多肽的制備方法有生物組織提取法,、基因重組表達(dá)法和化學(xué)合成法，目前已上市的多肽藥物有90%以上可通過(guò)化學(xué)合成法制備,。多肽藥物主要由氨基酸或者氨基酸衍生物組成,，可以通過(guò)氨基酸逐步連接或者多個(gè)肽鏈片段縮合，再經(jīng)過(guò)較復(fù)雜的純化工藝得到,。目前化學(xué)合成多肽主要包括液相法,、固相法、液相固相結(jié)合法,。

要研究多肽合成中雜質(zhì)的產(chǎn)生,，其實(shí)最容易想到的就是工藝缺失雜質(zhì)，因?yàn)楣滔嗪铣傻脑?，不可每一步都是百分之百的縮合,，難免會(huì)有某些氨基酸的缺失,，而且多肽鏈本身有可能會(huì)發(fā)生斷裂，有些結(jié)構(gòu)可能被修飾,。

還有一類是降解雜質(zhì),，比如說(shuō)有的氨基酸容易發(fā)生水解，或被氧化,，甚至形成聚合,。ICHQ3還要求對(duì)溶劑殘留與元素雜質(zhì)、基因毒進(jìn)行研究和控制,。目前申報(bào)多肽產(chǎn)品的話,，除了前兩類雜質(zhì)以外，后面的溶劑殘留,，元素雜質(zhì),，基因毒雜質(zhì)都要考慮。

起始物料的控制中,，最先想的就是氨基酸,，因?yàn)榘被崂镞叺碾s質(zhì)有可能會(huì)傳遞到多肽的產(chǎn)品里邊去，那怎么來(lái)控制,？

多肽合成用到的氨基酸種類比較多,，這里舉一個(gè)例子，比如經(jīng)常用的雙保護(hù)賴氨酸,。L型的賴氨酸,，它有可能包含D型的雜質(zhì)。另外,，這個(gè)雙保護(hù)氨基酸的制備過(guò)程當(dāng)中,，它可能會(huì)缺失一個(gè)保護(hù)基，還有形成一個(gè)二聚體,，還有也可能引入貝塔丙氨酸，甚至這兩個(gè)保護(hù)劑的位置互換,，或者兩個(gè)保護(hù)基都掉了,。這些雜質(zhì)都有可能會(huì)帶入到產(chǎn)品里去，所以在起始物料控制的時(shí)候,，需要分析這幾類雜質(zhì),。

剛才只是以一個(gè)氨基酸為例，但是多肽合成里面,，往往會(huì)用到幾種甚至十多種的保護(hù)氨基酸,，那么起始物料的控制對(duì)于分析部門來(lái)說(shuō)，QC就要做大量工作,。

多肽合成除了從物料的源頭氨基酸去控制雜質(zhì)以外,，還有更重要的是在合成過(guò)程中的控制,。如何確保在多肽合成過(guò)程當(dāng)中每一個(gè)氨基酸的縮合都完全？用的最多的是茚三酮檢測(cè)法,，這個(gè)反應(yīng)非常靈敏的,，作為一個(gè)定性的中控方法，目前是大家普遍采用的,。還有其它的方法,，比如TNBS法，四氯苯醌法,。如果要控制更好的話,，國(guó)外有用LC-MS法的，每一步的縮合反應(yīng),，包括脫保護(hù)基（Fmoc）都可以得到更精確的控制,。但是考慮到這個(gè)生產(chǎn)周期等方面的原因，國(guó)內(nèi)的中控方法還是比較弱的,，一般就用茚三酮檢測(cè)法,，或者是在關(guān)鍵控制點(diǎn)，也用LC-MS來(lái)跟蹤反應(yīng)是否縮合完全,。正是由于在中控的地方不是那么完善,，所以導(dǎo)致后期的純化及在產(chǎn)品質(zhì)量上往往面臨不小的挑戰(zhàn)。

參考資料：藥融圈