靶向CD8+T細(xì)胞的免疫檢查點(diǎn)阻斷療法正在推動(dòng)癌癥臨床治療的一場(chǎng)革命,，而越來(lái)越多的證據(jù)表明,，NK細(xì)胞有望成為用于開(kāi)發(fā)下一代癌癥免疫療法的“主力軍”。

6月24日,，來(lái)自澳大利亞莫納什大學(xué)的3位科學(xué)家在Nature Reviews Cancer上最新發(fā)表了一篇題為“The cancer–natural killercell immunity cycle”的綜述文章,，討論了有關(guān)“NK細(xì)胞是保護(hù)性抗腫瘤免疫反應(yīng)中一種關(guān)鍵免疫組成”的近期臨床證據(jù)，分析了癌癥-NK細(xì)胞免疫循環(huán)（cancer–NK cell immunity cycle）的主要階段,，概述了25種腫瘤類(lèi)型中NK細(xì)胞基因表達(dá)的預(yù)后價(jià)值,。此外，研究者們還討論了NK細(xì)胞的角色如何隨著腫瘤進(jìn)展而演變,，為靶向NK細(xì)胞來(lái)增強(qiáng)癌癥免疫治療響應(yīng)率提供了新的機(jī)會(huì)。

該綜述中的幾張圖清晰概述了“腫瘤細(xì)胞與NK細(xì)胞的相互作用”,、“癌癥中NK細(xì)胞的預(yù)后價(jià)值”,、“NK細(xì)胞介導(dǎo)腫瘤免疫編輯和逃逸”等方面的信息。

上圖是已知的主要NK細(xì)胞受體及其對(duì)應(yīng)的腫瘤細(xì)胞配體的示意圖,。成熟的人類(lèi)NK細(xì)胞會(huì)表達(dá)一系列的種系編碼的刺激性和抑制性受體。腫瘤配體和NK細(xì)胞受體的表達(dá)水平?jīng)Q定了NK細(xì)胞是否會(huì)殺傷腫瘤細(xì)胞,。一些被研究的較為深入的受體-配體對(duì)包括NKG2D-MIC/ULBP,、LFA1-ICAM1,、NKp30-B7-H6、CD28H-B7-H7,、NKp44-HLA-DP,、CD2-CD58、2B4-CD48,、DNAM1/TIGIT/CD96-CD155/CD112,、KIR2DL1/KIR2DL2/KIR2DL3-HLA-C、NKG2A/NKG2C-HLA-E等,。

NK細(xì)胞還會(huì)表達(dá)多種激活的細(xì)胞因子（如IL-15,、IL-21、IL-18和IL-12）的受體,，以及免疫抑制因子（如TGF-β,、activin-A）的受體,。這些受體的平衡也影響著NK細(xì)胞受體信號(hào)的整合,，最終控制NK細(xì)胞的激活與腫瘤細(xì)胞裂解。

上圖顯示,，皮膚黑色素瘤（SKCM）、肺腺癌(LUAD)等癌癥因編碼多種NK細(xì)胞受體及其相關(guān)細(xì)胞因子和配體的基因,，以及編碼影響淋巴細(xì)胞活性的細(xì)胞因子的基因高表達(dá),，往往具有較好的預(yù)后。相反,，一些癌癥類(lèi)型,，如葡萄膜黑色素瘤（UVM）顯示出了與這些基因高表達(dá)相關(guān)的較差的預(yù)后。

NK細(xì)胞在癌癥發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮多種免疫功能,。

Sep 1：NK細(xì)胞負(fù)責(zé)識(shí)別處于應(yīng)激或早期轉(zhuǎn)化狀態(tài)的細(xì)胞，能夠直接殺傷敏感細(xì)胞（激活性配體/抑制性配體比率較高的細(xì)胞）,。

Sep2和Sep3：由于NK細(xì)胞優(yōu)先殺傷敏感細(xì)胞,，因此腫瘤進(jìn)化出了應(yīng)對(duì)策略，減少對(duì)NK細(xì)胞敏感的腫瘤變體的數(shù)量（Sep2）,，增加對(duì)NK細(xì)胞耐藥的腫瘤變體的數(shù)量（Sep3）,。

Sep4：最終的結(jié)果是原發(fā)性腫瘤的形成，這種腫瘤可能通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤配體的表達(dá)或通過(guò)形成免疫抑制腫瘤微環(huán)境（這種微環(huán)境由骨髓來(lái)源的抑制性細(xì)胞浸潤(rùn)和/或產(chǎn)生驅(qū)動(dòng)）來(lái)逃避NK細(xì)胞的免疫監(jiān)視,。

Sep5：如果腫瘤及其微環(huán)境的進(jìn)化導(dǎo)致NK細(xì)胞配體或因子的重新表達(dá)(step 5a),， NK細(xì)胞還能夠通過(guò)趨化因子(如XCL1和XCL2)的產(chǎn)生驅(qū)動(dòng)腫瘤炎癥，使腫瘤成為免疫學(xué)上的“熱腫瘤”,。如果這一步?jīng)]有發(fā)生,，那腫瘤依然是免疫學(xué)上的“冷腫瘤”(step 5b)。

Sep6：傳統(tǒng)的1型樹(shù)突狀細(xì)胞(cDC1s)可被招募到“熱腫瘤”中,，然后將腫瘤新抗原(NeoAgs)呈遞給淋巴結(jié)中的CD8+T細(xì)胞,。

Sep7和Sep8：接著，新抗原特異性（neoantigen-specific）CD8+ T細(xì)胞會(huì)遷移到表達(dá)NK細(xì)胞來(lái)源的CC-趨化因子配體5(CCL5)的免疫學(xué)“熱腫瘤”中,，引發(fā)抗腫瘤免疫（Sep7）,，導(dǎo)致腫瘤消退（Sep8）。

Sep9：活化的腫瘤特異性CD8+ T細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生干擾素-γ (IFN-γ),，后者會(huì)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞上抑制性配體（如PD-L1）的表達(dá),。CD8+T細(xì)胞調(diào)節(jié)性受體PD-1與PD-L1相互作用后會(huì)損害CD8+T細(xì)胞的抗腫瘤反應(yīng)，導(dǎo)致腫瘤抵抗,。

Sep10：不過(guò),，這種腫瘤抵抗可以通過(guò)免疫檢查點(diǎn)阻斷療法（PD-1/PD-L1抗體）來(lái)克服，這些抗體可以恢復(fù)CD8+ T細(xì)胞的抗腫瘤免疫(step 10a),。然而,，在許多病例中，腫瘤對(duì)免疫檢查點(diǎn)阻斷治療沒(méi)有反應(yīng)(step10b),。

Step 11：在某些情況下,，最初對(duì)免疫檢查點(diǎn)阻斷療法有反應(yīng)的腫瘤可通過(guò)使編碼向CD8+ T細(xì)胞呈遞新抗原所需蛋白（如JAK1、JAK2,、β2-microglobulin）的基因發(fā)生突變來(lái)進(jìn)化出耐藥性,。

Step 12：由于對(duì)免疫檢查點(diǎn)阻斷療法耐藥可能與主要組織相容性復(fù)合體I類(lèi)(MHC-I)丟失有關(guān)，因此,，對(duì)免疫檢查點(diǎn)阻斷療法耐藥的腫瘤可能對(duì)NK細(xì)胞免疫更加敏感,，提示了一個(gè)新的治療方向——靶向NK細(xì)胞。（補(bǔ)充知識(shí)：正常情況下,，當(dāng)T細(xì)胞將癌細(xì)胞表面呈現(xiàn)的一種肽片段（即抗原）識(shí)別為外來(lái)物時(shí),，就會(huì)觸發(fā)免疫反應(yīng)。而細(xì)胞毒性T細(xì)胞表面T細(xì)胞受體（TCR）對(duì)腫瘤抗原的這種識(shí)別依賴(lài)于癌細(xì)胞表面上MHC-I類(lèi)分子對(duì)抗原的呈遞,。越來(lái)越的研究顯示,，MHC分子失去呈遞腫瘤抗原的能力也是癌細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)攻擊的一種解釋。而由于MHC-I是NK細(xì)胞抑制性受體的一個(gè)配體,，因此,，靶細(xì)胞上MHC-I分子的減少或缺失可降低源于NK細(xì)胞的抑制性信號(hào)的強(qiáng)度，促進(jìn)NK細(xì)胞的激活,。）

由于“冷腫瘤“或不響應(yīng)免疫檢查點(diǎn)阻斷療法的腫瘤無(wú)法釋放抗腫瘤免疫力,，這些腫瘤類(lèi)型可能會(huì)獲益于基于NK細(xì)胞的治療途徑，這類(lèi)治療的目的是增加腫瘤炎癥,，重啟step 5a中的癌癥-NK細(xì)胞免疫循環(huán),。

上圖a顯示,，細(xì)胞轉(zhuǎn)換的早期事件能夠誘導(dǎo)激活性NK細(xì)胞受體（MICA,、MICB、B7-H6,、CD58,、ICAM1）相應(yīng)的配體的表達(dá)，并改變抑制性self-ligands（HLA-C和HLA-E）的表達(dá),。強(qiáng)烈的致癌事件可能導(dǎo)致大量對(duì)NK細(xì)胞具有不同免疫原性的腫瘤細(xì)胞,，這種對(duì)NK細(xì)胞免疫原性的差異是基于激活性和抑制性配體的平衡，以及可溶性因子（諸如IL-15一樣的刺激性細(xì)胞因子）或免疫抑制因子（NK細(xì)胞受體裂解的腫瘤配體或TGF-β）的產(chǎn)生,。

NK細(xì)胞敏感性腫瘤變體（綠色腫瘤細(xì)胞,，這些細(xì)胞中激活性配體或因子的表達(dá)強(qiáng)于抑制性配體或因子的表達(dá)）在遭遇成熟的NK細(xì)胞后會(huì)優(yōu)先被殺死，從而形成經(jīng)NK細(xì)胞“編輯“過(guò)的腫瘤細(xì)胞池（NK cell ‘edited’ pool of tumour cells）,。圖b顯示,，在NK細(xì)胞“編輯“過(guò)的腫瘤細(xì)胞池中，對(duì)NK細(xì)胞抵抗的腫瘤變體（紫色腫瘤細(xì)胞，這些細(xì)胞中激活性配體或因子的表達(dá)弱于抑制性配體或因子的表達(dá)）將會(huì)進(jìn)化,，并且隨著時(shí)間的推移,，如果NK細(xì)胞的抗腫瘤活性保持不變，它們就會(huì)成為主導(dǎo)性的腫瘤細(xì)胞克隆,，導(dǎo)致NK細(xì)胞“逃逸”腫瘤細(xì)胞池的形成,。

CAR-T細(xì)胞療法在治療復(fù)發(fā)難治性白血病方面的成功,，以及可用于制造復(fù)雜細(xì)胞治療產(chǎn)品的新興基因修飾技術(shù)的興起導(dǎo)致了過(guò)繼細(xì)胞治療領(lǐng)域的爆發(fā),。不過(guò)，一些局限性阻礙了CAR-T細(xì)胞療法的廣泛應(yīng)用,，包括物流,、交貨周期、生產(chǎn)自體產(chǎn)品的成本,、潛在的毒性（例如,，細(xì)胞因子釋放綜合征(CRS)和免疫效應(yīng)細(xì)胞相關(guān)神經(jīng)毒性綜合征(ICANS))、與管理這些毒性有關(guān)的間接成本,、對(duì)實(shí)體腫瘤療效有限,。為了克服這些障礙，業(yè)界對(duì)同種異體CAR產(chǎn)品進(jìn)行了快速投資,，包括同種異體CAR-T細(xì)胞,，CAR-巨噬細(xì)胞以及CAR-NK細(xì)胞。NK細(xì)胞產(chǎn)品的主要優(yōu)勢(shì)在于,，在同種異體的情況下,，NK細(xì)胞被認(rèn)為是安全的，因?yàn)樗鼈儾粫?huì)導(dǎo)致CRS,、ICANS或移植物抗宿主病(GvHD),，因此可以作為完全“現(xiàn)貨型”產(chǎn)品使用。這無(wú)疑將降低生產(chǎn)的直接成本（因?yàn)樗梢耘可a(chǎn),，而不是針對(duì)每個(gè)患者進(jìn)行個(gè)性化生產(chǎn)),，以及與物流和患者監(jiān)控相關(guān)的間接成本。

自體CAR-T細(xì)胞的生產(chǎn)和使用與新興的同種異體CAR-NK細(xì)胞產(chǎn)品的比較如下圖所示,。對(duì)于自體CAR-T細(xì)胞療法,，患者在醫(yī)院接受治療，并在那里進(jìn)行數(shù)周的毒性監(jiān)測(cè)和處理(見(jiàn)圖a部分),。對(duì)于同種異體CAR-NK細(xì)胞療法,，產(chǎn)品可以以多種劑量進(jìn)行冷凍和存儲(chǔ)，用于不同的患者,，并在需要時(shí)使用“現(xiàn)成”的產(chǎn)品,。由于迄今為止未觀察到CRS和/或ICANS,，因此接受同種異體CAR-NK細(xì)胞治療可能無(wú)需住院(見(jiàn)圖b部分)。

近期,，美國(guó)首個(gè)CAR-NK細(xì)胞臨床試驗(yàn)（NCT03056339）結(jié)果揭曉,，數(shù)據(jù)積極。11例患者(5例CLL,、6例NHL)中有8例可響應(yīng)臍帶血來(lái)源的CD19 CAR-NK細(xì)胞治療，且沒(méi)有出現(xiàn)主要的毒性作用（CRS,、ICANS等）,，其中，有7例患者在給藥30天內(nèi)表現(xiàn)出癌癥完全消失的跡象,。此外,，靶向mesothelin (NCT03692637)、CD22(NCT03692767),、rOBO1(NCT03940820),、PSMA (NCT03692663)、NKG2D(NCT03415100),、CD7(NCT02742727),、BCMA (NCT03940833)的CAR-NK細(xì)胞療法的I期和II期臨床試驗(yàn)也正在進(jìn)行中。

同種異體CAR-NK療法的一個(gè)挑戰(zhàn)是,，注射到體內(nèi)后會(huì)受到患者T細(xì)胞的排斥,，因此必須優(yōu)化宿主環(huán)境以及T細(xì)胞消耗來(lái)減少排斥反應(yīng)。另一個(gè)需要注意的點(diǎn)是,，CAR-NK在識(shí)別腫瘤抗原后不會(huì)發(fā)生細(xì)胞增殖,，而細(xì)胞因子驅(qū)動(dòng)的CAR-NK細(xì)胞增殖取決于患者的適應(yīng)程度。為了改善CAR-NK的持久性,，有團(tuán)隊(duì)使CAR-NK也同時(shí)表達(dá)IL-15來(lái)支持CAR-NK在體內(nèi)的存活,，也有團(tuán)隊(duì)通過(guò)刪除CISH（cytokine-inducible sH2-containing）來(lái)增強(qiáng)NK細(xì)胞產(chǎn)品對(duì)IL-15的響應(yīng)。

NK細(xì)胞已成為癌癥免疫治療的主要靶點(diǎn),。基于NK細(xì)胞的免疫療法在誘發(fā)腫瘤殺傷和腫瘤炎癥以及隨后的抗腫瘤CD8+T細(xì)胞反應(yīng)方面的潛力值得進(jìn)一步探索,。NK靶向療法與免疫檢查點(diǎn)阻斷療法的聯(lián)合有望形成協(xié)調(diào)的抗腫瘤免疫力,，克服腫瘤免疫抑制以及對(duì)免疫檢查點(diǎn)阻斷療法的耐藥性。盡管目前科學(xué)家們對(duì)NK細(xì)胞相關(guān)調(diào)節(jié)通路的基礎(chǔ)理解不如CD8+T細(xì)胞透徹,，但由于NK細(xì)胞展現(xiàn)出了增強(qiáng)免疫檢查點(diǎn)阻斷療法療效的潛能,，相關(guān)的研究投入會(huì)隨之增加，因此,，在不久的將來(lái),，有望鑒定出新的NK細(xì)胞特異性免疫治療靶點(diǎn),，用于新型癌癥免疫療法的開(kāi)發(fā)。

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