凝血酶時(shí)間 測(cè)定在受檢血漿中加入“標(biāo)準(zhǔn)化”凝血酶溶液,,到開始出現(xiàn)纖維蛋白絲所需的時(shí)間。2.血漿凝血酶時(shí)間甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)或血漿游離肝素時(shí)間 在TT延長(zhǎng)的受檢血漿中加入少量甲苯胺藍(lán),,再測(cè)定TT,。若延長(zhǎng)的TT恢復(fù)至正常或明顯縮短,,則表示受檢血漿中有類肝素物質(zhì)存在或肝素增多,;若不縮短,則表示受檢血漿中存在其他抗凝血酶類物質(zhì)或缺乏纖維蛋白原,。3.APTT交叉試驗(yàn) 延長(zhǎng)的APTT,,若能被1/2量的正常新鮮血漿所糾正,表示受檢血漿中可能缺乏凝血因子,;若不能糾正則表示受檢血漿中可能存在抗凝物質(zhì),。4.血漿凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物測(cè)定2.血漿纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物測(cè)定4.血漿魚精蛋白副凝固試驗(yàn)(3P試驗(yàn))5.血漿纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物測(cè)定第六節(jié) 血液流變學(xué)檢測(cè)1.全血黏度測(cè)定 全血黏度主要影響因素包括血細(xì)胞比容,、紅細(xì)胞聚集性和變形性,、血漿黏度等。低切變率下的全血黏度反映紅細(xì)胞聚集性,高切變率下的全血黏度反映紅細(xì)胞變形性,。? 全血黏度增高:見于冠心病,、心肌梗死、腦血管疾病,、靜脈血栓形成,、糖尿病、高脂血癥,、惡性腫瘤,、肺源性心臟病、真性紅細(xì)胞增多癥,、多發(fā)性骨髓瘤,、原發(fā)性巨球蛋白血癥、休克,、燒傷等,。? 全血黏度減低:見于貧血、嚴(yán)重失血和重度纖維蛋白原等凝血因子缺乏癥,。2.血漿黏度測(cè)定 血漿黏度的影響因素包括纖維蛋白(原)、血清球蛋白,、血清清蛋白,、脂類、血糖等,。3.全血還原黏度測(cè)定 其升高和降低的變化主要反映紅細(xì)胞自身流變特性對(duì)血液黏度的影響,。4.血沉方程K值 通過(guò)計(jì)算公式,將血沉轉(zhuǎn)化為不依賴于血細(xì)胞比容的指標(biāo),,它可以更準(zhǔn)確地反映紅細(xì)胞聚集性變化,。血栓彈力圖(thrombelastograph,TEG)系采用物理和化學(xué)的方法檢測(cè)血液凝固狀態(tài)。37°C條件下,,抗凝全血在圓柱型的檢測(cè)杯中,,以4°45’角(頻率0.1 Hz),來(lái)回?cái)[動(dòng),。接觸血液的懸垂絲穿過(guò)杯蓋聯(lián)接扭力傳感器,。血樣呈液體狀態(tài)時(shí),杯子的擺動(dòng)不影響杯蓋,。當(dāng)血凝塊一旦形成,,可將杯和蓋緊密相連,杯子擺動(dòng)所產(chǎn)生的扭轉(zhuǎn)力以及改變了的黏彈性傳導(dǎo)至杯蓋和懸垂絲,。血塊逐漸形成,,使信號(hào)的振幅增加直到最大。當(dāng)血凝塊回縮或溶解時(shí),杯蓋與血凝塊的聯(lián)結(jié)解除,,杯的運(yùn)動(dòng)不再傳遞給懸垂絲,。扭力轉(zhuǎn)換成電子信號(hào),通過(guò)A/D轉(zhuǎn)換盒從而在電腦上形成TEG圖形,。第八節(jié) 檢測(cè)項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用(一)一期止血缺陷篩檢試驗(yàn)的選擇與應(yīng)用 選用血小板計(jì)數(shù)(PLT)和出血時(shí)間(BT)作為篩檢試驗(yàn),根據(jù)篩檢試驗(yàn)的結(jié)果,,大致有以下四種情況:(二)二期止血缺陷篩檢試驗(yàn)的選擇與應(yīng)用選用APTT和PT作為篩檢試驗(yàn),,大致有以下四種情況:(三)纖溶亢進(jìn)篩檢試驗(yàn)的選擇與應(yīng)用可選用FDPs和D-D作為篩檢試驗(yàn),,大致有以下四種情況:二,、出血性疾病項(xiàng)目的選擇與應(yīng)用? 血小板量和質(zhì)異常項(xiàng)目的選擇與應(yīng)用? 遺傳性凝血因子缺陷項(xiàng)目的選擇與應(yīng)用? 獲得性凝血障礙項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用三、診斷血栓病項(xiàng)目的選擇和應(yīng)用? 篩選試驗(yàn):APTT,、PT,;Fg;PAgT,;血液黏度測(cè)定,。? 常用試驗(yàn) vWF:Ag;β-TG,;sFMC,;AT:A;FDPs和D-D,。? 特殊試驗(yàn) TM和(或)ET-1,;P-選擇素和/或TXB2;凝血酶原片段1+2(F1+2)和(或)FPA,;TAT,;TF;PAP,。 包括易引起血栓栓塞的抗凝因子缺陷,、凝血因子缺陷、纖溶因子缺陷以及代謝障礙等疾病,。常見易栓癥可應(yīng)用蛋白C及抗凝血酶的相關(guān)檢測(cè)聯(lián)合基因分析確定其病因,。四,、DIC項(xiàng)目的選擇與應(yīng)用 存在易誘發(fā)DIC的基礎(chǔ)疾病如各種嚴(yán)重感染、惡性腫瘤,、病理產(chǎn)科,、大型手術(shù)、廣泛創(chuàng)傷,、嚴(yán)重肝病等,。臨床上有多發(fā)性出血,不能用原發(fā)病解釋的微循環(huán)衰竭或休克,,廣泛性皮膚,、黏膜栓塞或腦、腎,、肺等臟器功能衰竭,,對(duì)抗凝治療有效。? 顯性(失代償性)DIC的診斷:≥5分,,每天重復(fù)檢測(cè)記分五,、抗血栓和溶血栓治療監(jiān)測(cè)項(xiàng)目的選擇與應(yīng)用(一)普通肝素和低分子量肝素治療的監(jiān)測(cè)? uFH首選APTT作為監(jiān)測(cè)試驗(yàn)? 在體外循環(huán)和血液透析中應(yīng)用uFH抗凝時(shí),需選用ACT? LMWH常規(guī)劑量勿需監(jiān)測(cè),,較大劑量的LMWH,,可選用因子Ⅹa抑制試驗(yàn)(抗因子Ⅹa活性測(cè)定)? 血小板計(jì)數(shù)無(wú)論應(yīng)用uFH或LMWH,均需觀察血小板計(jì)數(shù) 可選用纖維蛋白原(Fg),、凝血酶時(shí)間(TT)和纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDPs)作為出血監(jiān)測(cè)的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),。(四)抗血小板藥治療的監(jiān)測(cè) 可選用BT、PLT,、PAgT(五)降纖藥治療的監(jiān)測(cè) 可選用Fg、PLT1.機(jī)體的止血機(jī)制包括血管壁和血小板的作用,;凝血因子和抗凝因子的作用,;纖維蛋白溶解(纖溶)因子和抗纖溶因子的作用等。2.血管在初期止血中起的作用包括血管損傷后的收縮,、血小板的激活,、凝血系統(tǒng)的激活和局部血黏度的提高。其合成或分泌的多種促凝和抗凝物質(zhì)參與了初期止血,。3.血小板的功能主要是黏附,、聚集、釋放,、促凝和血塊收縮等,。其數(shù)量和相關(guān)分子檢測(cè)常用于診斷ITP、判斷止血功能以及監(jiān)測(cè)臨床用藥,。考試無(wú)捷徑,、學(xué)習(xí)有方法
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