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標(biāo)本因素造成血常規(guī)異常結(jié)果的處理對策

 文進(jìn)玲玉 2021-06-04
臨床實(shí)驗(yàn)室
檢驗(yàn)行業(yè)技術(shù)型期刊,,汲取眾多行業(yè)專家精華,采編國際最新研究成果,,追蹤行業(yè)發(fā)展動(dòng)向,,注重臨床應(yīng)用與新技術(shù)新產(chǎn)品的推廣,不斷追蹤行業(yè)新技術(shù),、新方法,、新產(chǎn)品。努力搭建檢驗(yàn)行業(yè)組織,、專家學(xué)者,、各類企業(yè)、各級(jí)醫(yī)院良好的信息交流與溝通平臺(tái),。
576篇原創(chuàng)內(nèi)容
公眾號(hào)

作者 | 張民慶

單位 | 山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬成武醫(yī)院檢驗(yàn)科

血細(xì)胞分析是一種通過一些儀器的檢測對紅細(xì)胞,、白細(xì)胞等進(jìn)行分析的技術(shù),而其發(fā)展離不開庫爾特兄弟的庫爾特原理,,大量血細(xì)胞分析儀在各國的實(shí)驗(yàn)室里發(fā)揮著作用,。

此外,血細(xì)胞分析最常使用的就是血常規(guī)的檢查,。它包括紅細(xì)胞計(jì)數(shù),、血紅蛋白、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及其分類,、血小板計(jì)數(shù)等,,共有十余個(gè)項(xiàng)目[1]

血液分析儀的使用,,既提高了工作效率和質(zhì)量,,也為臨床的精準(zhǔn)診斷及時(shí)提供了更多有價(jià)值的數(shù)據(jù),對疾病的治療及預(yù)后也有著重要的意義,。

在實(shí)際工作中常常會(huì)受到一些異常因素的干擾,,出現(xiàn)一些異常的結(jié)果。在此我們主要討論血常規(guī)檢測過程中標(biāo)本自身的干擾因素及糾正措施,,以確保我們檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,。我們分別從白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板三大系列逐一分析,。

圖片
白細(xì)胞常受的干擾因素
01
有核紅細(xì)胞

成熟的紅細(xì)胞是無細(xì)胞核的,,成分是蛋白質(zhì)和鐵,有運(yùn)輸氧的功能,。但是人體內(nèi)細(xì)胞生長不可能沒有細(xì)胞核,,所以有核紅細(xì)胞實(shí)際上是未成熟的紅細(xì)胞,正常成人外周血中不能見到,,在出生1周之內(nèi)的新生兒外周血中可見到少量,。

成人外周血中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞均屬病理現(xiàn)象,可見于:

①增生性貧血:最常見于各種溶血性貧血,,急性失血性貧血,、巨幼紅細(xì)胞性貧血、嚴(yán)重的低色素性貧血,。以出現(xiàn)晚幼紅細(xì)胞或中幼紅細(xì)胞為多見,。外周血中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞表示骨髓中紅細(xì)胞系增生明顯活躍;

②紅血病、紅白血病:骨髓中幼稚紅細(xì)胞異常增生并釋放入血,,以原紅細(xì)胞,、早幼紅細(xì)胞為多見;

③髓外造血:骨髓纖維化時(shí),脾,、肝,、淋巴結(jié)等組織恢復(fù)胚胎時(shí)期的造血功能,這些組織因缺乏對血細(xì)胞釋放的調(diào)控能力,,幼稚血細(xì)胞大量進(jìn)入外周血,。各發(fā)育階段的幼紅細(xì)胞都可見到,并可見到幼稚粒細(xì)胞及巨核細(xì)胞;

④其他:如骨髓轉(zhuǎn)移癌,、嚴(yán)重缺氧等,。

當(dāng)外周血中出現(xiàn)大量有核紅細(xì)胞時(shí),它不能被稀釋液破壞,,而使WBC計(jì)數(shù)偏高,。部分五分類血細(xì)胞分析儀會(huì)提示有核RBC存在,部分五分類儀器也會(huì)計(jì)數(shù)有核RBC并自動(dòng)校正而直接給出準(zhǔn)確的WBC計(jì)數(shù)結(jié)果,。

糾正措施:手工分類計(jì)數(shù)100個(gè)WBC遇到的有核RBC數(shù),,依據(jù)WBC校正公式進(jìn)行計(jì)算,, 計(jì)算公式:白細(xì)胞的校正值/L=100X校正前白細(xì)胞數(shù)/(100+A)(A為100個(gè)白細(xì)胞中有核紅細(xì)胞的數(shù)量)。

02
瘧原蟲

人體感染瘧原蟲后,,得不到及時(shí)治療,,紅細(xì)胞內(nèi)的滋養(yǎng)體、裂殖體或配子體增多,,其消化血紅蛋白產(chǎn)生瘧色素,,從感染的紅細(xì)胞中釋放出來,繼而被中性粒細(xì)胞吞噬從而導(dǎo)致在測定這類細(xì)胞時(shí)儀器出現(xiàn)偏差,,誤認(rèn)為嗜酸性粒細(xì)胞偏高,,導(dǎo)致白細(xì)胞分類錯(cuò)誤。此現(xiàn)象我們可以在散點(diǎn)圖上面與正常細(xì)胞區(qū)分開,。

糾正措施:推片后手工分類計(jì)數(shù)100個(gè)中性粒細(xì)胞遇到的瘧原蟲數(shù),,依據(jù)校正公式進(jìn)行計(jì)算, 計(jì)算公式:嗜酸性粒細(xì)胞的校正值/L=校正前中性粒細(xì)胞數(shù)-[100X校正前中性粒細(xì)胞數(shù)/(100+A)](A為100個(gè)中性粒細(xì)胞遇到的瘧原蟲數(shù)),。

03
巨大血小板

正常血小板呈兩面微凸的圓盤狀,,直徑約1.5~3um;大血小板平均直徑約2~4微米,,厚0.5~1.5微米,,平均體積7立方微米4~7um,與紅細(xì)胞接近,;巨大血小板直徑>7um,,常為7~20um,[2]可達(dá)淋巴細(xì)胞大小,。

巨大血小板可見于巨大血小板綜合征,、ITP、粒細(xì)胞白血病,、血小板無力癥,、MDS、骨髓移植及脾切除后,,這些巨大PLT被當(dāng)作WBC計(jì)數(shù),,使WBC假性增高。

糾正措施:用手工方法對WBC進(jìn)行計(jì)數(shù),。

04
高膽紅素

黃疸是慢性肝炎的主要表現(xiàn)之一,,由于肝細(xì)胞受損、壞死后攝取,、轉(zhuǎn)化,、排泄膽紅素的能力下降使得血液中的膽紅素濃度增增高所致。

隨著膽紅素的增高,,阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀出現(xiàn)白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高加劇,,當(dāng)384.1μmol/L時(shí)對WBC的計(jì)數(shù)影響顯著,,儀器無法分群。

原因目前認(rèn)為:一些黃疸的肝病患者,,紅細(xì)胞膜表面脂類異常,,具有抵抗溶血素的作用,導(dǎo)致紅細(xì)胞溶血不全[4-6],,當(dāng)溶血素不能完全破壞紅細(xì)胞時(shí),由于紅細(xì)胞與淋巴細(xì)胞大小接近,,從而導(dǎo)致白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性增高,。

糾正措施:采用手工方法計(jì)數(shù)WBC。

05
抗凝劑或/和溫度

細(xì)胞聚集類型可以分中性粒細(xì)胞聚集,、淋巴細(xì)胞聚集,、紅細(xì)胞聚集、白細(xì)胞血小板聚集等,,外周血白細(xì)胞聚集是一種罕見的現(xiàn)象,,目前報(bào)告案例極少。

白細(xì)胞聚集常見于成人,,偶見于兒童,,可能與惡性腫瘤、感染,、肝病和自身免疫疾病等有關(guān),,但白細(xì)胞聚集和疾病關(guān)系尚未完全明確。

白細(xì)胞聚集發(fā)生的機(jī)制,,目前認(rèn)為主要與抗凝劑EDTA-K2或/和溫度有關(guān),,聚集后可以造成白細(xì)胞計(jì)數(shù)假性減低。

糾正措施:37℃溫浴30分鐘或進(jìn)行血漿置換,。

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紅細(xì)胞系統(tǒng)常受的干擾因素
01
冷凝集標(biāo)本

冷凝集素又稱冷型自身抗體,,是紅細(xì)胞自身免疫性抗體。其特點(diǎn)在低溫時(shí),,可使自身的紅細(xì)胞,、O型紅細(xì)胞或受檢者血型相同的紅細(xì)胞發(fā)生凝集,0~4℃凝集達(dá)高峰,,37℃時(shí)凝集消失,。

冷凝集素發(fā)生時(shí)HB受其影響不大,而紅細(xì)胞其他參數(shù)嚴(yán)重受干擾,,而MCHC是由HB和和HCT數(shù)值計(jì)算得來,,間接反映RBC和HCT的變化情況,多數(shù)不會(huì)超過380g/L,。

故我們平時(shí)可以通過MCHC的異常升高,,同時(shí)伴有RBC和HCT顯著降低,,MCV、MCHC也異常升高,,HB和RBC比例明顯異常(正常人群HB和RBC比值約為30:1)可以判斷是否存在紅細(xì)胞冷凝集現(xiàn)象,。

發(fā)生凝集時(shí)肉眼觀察試管管壁有細(xì)沙狀小顆粒凝集現(xiàn)象,陽性主要見于冷凝集素綜合征患者,,流感,、傳單、支原體肺炎,、淋巴瘤,、瘧疾等也可引起冷凝集素效價(jià)繼發(fā)性增高,多數(shù)為IGM型,,少數(shù)為IgG型,,正常人冷凝集素效價(jià)在1:8—1:16之間,反應(yīng)最適溫度為4℃,。

糾正措施:①37℃水浴箱30min,,立即上機(jī)檢測;②血球儀旁抽血,,立即上機(jī)檢測,;③凝集嚴(yán)重,37℃水浴并進(jìn)行血漿置換,,修正紅系相關(guān)參數(shù),。

02
脂血標(biāo)本

脂血是最常見的干擾因素。由于血紅蛋白檢測原理是比色法,,引起血清濁度增大的因素(如高脂血癥,、脂肪乳輸注標(biāo)本、WBC>50×109/L等)都可導(dǎo)致其假性增高,,進(jìn)而引起MCH,、MCHC顯著增加。

糾正措施:血漿置換,,方法如下:

3000r/min離心10分鐘,,用加樣器吸取EDTA管內(nèi)血漿并棄去,吸樣時(shí)經(jīng)過管口在管壁上劃一下,,避免吸頭外攜帶太多血漿,,記錄棄去的總量,用同一加樣器加入等體積生理鹽水或稀釋液,,混勻后再上機(jī)檢測,。

置換時(shí)最好用量程較小的加樣器,多次吸樣,,并從血漿的上層開始操作,,避免太接近細(xì)胞層而吸走白細(xì)胞和血小板,。如此反復(fù)操作3次后上機(jī)檢測。

03
高膽紅素

血細(xì)胞分析儀在進(jìn)行HB測定時(shí)一般采用溶血比色法,,即加入溶血素破壞紅細(xì)胞,,將HB釋放出來,然后對溶液進(jìn)行比色,。

如果標(biāo)本正常,,其稀釋液本底與釋放出的HB呈現(xiàn)一定的顏色,并在接近540nm波長處有最大吸收,;如果標(biāo)本高膽紅素,,高膽紅素血清被稀釋到比色樣本中,明顯的顏色會(huì)干擾HB比色結(jié)果,,造成假性升高,,進(jìn)而導(dǎo)致MCH,、MCHC升高,。

糾正措施:血漿置換(方法同上)

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血小板常受的干擾因素
01
PLT聚集

①采血不順利、混勻不均或血量與抗凝劑比例失調(diào)時(shí)可引起血小板破壞和聚集,,可使血小板計(jì)數(shù)假性降低,。

糾正措施:重新采集血液或者手工方法計(jì)數(shù)PLT。

②抗凝劑抗凝,,一般是EDTA-K2誘導(dǎo)血小板聚集,,偶見枸櫞酸鈉或和肝素抗凝劑引起聚集,或者是三種抗凝劑都引起血小板聚集的的現(xiàn)象,,造成血分析儀不能辨認(rèn),,引起PLT假性減少。

關(guān)于EDTA-PTCP的發(fā)生機(jī)制,,一般認(rèn)為患者血液中存在抗血小板自身抗體,,在EDTA存在下,自身抗體識(shí)別細(xì)胞粘附受體糖蛋白IIb-IIIa(GpIIb-IIIa),,進(jìn)一步刺激血小板激活抗原如CD62P(P-selectin,,P-選擇素)、CD63和thrombospondin(凝血栓蛋白)的表達(dá),,促發(fā)酪氨酸激酶的激活,、血小板聚集,最終導(dǎo)致假性血小板數(shù)量的結(jié)果[4-6]

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圖1 106例體外血小板聚集造成假性血小板減少癥情況分析

根據(jù)該報(bào)道的資料,,106例假性血小板減少的病例中,,由EDTA引起的有52例,占49.1%,,由EDTA和枸櫞酸鈉或肝素共同引起的有10例,,占9.4%,,由三種抗凝劑同時(shí)引起的有7例,占6.6%,,而因難抽血引起的有28例,,占26.4%??梢?,EDTA是引起體外聚集而導(dǎo)致假性血小板減少的主要原因。

糾正措施:

①用不含抗凝劑的采血管在血球儀旁抽血,,立即上機(jī)檢測,;

②用不含EDTA抗凝劑稀釋液立即稀釋標(biāo)本或顯微鏡人工計(jì)數(shù)PLT,同時(shí)要觀察血涂片是否有PLT集聚,;

③在EDTA-K2抗凝劑中管中提前加入5mg/L的硫酸阿米卡星200微升或者抽血后30分鐘內(nèi)加入效果較好,,并與4小時(shí)內(nèi)檢測最好。

④使用自動(dòng)解聚血小板的儀器,,開通熒光PLT-O參數(shù)通道,。

在檢驗(yàn)科的血液學(xué)實(shí)驗(yàn)室,一般處理TDTA-PTCPD的流程如下圖(2)

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圖2

02
小細(xì)胞低色素性貧血標(biāo)本

電阻抗法血細(xì)胞分析儀,,僅能識(shí)別顆粒大小,,不能區(qū)分顆粒性質(zhì)。當(dāng)MCV<60fl時(shí),,血細(xì)胞分析儀的PLT計(jì)數(shù)容易受小細(xì)胞的干擾而假性增高,。缺鐵性貧血、地中海貧血等患者的小細(xì)胞對某些儀器PLT的計(jì)數(shù)有明顯干擾,。

糾正措施:用手工計(jì)數(shù)PLT或者采用光學(xué)法流式血細(xì)胞分析儀檢測血小板,。

03
PLT衛(wèi)星現(xiàn)象

由EDTA抗凝劑誘導(dǎo)引起的PLT圍繞在中性粒細(xì)胞或淋巴細(xì)胞/淋巴瘤細(xì)胞周圍,形成衛(wèi)星現(xiàn)象,。一般引起PLT輕度或中度減少,。

糾正措施:

①更換為枸櫞酸鈉或肝素管重新采集血液;

②用不含EDTA抗凝劑稀釋液立即稀釋標(biāo)本或顯微鏡人工計(jì)數(shù)PLT,,同時(shí)要觀察血涂片是否有PLT集聚,;

③在EDTA-K2抗凝劑中管中提前加入5mg/L的硫酸阿米卡星200微升或者抽血后30分鐘內(nèi)加入效果較好,并與4小時(shí)內(nèi)檢測最好,。

④用不含抗凝劑的采血管在血球儀旁抽血,,立即上機(jī)檢測。

04
細(xì)胞碎片

阻抗法血細(xì)胞分析儀不能完全將PLT與其他類似大小物質(zhì),,如紅細(xì)胞碎片或白細(xì)胞碎片,、灰塵等區(qū)別,引起PLT假性增高。

糾正措施:用手工計(jì)數(shù)PLT或者采用光學(xué)法流式血細(xì)胞分析儀檢測血小板,。

05
某些藥物的影響

一些解熱鎮(zhèn)痛藥物,,頭孢類,甲硝唑等抗生素,,奎寧抗瘧藥,,肝素等藥物長期服用可以引起血小板減少。

糾正措施:停用導(dǎo)致血小板減少的藥物或更換其他藥物,。

06
遺傳因素的影響

May-Hegglin異常和Bernard-Soulier綜合征通常伴有中度或重度的血小板減少,。

綜上所述,我們醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人員在日常工作中經(jīng)常碰到上述情況的發(fā)生,,加強(qiáng)業(yè)務(wù)知識(shí)的儲(chǔ)備,,及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理應(yīng)對異常結(jié)果,合理分析原因,,給臨床醫(yī)生提供有診斷價(jià)值的報(bào)告是我們檢驗(yàn)人刻不容緩的責(zé)任,。


專家點(diǎn)評(píng)

本文作者在日常工作中善于總結(jié),將常見的血液標(biāo)本因素造成異常結(jié)果的原因,,分別按照白細(xì)胞,、紅細(xì)胞和血小板進(jìn)行歸納分析,并參考相關(guān)文獻(xiàn)逐一給出解決辦法,,給臨床檢驗(yàn)工作者提供了便利,。

點(diǎn)評(píng)專家簡介:陳允芝,,副主任技師,,臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師,醫(yī)學(xué)碩士,,山東省醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)基層學(xué)組委員,,菏澤市醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)專業(yè)委員會(huì)副主任委員,發(fā)表國家級(jí),、省級(jí)論文多篇,,菏澤市科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)兩項(xiàng),先后獲得菏澤市五四青年獎(jiǎng)?wù)?,菏澤市?yōu)秀青年工作者,,成武縣青年五四獎(jiǎng)?wù)拢晌淇h“三八”紅旗手等稱號(hào),。


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【參考文獻(xiàn)】

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來源:檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)

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